低氧预适应减轻缺氧所致大鼠海马神经元线粒体膜改变

目的 通过观察低氧预适应处理对缺氧引起的神经元bcl-2表达、线粒体膜电位变化的影响,探讨低氧预适应处理对神经元缺氧性损伤保护作用的机制.方法 原代培养大鼠海马神经元细胞,分组处理后,采用免疫组织化学法对细胞bcl-2表达进行检测;采用罗丹明123染色测定线粒体膜电位,激光共聚焦扫描显微镜观察缺氧条件下各组细胞的线粒体膜电位变化.结果 低氧预处理组海马神经细胞在急性缺氧1h复氧后,bcl-2表达阳性率为(74.5±9.8)％,较缺氧对照组(69.5±10.3)％明显提高,差异有统计学意义(P＜0.05);线粒体膜电位测定发现,与缺氧对照组比较,低氧预处理组从缺氧第80 s开始,各时间点线粒体膜电位均高于缺氧对照组(均P＜0.05).结论 低氧预适应处理对原代培养大鼠海马神经元缺氧性损伤保护作用可能是通过增加缺氧后bcl-2表达,从而稳定线粒体膜,减慢神经元急性缺氧时线粒体膜电位降低的速度来实现的.

低氧预处理间充质干细胞治疗缺血缺氧性脑损伤的研究进展

间充质干细胞(MSCs)是一类具有多向分化潜能的成体干细胞,它能促进损伤区域脑组织的功能恢复.MSCs在生理条件下生长的氧浓度低于传统实验条件下21％氧浓度,低氧预处理MSCs能增强它对低氧的耐受能力,增加它的增殖活性,减少它的凋亡,促进损伤区域的血管形成.移植低氧预处理后的间充质干细胞治疗缺血缺氧性脑损伤,能减轻损伤区域的炎症反应,减少神经细胞的凋亡,促进神经功能的恢复,达到治疗缺血缺氧性脑损伤的目的.

急性低氧条件下复氧后大鼠脑HIF-1α蛋白的表达与人参皂甙Rd干预研究

目的 观察大鼠脑缺氧状态下缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白的表达及低氧状态下人参皂甙Rd干预对其影响.方法 将成年Wistar大鼠90只随机分为急性低氧对照组、低氧预处理干预组、人参皂甙Rd预处理干预组,每组按缺氧后不同时间点(复氧后0 h、4 h、9 h)再分为3亚组,每组10只大鼠.采用免疫组化法检测HIF-1α蛋白的表达.结果 在缺氧后复氧即刻,HIF-1α蛋白少量表达,主要存在于海马细胞;随着时间的推移,在复氧后4 h,HIF-1α表达逐渐达高峰,至9 h时HIF-1α表达又明显减少.低氧预处理干预组及人参皂甙Rd干预组的实验结果 发现HIF-1α表达较急性低氧对照组减少,与急性低氧对照组各时间点相比,差异均有显著性(P<0.05).两个干预组之间比较无统计学差异.结论 急性低氧可以促使HIF-1α在大鼠海马神经细胞的表达,具有时间依赖性,低氧预处理干预及人参皂甙Rd干预均可促使大鼠脑组织HIF-1α表达减少.

大鼠心肌细胞低氧预处理与低氧后处理血红素氧化酶-1水平的比较

目的 比较低氧预处理和低氧后处理对大鼠心肌细胞血红素氧化酶-1水平的影响.方法 将培养的心肌细胞分为四组:对照组、低氧预处理组、低氧后处理组和联合组.分别测定各时间段细胞上清液中LDH水平和HO-1水平.结果 低氧预处理组和低氧后处理组LDH的水平明显低于对照组(均P＜0.01),HO 1水平明显高于对照组(均P ＜0.05).联合组LDH的水平及HO-1水平与低氧预处理组、低氧后处理组差异没有显著性(均P ＞0.05).结论 该研究结果提示低氧预处理和低氧后处理对心肌细胞的保护作用部分是通过HO-1水平增加来实现的,同时也说明二者很可能是通过同一传导通路来实现心肌细胞的保护作用.

低氧预处理重塑大脑皮层兴奋/抑制平衡

目的 观察急性低氧和重复低氧预处理对小鼠大脑皮层组织兴奋性与抑制性氨基酸含量的影响,初步探讨低氧预处理保护神经组织的机制.方法 制备急性低氧与重复低氧预处理小鼠模型,低氧处理结束后急性分离小鼠大脑皮层组织,制备脑匀浆提取液.应用高效液相荧光检测法,分别检测大脑皮层组织兴奋性/抑制性氨基酸神经递质含量.结果 急性低氧可显著增加大脑皮层组织谷氨酸的含量,并降低抑制性氨基酸甘氨酸的含量,谷氨酸与甘氨酸含量之比由对照组的2.5上升到7.2,兴奋与抑制氨基酸递质失衡.重复低氧预处理显著增加大脑皮层组织谷氨酸的含量的同时,甘氨酸含量也显著增加,谷氨酸与甘氨酸含量之比为1.7,向对照组靠拢.结论 重复低氧预处理可通过重塑低氧组织的兴奋与抑制平衡,使低氧组织处于相对的稳态,利于神经细胞的生存.

低氧对模拟晕船处理大鼠某些适应性的影响

目的 探讨低氧预处理对大鼠受模拟晕船刺激适应过程的影响.方法 36只大鼠随机分为晕船对照组(Ⅰ)、晕船组(Ⅱ)、低氧预处理后晕船组(Ⅲ)3组.Ⅲ组大鼠先接受模拟5 km低氧环境4 h/d,连续5 d.低氧结束次日起Ⅱ、Ⅲ两组接受模拟晕船刺激2 h/d,连续15 d.测定大鼠每日高岭土摄入量、体增重和进食量.结果 Ⅲ组大鼠晕船适应期间高岭土摄入量高于Ⅱ组(P＜0.05),且Ⅱ、Ⅲ组均高于Ⅰ组(P＜0.05);Ⅱ、Ⅲ组大鼠晕船适应期间体增重均低于Ⅰ组(P＜0.05),Ⅱ、Ⅲ组间无差异(P＞0.05);各组大鼠晕船适应期间进食量无差异(P＞0.05);Ⅱ、Ⅲ组高岭土摄入量均在晕船第12天起与Ⅰ组无差异(P＞0.05).结论 低氧预处理可能加重大鼠晕船症状,但不明显影响其体增重、进食量及其晕船适应的时程.

自噬参与低氧预处理抗 PC12细胞糖氧剥夺损伤过程

目的：观察低氧预处理（ HPC）对氧糖剥夺（ OGD）损伤的PC12细胞的作用，同时探讨自噬在其中的作用。方法：培养的PC12细胞按照处理因素分为6组：对照组、HPC模型组、3－甲基腺嘌呤（3－MA）组、低氧预处理后氧糖剥夺（HPC＋OGD）组、3－甲基腺嘌呤预处理后行低氧预处理及氧糖剥夺（3－MA＋HPC＋OGD）组和OGD组。 CCK－8检测细胞存活率；caspase－3活性检测试剂盒检测酶活性；TUNEL染色和流式细胞术检测细胞凋亡的情况；Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、beclin－1和凋亡相关蛋白caspase－3的表达。结果：与对照组相比，OGD组细胞存活率明显降低；与3－MA＋HPC＋OGD组及OGD组相比，HPC＋OGD组细胞存活率明显升高（ P＜0．05）。与对照组相比，OGD组细胞的caspase－3酶活性明显升高；与3－MA＋HPC＋OGD组及OGD组相比，HPC＋OGD组的caspase－3酶活性明显降低（ P＜0．05）。与对照组相比OGD组细胞凋亡明显增多；HPC＋OGD组与OGD组相比凋亡明显减少（P＜0．05）。此外，与对照组相比，OGD组的激活型caspase－3蛋白水平明显升高（P＜0．05）；且HPC＋OGD组与OGD组相比激活型caspase－3蛋白水平明显减少而LC3、beclin－1的蛋白水平明显升高（ P＜0．05）。结论：HPC抗OGD损伤的机制可能与其激活细胞自噬有关。

低氧预处理诱导后类许旺细胞修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的 探讨经过低氧预处理诱导后类许旺细胞修复大鼠坐骨神经缺损的能力. 方法 2013年3月至2014年6月,取大鼠骨髓间充质干细胞,诱导分化为类许旺细胞,进行低氧预处理.将SD大鼠分为自体神经移植组(A组)、化学去细胞神经移植组(B组)、未经低氧预处理许旺细胞移植组(C组)、低氧预处理类许旺细胞移植组(D组).术后7d比较C、D两组植入神经的许旺细胞存活情况和神经血管化程度,术后12周检测各组神经传导速度、动作电位波幅、小腿三头肌湿重恢复率、新生神经轴突密度.两组间比较采用成组t检验. 结果 术后7d,实验组与未经低氧预处理许旺细胞移植组比较,细胞存活更多,血管化程度VEGF更高,术后12周,神经传导速度实验组(39.52±1.82)m/s,高于未经低氧预处理许旺细胞移植组的(27.31±0.82)m/s,动作电位波幅实验组(12.82±0.63) mv,高于未经低氧预处理许旺细胞移植组的(4.31±0.57)mv,小腿三头肌湿重恢复率实验组(38.33±1.31)％,高于未经低氧预处理许旺细胞移植组的(29.38±0.89)％,新生神经轴突密度实验组为(13866±506)根/mm2,高于未经低氧预处理许旺细胞移植组的(12704±497)根/mm2,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 低氧预处理提高了诱导后类许旺细胞在体内的存活率,促进神经的血管化,是一种有效的种子细胞预处理方法.

脂肪干细胞分泌功能的研究进展及应用前景

脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作为新近发现的间充质干细胞在临床和组织工程学中广为研究,人们发现其性质与其他间充质干细胞(MSCs)的多向分化潜能、表面标记等方面没有明显的差别,另外,ADSCs也能够分泌一定量的细胞因子,以便建立更好的损伤修复微环境[1].为了获得ADSCs分泌的生长因子或将其作为基因修饰细胞使生长因子过表达来提高组织修复能力,研究者尝试用基因修饰ADSCs或低氧预处理ADSCs等多种方法.

间歇性低氧预处理对大鼠心肌促血管生成作用的实验研究

目的:采用常压间歇性低氧(intermittent hypoxia,IH)大鼠的动物模型,观察间歇性常压低氧预处理的促血管生成作用.方法:成年雄性Wistar大鼠25只,体重210～215 g,随机分为2大组:对照组(C组,n=5)和间歇性低氧预处理组(IH组,n=20).IH组动物进行间歇性低氧预处理(4 h/d,间歇缺氧1 d者为IH1组,7 d者为IH2组,14 d者为IH3组,28 d者为IH4组),按计划完成实验后测定心肌血管内皮生长因子(VEGF) 蛋白表达及毛细血管密度.结果:间歇性低氧预处理大鼠心肌VEGF蛋白表达增加,心肌毛细血管密度增高.结论:间歇性低氧预处理能促进大鼠心肌内的血管生成,其机制可能与心肌VEGF表达增高有关.

大鼠整体低氧预处理减轻肺缺血再灌注损伤

目的:探讨低氧预处理(HPC)对肺缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用.方法:重复性低氧5次建立大鼠HPC模型,双活结套扎左侧肺门45 min后再灌注120min复制肺I/R损伤模型;设立对照组、I/R组和HPC+I/R组,每组10只大鼠,检测各组肺组织湿重与干重比,肺组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及髓过氧化物酶(MPO)活性.结果:I/R组大鼠肺组织湿重与干重比较对照组明显增加(P<0.05),肺组织SOD活性显著降低(P<0.01),MDA含量和MPO活性明显增高(P<0.05);HPC+I/R组大鼠上述指标较I/R组均明显改善,差异有显著性.结论:大鼠整体HPC可能通过减轻氧化应激反应,保护肺的缺血再灌注损伤.

低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和bcl-2表达的影响

采用免疫组织化学方法观察了低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和bcl-2表达的影响.结果显示,经低氧预处理的海马神经元缺氧-复氧后bcl-2表达较对照组明显增强,神经元损伤程度减轻,神经元存活数明显高于对照组.本结果表明,低氧预处理可使海马培养神经元对缺氧产生耐受,增加缺氧-复氧后神经元bcl-2的表达.提高神经元存活数.

低氧预适应可减少缺氧--复氧后大鼠海马培养神经元凋亡

用原位末端标记(TUNEL)法观察低氧预适应对大鼠海马培养神经元缺氧缺氧-复氧后神经元凋亡的影响.结果显示,经低氧预适应的海马神经元缺氧-复氧后凋亡神经元百分率明显低于对照组.本结果表明.低氧预适应可使体外培养的海马神经元对缺氧产生耐受,减少缺氧-复氧后的海马神经元凋亡.

低氧预处理重塑海马兴奋/抑制平衡促进神经细胞生存

目的 观察急性低氧和重复低氧预处理对小鼠海马组织兴奋性与抑制性氨基酸含量的影响,同时观察海马组织尼氏染色,初步探讨低氧预处理保护神经组织的机制.方法 小鼠随机分为对照组、急性低氧组及低氧预处理组,3组动物分别进行海马组织氨基酸神经递质检测和尼氏染色.结果 急性低氧可显著增加海马组织天门冬氨酸的含量,并降低抑制性氨基酸甘氨酸的含量,兴奋与抑制氨基酸递质失衡.重复低氧预处理并不增加海马组织天门冬氨酸的含量,但甘氨酸含量显著增加,天门冬氨酸与甘氨酸含量之比逆转.尼氏染色显示急性低氧组与重复低氧预处理组海马组织变性细胞数目无显著差异,均显著高于对照组.但急性低氧组神经细胞内尼氏体数量明显减少.结论 重复低氧预处理可通过重塑低氧组织的兴奋与抑制平衡,使低氧组织处于相对的稳态,改善神经细胞的生存环境.

低氧预处理与右美托咪定联合低氧预处理对大鼠海马中BDNF mRNA及血清S100B表达的影响

目的:本研究通过减压舱制作低氧模型,观察单纯低氧预处理以及右美托咪定联合低氧预处理对大鼠海马BDNF mRNA和血清S100B表达的影响.方法:雄性Wistar大鼠随机分为3组:低氧组、低氧预处理组、低氧预处理+右美托咪定组,每组12只.采用低压氧舱造模,低氧组:大鼠暴露于模拟海拔7000m低压氧舱(压力维持在39.8kPa)3h;低氧预处理组:大鼠反复暴露于模拟海拔4000m低压氧舱(每次压力为60.7kPa)3次,每次2小时,每次低氧间隔24小时,在后1次低氧后24小时,给予模拟海拔7000m低压氧舱3h.低氧预处理组+右美托咪定组:低氧预处理程序与上所述相同,但在各次低氧入舱前30min分别腹腔注射右美托咪定25μg/kg.造模成功后于出舱后的3h、24h两个时间点,提取海马组织与血清,采用RT-PCR方法检测海马BDNF mRNA表达的水平,采用ELISA法检测大鼠血清S100B蛋白的浓度,采用统计软件进行数据分析.结果:在3h,三组的BDNF mRNA及血清S100B的表达水平均无显著性差异.在24h,低氧预处理组与低氧预处理+右美托咪定组的BDNF mRNA的表达水平均显著高于低氧组(P＜0.05).低氧组血清S100B水平明显增加,低氧预处理与低氧预处理+右美托咪定组血清S100B水平均显著降低,并且低氧预处理+右美托咪定组组血清S100B的水平低于低氧预处理组(P＜0.05).结论:低氧预处理逆转了由严重低氧引起的BDNF的下调,抑制了血清S100B的升高,说明维持BDNF在神经元的表达及修复血脑屏障,可能是低氧预处理发挥保护效应的机制.

低氧预处理提高下丘脑细胞缺氧耐受性与Na+、K+电流的关系

低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和Jun基因表达的影响

低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和Jun基因表达的影响

低氧预处理后小鼠枯烯过氧化氢能力的改变

低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和IL-1β表达的影响