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Fas配体表达与胃癌病理生物学行为的关系
Fas配体(FasL)是肿瘤坏死家族成员之一[1].Fas/FasL系统的生物学功能主要包括:获得免疫耐受、促使免疫应答的终止、在某些器官维持免疫优势和对同体移植器官有免疫保护作用.目前,胃癌仍是中国乃至全世界的多发肿瘤之一[2],但构成胃癌生物学行为的分子机制仍不清楚.本文拟研究FasL表达与胃癌生物学行为的关系,以探讨其在胃癌演进中的作用,为临床诊断和治疗提供理论依据.
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去除痘苗病毒显性表位B8R对外源抗原免疫原性的增强
目的 去除B8R对外源抗原免疫原性的影响,为降低载体的免疫优势从而提高疫苗的有效性提供参考.方法 利用针对痘苗病毒的pSC11质粒,构建插入OVA的质粒pSC11-OVA,在CV-1细胞中与去除B8R的痘苗病毒重组,筛选纯化获得重组病毒.利用体外培养细胞,检测B8R缺失和外源抗原插入对病毒感染复制特性的影响;利用感染小鼠模型,检测重组病毒诱发的针对OVA的细胞免疫应答和免疫记忆效应;采用体征及神经行为学评分系统,检测重组病毒的毒力.结果 B8R缺失和OVA导入对痘苗病毒的生物学特性无明显影响;去除B8R后,外源性OVA成为显性表位,针对OVA的细胞免疫应答和免疫记忆效应明显增强;去除B8R还可显著降低痘苗病毒的毒力.结论 去除B8R可有效降低痘苗病毒的免疫优势效应,增加外源性抗原的免疫原性.去除痘苗病毒本身的显性表位,可为疫苗和基因治疗提供更为有效的载体.
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痘苗病毒A47L缺失对细胞免疫反应的影响
目的 以去除A47L表位的痘苗病毒为载体,导入外源基因OVA,研究去除A47L后对细胞免疫和免疫记忆效应的影响,以期通过去除痘苗病毒载体中对外源抗原的免疫性具有显著抑制作用的表位,提高疫苗的有效性.方法 将扩增的OVA基因导入pSC11穿梭质粒,在CV-1细胞中与去除A47L的痘苗病毒重组,通过多轮筛选纯化获得重组病毒.利用重组病毒免疫小鼠,测定针对外源抗原的细胞免疫反应和免疫记忆效应.结果 外源性OVA基因导入痘苗病毒后,对痘苗病毒的生物学特性无明显影响,且具有良好的表达;去除A47L的重组病毒能够引起有效的针对OVA的细胞免疫反应和免疫记忆效应.结论 去除A47L的痘苗病毒可更好地表达外源性基因.通过去除病毒本身的抑制性表位,可望为多价抗原复制性疫苗提供更为有效的痘苗病毒载体.
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042 DNA免疫诱导的免疫优势HCV特异性CTL表位特异性CTL的定量
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hsp70/CD80嵌合DNA疫苗对结核杆菌感染的免疫预防效果
卡介苗(BCG)虽然是全球使用广泛的预防结核的疫苗,可预防和减轻儿童的重症结核,但对成人肺结核的保护效果不稳定.DNA疫苗为结核的防治提供了新的思路.人们试图用嵌合DNA疫苗和DNA疫苗的联合免疫来提高对结核病的免疫保护效果.分支杆菌热休克蛋白70(hsp70)包含多个T细胞和B细胞表位,免疫原性非常强,具有免疫优势抗原的特点,能诱导出特异性Th1型细胞反应,对结核杆菌的攻击可产生较强的保护性免疫效应,但单独的hsp70 DNA疫苗的免疫保护效果不能超过BCGCD80是近年来发现的一种具有免疫活化功能的第二信号分子,与其共刺激受体CD28/CTLA-4间相互作用可提供T细胞活化所必需的协同刺激信号,本研究将结核杆菌hsp70和人CD80的编码基因进行连接重组,制备成结核病hsp70/CD80嵌合DNA疫苗,可望提高hsp70 DNA疫苗的免疫效力,获得免疫原性更强、安全可靠的新型结核病疫苗.
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疫苗接种与感染后的抗体应答在病毒中和及表位识别方面表现出明显的差异
猪圆环病毒相关疾病( PCVAD)包括一组综合征,与感染猪圆环病毒2型(PCV2)相关。基于疫苗接种和感染时的免疫应答在数量和性质上有所不同的假设,本研究的目的是在猪接种PCV2衣壳蛋白( CP )后和感染期间分别对其免疫力、病毒复制和疾病保护进行评估。此疾病模型包括了PCV2和猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的双重感染,后者是一个已知其加强疾病进展和严重程度的病毒。PRRSV感染的主要影响是使PCV2病毒血症的峰值增加近40倍,但PCV2未表现出对PRRSV的相互影响。在接种疫苗的猪中,没有任何证据显示在双重病毒攻击后出现疾病或PCV2的复制。疫苗接种后的免疫促成了中和PCV2的活性;而PCV2感染或其疾病则导致非中和抗体的高水平产生,主要是针对CP的C-末端区域的多肽。这些结果支持这一主张,即不能用总抗体应答的量来衡量免疫保护。因此,抵抗疾病的保护作用取决于特定表位的免疫优势。在设计P CV2疫苗时,应考虑抗原表位的特异性。