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静脉注射骨髓间充质干细胞在脊髓损伤后的膀胱功能修复中的作用
对骨髓间充质干细胞(MSCs)的生物学特性、脊髓损伤后下尿路功能改变及其机制、干细胞修复脊髓损伤后膀胱功能的研究及其作用机制进行综述.
关键词： 脊髓损伤 膀胱 骨髓间充质干细胞(MSCS) 综述 -
成骨诱导:兔骨髓间充质干细胞的形态和功能特征
目的探讨体外成骨诱导的兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的形态和功能特征,为骨组织工程中种子细胞的研究提供依据.方法选用生长状态良好的传1代的兔MSCs,在体外进行成骨活性诱导,并进行形态学观察和碱性磷酸酶、骨钙素等功能性指标的检测.结果体外成骨诱导的兔骨髓间充质干细胞从诱导的第2周即开始表达成骨细胞的活性,到第4周趋于成熟,此过程中性态和功能均具有一定的阶段性.结论经过体外成骨诱导的兔MSCs表现出典型的成骨细胞阶段性形态特征和功能特征,可以作为骨组织工程的种子细胞.
关键词： 体外培养 骨髓间充质干细胞(MSCS) 骨组织工程 -
EGFP基因转染骨髓间充质干细胞的实验研究
目的:探讨外源性EGFP基因转染修饰兔骨髓间充质干细胞(m esenchymal stem cells,MSCs)的可行性.方法:用增强型荧光绿色蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)作为报告基因,以脂质体法转染骨髓间充质干细胞,观察转染结果、表达情况及对靶细胞活力的影响.结果:经荧光显微镜下观察证实:成功地对骨髓间充质干细胞实现了基因转染.结论:兔骨髓间充质干细胞能够在体外适宜的条件下进行长期培养;骨髓间充质干细胞可直接作为基因靶细胞,建立稳定表达EGFP的骨髓间充质干细胞系具有可行性,为进一步做标记的MSCs细胞的移植研究奠定基础.
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骨髓间充质干细胞中医药干预研究的现状及其前景和策略
骨髓间充质干细胞(MSCs)是一种多能干细胞,用于自体移植,不存在MHC限制,无免疫原性且不牵涉到伦理问题,是组织工程的重点种子细胞.但在现代医学对MSCs研究及应用中面临诸多困境,诸如细胞来源缺乏、体外诱导分化为目标细胞的转化率较低、去分化和恶化倾向及移植后存活率、归巢于组织的百分率比较低等.而传统医学具有"整体统一、未病先防、既病防变"的综合观念及中药"多因微效"多靶点、多效应、毒副作用小的治疗特点.在这些方面传统医学面临重要的机遇和挑战,在此做一综述和展望.
关键词： 骨髓间充质干细胞(MSCS) 中医药干预 -
重组Osf2定向调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化
目的研究成骨细胞特异性因子(Osf2)调控骨髓间充质于细胞(MSC2s)定向分化为成骨细胞(OB)的分子机制.方法用Percoll密度梯度离心法分离获得大鼠的MSCs,通过细胞免疫化学、免疫荧光、透射电镜及流式细胞仪等方法进行鉴定.构建真核表达载体pcDNA3.1(+)/Osf2,通过脂质体系统转染传代培养后的MSCs,用Northern Blot检测三种OB细胞外基质蛋白mRNA的表达情况.结果转染后的MSCs都表达OB特异性基质蛋白骨钙素、骨桥接蛋白和Ⅰ型胶原.结论Osf2在转录水平定向调控MSCs分化为成骨细胞,可应用于骨质疏松、骨缺损等疾患的基因治疗.
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MSCs对紫外线诱导皮肤光老化大鼠模型凋亡的影响
目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对紫外线诱导皮肤光老化模型大鼠皮肤细胞凋亡的影响.方法 采用15 W UVA和UVB紫外灯,每日照射大鼠背部裸露皮肤区2h,共照射60d.随机分为对照组、模型组及MSCs治疗组,每组10只.体外分离培养MSCs,在大鼠背部裸露皮肤区多点注射,1次/w,共8 w.取皮肤组织,利用RT-PCR方法检测.结果 治疗组Bax mRNA表达明显低于模型组(P＜0.05),但接近于对照组(P＞0.05).治疗组Bcl-2 mRNA表达高于模型组(P＜0.05),低于对照组(P＜0.05).结论 MSCs对紫外线诱导的皮肤光老化模型大鼠皮肤细胞有抑制凋亡作用.
关键词： 骨髓间充质干细胞(MSCS) 皮肤光老化 凋亡 -
骨髓间充质干细胞对氯化铵致大鼠急性肺水肿防治作用的研究
目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对氯化铵诱发大鼠急性肺水肿的防治作用.方法80只SD雌性大鼠随机分为肺水肿组、治疗组、预防组、空白对照组及对照组.腹腔注射氯化铵(6% NH4Cl,0.4 mL/100 g)建立模型,预防组及治疗组分别于模型建立前后移植DAPI标记的MSCs,移植后不同时间点(30 min,2 h,第1天,第7天)测定血清肺表面活性物质相关蛋白(SP-A)含量,观察肺脏结构变化,检测MSCs在肺脏定植及细胞广谱角蛋白(PCK)表达.结果治疗组血清SP-A含量30 min、2 h时明显高于肺水肿组(P<0.01),而预防组与肺水肿组差异无统计学意义(P>0.05).2 h时肺水肿组及预防组病变明显,治疗组肺水肿病变减轻.治疗组第1天时肺组织有植入细胞,第7天时支气管壁少量植入细胞,同时有PCK表达.结论骨髓间充质干细胞治疗性移植可减轻肺水肿,干细胞预防性移植不减轻肺水肿.
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高频振荡通气联合骨髓间充质干细胞移植对急性呼吸窘迫综合征保护作用的实验研究
目的 探讨高频振荡通气(HFOV)联合骨髓间充质干细胞(MSCs)对内毒素诱发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型兔的保护作用.方法 家兔34只,2只用于制备骨髓间充质干细胞,剩余32只随机分为四组:ARDS组、HFOV组、MSCs移植组和HFOV+ MSCs移植组(每组各8只).全骨髓培养法体外培养兔MSCs,传至第3代备用.通过向气管内滴注内毒素建立ARDS模型.分别在干预后2、6及24 h时间点,取动脉血行血气分析.24 h后处死动物,取左肺上叶称质量后,计算湿质量/干质量比值(W/D)；右肺用10 mL生理盐水灌洗,收集灌洗液,检测中性粒细胞数目及蛋白含量；左肺下叶取标本,行病理学检查.结果 HFOV+ MSCs组PaO2在三个时间点均明显高于ARDS组(P＜0.05),在24h时间点分别与MSCs组及HFOV组比较差异也均有统计学意义(P＜0.05)；HFOV+ MSCs组PaCO2在24 h时间点明显低于其余三组(P＜0.05).与其余三组分别比较,HFOV+ MSCs组24 h时间点W/D、支气管肺泡灌洗液中性粒细胞数目及蛋白含量均明显降低(P＜0.05).肺组织病理学提示,HFOV组及MSCs组的损伤程度明显减轻,HFOV+ MSCs组损伤轻.结论 HFOV联合MSCs能明显改善内毒素诱发ARDS模型兔的PaO2和PaCO2,明显减轻炎症反应及肺损伤,优于单一方法,具有协同作用.
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HFOV 联合 MSCs 移植对急性肺损伤后肺纤维化的影响
目的：探讨高频振荡通气（HFOV）联合骨髓间充质干细胞（MSCs）对内毒素诱发急性肺损伤模型兔肺纤维化的影响。方法家兔34只，2只用于制备MSCs，剩余32只随机分为4组：肺损伤组、HFOV组、MSCs移植组和HFOV＋MSCs移植组，每组8只。全骨髓培养法体外培养兔MSCs，传至第3代备用。通过向气管内滴注内毒素建立急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征模型。分别在干预后2周时间点，采用酸解法测定肺组织羟脯氨酸含量；采用ELISA法检测各组血清和支气管肺泡灌洗液中转化生长因子-β（ TGF-β）及单核细胞趋化蛋白-1（ MCP-1）的表达；取右肺一叶标本，行病理学检查。结果 MSCs组中肺组织羟脯氨酸含量、血清及支气管肺泡灌洗液中TGF-β、MCP-1的表达水平，分别与肺损伤组比较差异有统计学意义（P＜0．05），而单一HFOV组与肺损伤组比较差异均无统计学意义（P＞0．05）；联合HFOV＋MSCs组中肺组织羟脯氨酸含量、血清及支气管肺泡灌洗液中 TGF -β、MCP -1的表达水平低，分别与单一HFOV组和MSCs组比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。肺组织病理学提示，MSCs组的纤维化程度减轻，HFOV＋MSCs组程度轻。结论 HFOV联合MSCs可减少急性肺损伤兔肺组织羟脯氨酸含量，降低TGF-β、MCP-1的表达，减轻急性肺损伤后纤维化程度，优于单一方法，具有协同作用。
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TNF-α体外诱导rMSC向神经细胞分化的研究
目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用.方法 采用密度梯度离心法分离rMSCs,取培养至3～5代的rMSCs以含TNF吨-α5ng/ml的培养基培养,镜下观察细胞诱导后形态的变化,采用免疫荧光细胞化学染色法检测神经前体细胞标志物巢蛋白nestin和神经元特异性烯醇化酶在细胞中的表达强度和分布.结果 rMSCs经TNF-α诱导6h后基本表现为典型神经样细胞形态,nestin和NSE呈阳性表达.结论 TNF-α具有体外诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的作用.
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二苯乙烯苷对去卵巢大鼠衰老MSCs成骨、成脂分化的影响
目的:观察何首乌主要成分二苯乙烯苷(THSG)对去卵巢大鼠衰老骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨、成脂分化的影响.方法:使用雌性大鼠双侧卵巢切除增龄3月法复制衰老大鼠模型,用THSG给予部分模型大鼠灌胃.分离、培养正常组、模型组、THSG组大鼠MSCs.观察各组大鼠MSCs骨向分化、脂向分化诱导的不同表现.结果:骨向诱导18、21天时,模型组、THSG组MSCs碱性磷酸酶(ALP)表达量低于正常组(P＜ 0.01,P＜0.05).14天开始,模型组、THSG组大鼠MSCs的ALP染色阳性率低于正常组(P＜ 0.01,P＜0.05).脂向诱导18天时,模型组细胞上清液中甘油三酯(TG)表达量高于正常组、THSG组(P＜0.05).21天时,模型组脂肪细胞阳性率高于正常组、THSG组(P＜0.05).结论:去卵巢大鼠衰老MSCs骨向分化能力降低,脂向分化能力增强.THSG可抑制衰老MSCs的脂向分化.
关键词： 二苯乙烯苷(THSG) 大鼠 骨髓间充质干细胞(MSCS) 成脂分化 -
骨髓间充质干细胞体内诱导分化为心肌细胞的初步实验观察
目的:初步观察MSCs体内诱导分化为心肌细胞的能力.方法:从大鼠双侧股骨骨髓获得MSCs,在体外纯化、扩增后,DAPI进行细胞标记,然后注射到急性心肌梗塞模型鼠和正常大鼠的心肌组织内,饲养2～4周后,处死动物在注射点获取心肌标本,初步采用HE染色和电镜观察形态学的方法对分化的心肌细胞进行鉴定,并用免疫组化法从组织学上对转化心肌细胞进行心肌特异性抗原的检测.结果:MSC进行DAPI的标记效率高,电镜观察与宿主心肌细胞间形成了闰盘,组化检测有心肌特异性抗原的出现.结论:在宿主心肌组织内,MSCs具有分化为心肌细胞的能力.
关键词： 骨髓间充质干细胞(MSCS) 心肌细胞 诱导分化
