首页 > 文献资料
-
小鼠支气管肺泡干细胞miRNAs表达谱的鉴定
[目的]检测并验证正常成年小鼠肺内支气管肺泡干细胞(BASCs)的miRNAs表达情况.[方法]流式细胞仪分选小鼠BASCs和其对照细胞(CD45-CD31-Sca-1-CD34-细胞);将分选出的细胞常规提取RNA后,经YM-100(Millipore)微离心过滤柱抽提小于300核苷酸长度的小RNA;微阵列法检测BASCs和其对照细胞的miRNAs表达谱,筛选出差异miRNAs;构建miRNAs特异性TaqMan MGB探针,qRT-PCR法验证所选差异miRNAs在两种细胞的表达.[结果]微阵列法检测显示BASCs和对照细胞有116个miRNAs的表达有显著性差异(P<0.01),其中有56个miRNAs在BASCs高表达,60个miRNAs在BASCs低表达.在这些差异miRNAs中选取了10个与细胞周期、干细胞分化、肿瘤发生相关的miRNAs,通过qRT-PCR法检测其在BASCs和对照细胞中的表达,qRT-PCR的检测结果与miRNAs芯片检测结果一致.[结论]研究通过微阵列法鉴定了小鼠BASCs的miRNAs表达谱,与对照细胞相比,发现116个miRNAs的表达具有显著性差异(56个高表达,60个低表达).
关键词： 干细胞 微小RNA 微阵列 实时定量聚合酶链反应 肺肿瘤 -
miR-370在原发性中枢神经系统淋巴瘤的表达和预后意义
目的 评估miR-370在原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)的表达和预后意义.方法 通过即时聚合酶链锁反应(qRT—PCR)测定62例PCNSL的miR-370的表达水平,并以12例患者的颈部淋巴结组织进行miR-370测定作为对照.并对62例PCNSL患者的临床特征、手术以及治疗方案、生存时间等进行收集和随访.结果 miR-370在PCNSL组织中相对表达比较水平明显低于淋巴结组织,差异有统计学意义(t=5.11,P＜0.05).单一脑叶患者的miR-370表达明显多于多个脑叶患者,差异有统计学意义(t=7.13,P＜0.05).不同性别、年龄、不同的手术方式、治疗方案组间miR-370表达差异无统计学意义(t分别=2.77、1.81、3.05、2.43,P均＞0.05).年龄、肿瘤位置、手术方案、miR-370的表达水平是影响PCNSL预后的影响因素(HR分别=0.11、1.95、0.37、0.01,P均＜0.05).结论 miR-370在PCNSL细胞中异常低表达,是一个重要的预后预测因子.此外,年龄、肿瘤位置和手术方案也是影响PCNSL患者预后的重要因素.
关键词： MiR-370 实时定量聚合酶链反应 原发性中枢神经系统淋巴瘤 预测因子 预后 -
实时定量聚合酶链反应动态监测白血病治疗后微小残留病研究
目的 建立急性早幼粒细胞白血病(APL)实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测方法,并检测APL治疗后微小残留病(MRD),评价MRD检测的意义.方法 应用RQ-PCR对96例APL患者的骨髓标本进行分析,检测PML/RARa融合基因的转录水平.结果 (1)RQ-PCR与传统巢式PCR(RT-PCR)检测结果的差异有统计学意义(P＜0.05),提示应用RQ-PCR检测PML/RARa融合基因转录水平的敏感性高于RT-PCR.(2)RQ-PCR可对PML/RARa融合基因进行定量检测,监测患者的PML-RARa融合基因拷贝数水平变化,结果显示初诊时较高,有效治疗后迅速下降,复发时又出现上升,提示若患者在完全缓解(CR)后PML/RARa融合基因拷贝数呈现上升趋势,其复发机率大.结论 RQ-PCR检测作为APL治疗后微小残留病检测的方法,准确可靠,可以判断治疗效果,预测疾病复发,早期给予干预治疗,有重要的临床应用价值.
关键词： 急性早幼粒细胞白血病 微小残留病 实时定量聚合酶链反应 -
胃癌组织中miR-30d的表达及其临床意义
目的 分析胃癌组织和癌旁组织miR-30d表达差异及其临床意义.方法 收集手术切除的胃癌标本52例,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测癌组织及癌旁组织标本miR-30d的表达水平,分析其表达水平与临床病理特征的关系.结果 miR-30d在胃癌组织中表达值(1.70±3.19)显著低于其癌旁组织中的表达值(5.10±10.32),差异有统计学意义(P＜0.05).miR-30d的表达水平与淋巴结转移呈负相关(P＜0.05);面与患者性别和年龄、肿瘤大小、侵犯层次、TNM分期及脉管侵犯无明显相关.结论 miR-30d与胃癌发生发展密切相关,可能成为胃癌的潜在诊断及治疗靶点.
关键词： 胃癌 实时定量聚合酶链反应 微小RNA -
前列腺素E1对急性缺血损伤大鼠肾组织血栓调节蛋白表达的影响
探讨前列腺素E1(prostaglandin E1,PGE1)对肾缺血再灌注损伤(ischemiareperfusion injury,IRI)大鼠血中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils,PMNs)细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)水平和肾组织血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)表达的影响.健康Wistar大鼠80只随机分为空白对照组、假手术组、模型组、PGE1治疗组,每组按不同术后观察时间(1、3、6、24h)均分.观察造模后其血清肌酐(creatinine,Cr)水平变化,采用流式细胞术和实时定量聚合酶链反应方法(Rt- PCR)同步监测ICAM -1表达水平和肾组织TM mRNA表达的动态变化.(1)模型组IRI损伤1h,Cr水平虽然没有明显变化,但血清ICAM-1水平及肾小管坏死评分值已较假手术组明显增加(P均＜0.05),并与肾组织TM mRNA表达升高的变化峰值时点相一致.(2)URI损伤6h,模型组和治疗组Cr、ICAM-1水平均明显增高(P＜0.05),但治疗组Cr、ICAM -1水平及肾小管坏死积分值均明显低于模型组(P＜0.05).(3)肾组织中TM mRNA表达与肾小管损伤积分值呈现良好的相关性(r=0.69,P＜0.01)；且与ICAM-1水平的增加呈现良好的相关性(r=0.62,P＜0.05).(1)ICAM-1、TM mRNA表达增多,反映了IRI内皮细胞的损伤程度；(2)PGE1通过减少ICAM-1及TM mRNA水平的表达,阻抑凝血及炎症反应过程,保护内皮细胞,减轻肾组织损伤.
-
慢性粒细胞白血病BMI1基因表达及意义
目的：检测慢性粒细胞白血病(CML)病人BMI1 mRNA的表达情况，以探讨其在CML病情进展及预后中的意义。方法：应用定量实时荧光PCR（real-time PCR）技术检测4l例CML病人和10例健康者上述基因的表达。结果：BMI1 mRNA在CML病人的阳性表达率为68.3％，明显高于正常对照组10.0％(P<0.01)，在CML的加速期、急变期的表达水平明显高于慢性期(t =3.421、4.231，P<0.01)。结论：BMI1基因与CML的病情进展密切相关，是监测CML病情进展及判断预后的有价值的分子标记物。
关键词： 白血病 Bmi1 实时定量聚合酶链反应 -
人类疱疹病毒5型6型与扁平苔藓相关性研究
目的: 探讨人类疱疹病毒5型(HHV-5)和6型(HHV-6)与扁平苔藓发病的相关性.方法: 应用实时定量PCR法检测20例扁平苔藓皮损组织及17名正常人皮肤组织中HHV-5和HHV-6水平.结果: 扁平苔藓及正常人皮肤组织标本中均未检测到HHV-5病毒DNA.16例(80%)扁平苔藓患者的皮损组织和9名(52.94%)健康人正常皮肤组织中检测到HHV-6 DNA,差异无统计学意义(P>0.05).扁平苔藓皮损与健康皮肤组织检测出的HHV-6 DNA平均拷贝数分别为3.79/μL和4.58/μL,差异无统计学意义(P>0.05).结论: 皮肤扁平苔藓可能与人类疱疹病毒5型(HHV-5)、6型(HHV-6)的局部感染没有相关性.
关键词： 扁平苔藓 人类疱疹病毒5型 人类疱疹病毒6型 实时定量聚合酶链反应 -
大鼠正畸牙移动模型改良矫治器对牙周的影响
目的 探讨建立客观实验模型方法,降低正畸牙移动模型中矫治器对牙周的影响.方法 选用40只8周龄雌性SPF级SD大鼠,随机分为实验组和对照组,研究对象均为上颌左侧第一磨牙.实验组大鼠第一磨牙采用硅橡胶取模后制作个体化矫治装置,对照组以结扎丝固定第一磨牙颈部牵引,两组均以上颌切牙为支抗,0.5N的力近中移动第一磨牙.牵引4周后,采用real-time PCR方法检测两组牙龈卟啉单胞菌(porphyromonas gingivalis,Pg)变化并测量第一磨牙近中移动距离.结果 两组第一磨牙移动距离差别不大,但实验组牙龈卟啉单胞菌检出率显著低于对照组(P＜0.05),有显著差异.结论 个体化矫治器相比传统方法更有利于牙周健康,有利于今后大鼠牙齿移动相关实验研究.
关键词： 动物模型 矫治装置 牙移动 菌斑 实时定量聚合酶链反应 -
SYBR Green实时定量PCR检测人脑原发胶质瘤中LATS1和LATS2基因的表达
目的:运用实时定量PCR检测肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在人脑原发胶质瘤组织中的表达情况,并进一步分析其表达变化与临床资料之间的关系.方法:建立SYBR Green实时定量PCR的检测方法;通过标准曲线法对肿瘤抑制基因LATS1和LATS2的mRNA在30例原发胶质瘤(WHO分级:Ⅱ级10例,Ⅲ级10例,Ⅳ级10例)和10例正常脑组织中的表达进行定量检测;统计学分析不同级别胶质瘤及正常脑组织间的表达差异,并进一步结合临床资料分析不同性别和不同年龄组的表达差异.结果:与正常脑组织相比,在各病理级别胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达均下调(P＜0.05),但胶质瘤不同级别组之间的差异均无统计学意义(P＞0.05).LATS1和LATS2在不同性别组和年龄组胶质瘤中的表达差异也无统计学意义(P＞0.05).结论:①成功地建立了SYBR Green实时定量PCR检测LATS1和LATS2基因表达的方法;②胶质瘤中LATS1和LATS2的mRNA表达水平均低于正常脑组织,但不同病理分级间的表达无明显差异.
关键词： LATS1 LATS2 神经胶质瘤 实时定量聚合酶链反应 SYBR Green -
冠心病伴牙周炎患者牙周状况及龈下菌斑的研究
目的 探讨牙周炎伴有冠心病患者龈下菌斑中牙周致病菌的分布,分析慢性牙用炎对冠状动脉硬化性心脏病的影响.方法 随机抽取无冠心病史慢性牙周炎患者43例,设为时照组,其中男25例、女18例;冠心病合并慢性牙周炎患者40例,设为实验组,其中男23例、女17例.记录牙周指数:探诊深度(PD)、探诊出血(BOP)、附着丧失(AL),研究两组之间牙周指数的关系;采集龈下菌斑,采用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法,检测5种常见牙周致病细菌:伴放线放线杆菌(Aα)、牙龈卟啉单胞菌(Pg)、中间普氏菌(Pi)、福赛拟杆菌(Bf)和齿垢密螺旋体(Td),分析两组细菌统计学差异.结果 两组之间牙周指数BOP、PD、AL经统计学分析,P<0.05,差异有统计学意义;两组实时定量数据经统计学处理,Pg的P均<0.05,差异有统计学意义;Aa、Pi、Bf及Td的P均>0.05,差异无统计学意义.结论 伴有冠心痛的牙周炎患者,其牙周指数均较无冠心病史牙周炎患者严重;龈下菌斑中Pg含量高的牙周炎患者冠心痛的发病率高.
关键词： 牙周病 冠心痛 牙周指数 龈下菌斑 实时定量聚合酶链反应 -
SIRT1在胃癌组织、细胞中的表达及意义
目的 观察SIRT1在胃癌组织及胃癌细胞中的表达情况,探讨SIRT1同胃癌临床病理特征之间的关系.方法 应用Real-time PCR方法检测SIRT1 mRNA在21例新鲜胃癌及癌旁组织中的表达情况;应用Western blot和Real-time PCR方法在蛋白和mRNA水平检测SIRT1在胃癌、胃黏膜上皮细胞中的表达;应用免疫组织化学染色法检测130例胃癌组织及癌旁正常组织中SIRT1蛋白的表达,分析SIRT1蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系.结果 SIRT1 mRNA在新鲜胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高(P＜0.05),SIRT1 mRNA及蛋白在胃癌细胞中均比正常胃黏膜上皮细胞中表达增高(P均＜0.05).免疫组化染色结果表明,SIRT1蛋白在胃癌组织中较正常癌旁组织表达增高(P＜0.05).SIRT1蛋白表达水平同胃癌患者的年龄及肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、大小有关(P均＜0.05),同生存时间呈负相关(r=-0.502 3,P＜0.05).结论 SIRT1在胃癌组织和胃癌细胞中呈高表达,其在胃癌发生中充当癌基因的角色.
关键词： 胃肿瘤 SIRT1 免疫组织化学 免疫印迹 实时定量聚合酶链反应 -
2011年-2013年邢台市流感病原学监测分析
目的 分析2011年-2013年邢台市流感病毒流行情况,了解病毒毒株的型别及变化特点,为科学预防和控制流感提供依据.方法 采集流感样病例(ILI)的咽拭子标本,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测病毒核酸.结果 2011年1月-2013年12月共采集2 144份ILI咽拭子标本,核酸阳性211份,阳性率为9.84％,包括127份A型流感病毒(5.92％)和84份B型流感病毒(3.91％).其中A型流感病毒进一步分类鉴定为新A型H1N1 58份(2.70％),A型H3 68份(3.17％),A型未分型1份(0.05％).不同年龄组病毒阳性率差异有统计学意义(x2=13.703,P＜0.01),以5岁～年龄组阳性率(14.00％)高.结论 2011年流感病毒优势株为A型H3,2012年为B型,2013年为新A型H1N1,各型别阶段性交替形成优势株.每年1月-2月为邢台市流感发生高峰期.为更好的防控流感,及时掌握流行趋势,仍需加强监测.
关键词： 流行性感冒 病原学 实时定量聚合酶链反应 -
酸敏感离子通道3在胃食管反流大鼠中的表达和意义
目的 检测酸敏感离子通道3(ASIC3)在胃食管反流大鼠食管黏膜及背根神经节(DRG)中的表达变化,探讨其在胃食管反流病(GERD)发病中的作用.方法 将Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为实验组(G组)和对照组(S组).实验组采用限制幽门及结扎胃底方法建立GERD大鼠模型.于造模后15 d处死两组大鼠,通过HE染色对大鼠食管黏膜进行组织病理学检测,通过蛋白质印迹法(Western blotting)和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测大鼠食管黏膜及DRG中ASIC3蛋白及mRNA表达变化.结果 HE染色显示G组大鼠食管黏膜慢性炎症改变,S组大鼠食管黏膜无异常;Western blotting显示G组大鼠DRG中ASIC3蛋白表达高于S组(6.75 ±0.74 vs 5.07 ±0.72) (P ＜0.05),食管黏膜中ASIC3蛋白表达高于S组(8.04 ±0.67vs 7.31 ±0.740) (P＜0.05);RT-PCR同样显示,G组大鼠DRG中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.00030±0.00003vs 0.00013±0.00002)(P＜0.05),食管黏膜中ASIC3 mRNA表达高于S组(0.01073 ±0.00231 vs 0.00088±0.0007)(P＜0.05).结论 ASIC3在DRG及食管黏膜上表达上调可能是导致GERD食管内脏高敏感的原因之一.
关键词： 胃食管反流病 食管内脏高敏感 酸敏感离子通道3 蛋白质印迹 实时定量聚合酶链反应 -
肾小管间质纤维化大鼠肾脏转化生长因子-β1和纤溶酶原激活物抑制剂-1的定量分析
目的 观察肾小管间质纤维化(TIF)大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)mRNA及其蛋白的定量表达,探讨TGF-β1、PAI-1在TIF中的作用及二者之间的相互影响机制.方法 SD大鼠60只,随机分为假手术(SOR)组和单侧输尿管梗阻手术(UUO)组.输尿管结扎后剪断制备UUO模型.分别于手术后第7、14、21天,每组各处死10只大鼠,留取手术侧.肾脏标本,采用病理、实时定量PCR、Western blotting等方法动态观察二组大鼠第7、14、21天梗阻侧肾脏组织学变化和TGF-β、PAI-1在梗阻侧肾脏中的表达情况.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 1.HE、Masson染色结果:SOR组术后第7、14、21天.肾脏未见纤维化改变.UUO组术后第7天肾小管上皮细胞宅泡变性,肾间质炎性反应细胞浸润,术后第14天肾脏纤维化程度加重,术后第21天呈重度纤维化.2.术后第7天开始UUO组TGF-β1 mRNA和蛋白表达量显著高于SOR组(P<0.05,0.01);术后第14天开始UUO组PAI-1 mRNA和蛋白表达量显著高于SOR组(P<0.05,0.01).3.相关性分析:肾小管间质损害与TGF-β1、PAI-1蛋白表达量均呈显著正相关(r=0.975 P<0.01;r=0.801 P<0.05);肾脏TGF-β1表达量与PAI-1呈显著正相关(r=0.937 P<0.01).结论 TGF-β1、PAI-1足肾间质纤维化形成促进因素之一.TGF-β1诱导PAI-1过度表达,PAI-1是TGF-β1的下游靶基因之一,PAI-1也可影响TGF-β1的表达,二者共同促进肾脏纤维化形成.
-
儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病的检测及其应用进展
儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)是一种起源于淋巴细胞异常增生的恶性肿瘤性疾病,是儿童常见的恶性肿瘤.虽然分层治疗已使儿童ALL的疗效明显提高,但仍有15％～ 20％的患儿终复发,其主要原因是白血病微小残留病变(MRD)的存在.MRD是指白血病患者经诱导化疗完全缓解后(或骨髓移植后),在体内残存有形态学上不能检测到的微量白血病细胞的状态.MRD的检测方法主要有流式细胞术和实时荧光定量聚合酶链反应及免疫组库测序技术.检测MRD水平对判断预后、指导危险度分组及个体化治疗等方面具有重要意义.现总结近年来儿童ALL-MRD的主要检测方法及临床应用所取得的进展.
-
小干扰RNA沉默survivin基因表达对肿瘤细胞A549、Hela S3和K562的影响及小干扰RNA序列的筛选
目的 探讨针对survivin基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人肺癌A549、宫颈癌Hela S3及急性髓系白血病K562细胞株的效应,筛选有效的siRNA序列.方法 设计并合成3条针对survivin基因的siRNA,通过Hiperfect脂质体转染试剂分别转染A549、Hela S3及K562细胞,培养48 ～ 72 h后,用SYBR Green Ⅰ的实时定量PCR (RT-PCR)方法检测肿瘤细胞survivin mRNA的表达,用WST-8细胞计数试剂盒检测肿瘤细胞的增殖.结果 转染了特异性siRNA的肿瘤细胞survivin基因的表达量明显下降,转染后48 h基因表达抑制率为57.47％～88.53％,72 h为69.94％～95.03％;转染后各组肿瘤细胞增殖受到明显抑制,转染后48 h的细胞增殖抑制率为27.88％～47.36％,72 h为42.59％～57.29％;其中序列1的效果为显著,对3种肿瘤细胞survivin基因表达的抑制率48 h均在75％以上、72 h均在90％以上,对细胞增殖的抑制率48 h均在40％以上、72 h均达50％以上.结论 siRNA能有效沉默survivin基因在多种肿瘤细胞中的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,所设计的3条survivin siRNA序列均有活性,以序列1作用强.
关键词： Survivin基因 小干扰RNA 实时定量聚合酶链反应 肿瘤 -
乳脂球上皮生长因子-8在大鼠神经层视网膜小胶质细胞中的表达
背景 神经层视网膜小胶质细胞在视网膜胚胎后期发育过程中起"清道夫"的作用,可清除凋亡细胞.乳脂球上皮生长因子-8(MFG-E8)能特异性地与凋亡细胞表面的磷酯酰丝氨酸相结合,增强巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬作用.目的 观察MFG-E8及相关细胞因子在正常大鼠神经层视网膜胚胎后期发育过程中的表达.方法 取清洁级鼠龄为0、3、7、14、30、45 d的正常皇家外科学院(RCS)大鼠各5只.免疫荧光双标染色标记MFG-E8和小胶质细胞标志物CD11b,荧光实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测正常大鼠各组视网膜中MFG-E8、整合素85、CD11b、白细胞介素-6(IL-6)mRNA的表达变化.结果 MFG-E8免疫阳性细胞分布于视网膜内层,主要为视网膜节细胞层和外丛状层,与CD11b染色部位相同.Real-time PCR检测发现,在出生后即可检测到MFG-E8、整合素β5、CD11b及IL-6 mRNA的表达,其表达量在出生后早期较低,然后逐渐增加.鼠龄14 d组的mRNA表达强烈,然后逐渐下降.鼠龄14 d组的各因子mRNA表达水平明显高于其他鼠龄组,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 MFG-E8特异地表达于正常RCS大鼠神经层的视网膜小胶质细胞,表达量出生后呈先升高后降低,14 d为高峰的规律.
-
鼻咽癌相关基因6在结肠癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨鼻咽癌相关基因6(NGX6)在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌临床病理特征之间的关系.方法 应用实时定量聚合酶链反应和免疫组织化学方法检测26例结肠癌组织及对应癌旁正常组织中NGX6的表达,并分析NGX6表达与结肠癌临床病理特征的关系.结果 NGX6蛋白在结肠癌组织和正常结肠组织中的阳性表达率分别为15.4％(4/26)和100.0％(26/26),结肠癌组织中NGX6蛋白的阳性表达率显著低于正常结肠组织(P＜0.01).NGX6蛋白在结肠癌组织中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤组织类型、Ducks分期、淋巴结转移无相关性(P＞0.05),而与肿瘤分化程度有关(P＜0.01),分化程度越高,NGX6的表达水平越高.NGX6 mRNA在结肠癌组织和正常结肠组织中的表达分别为1.983±0.479和2.741±1.245,NGX6 mRNA在结肠癌组织中的表达显著低于正常结肠组织(P＜0.05).结论 NGX6与结肠癌的发生发展有关,NGX6可以作为评估结肠癌进展程度的一种指标.
关键词： 鼻咽癌相关基因6 结肠癌 免疫组织化学 实时定量聚合酶链反应 -
实时定量RT-PCR检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因的临床意义
目的:建立实时定量RT-PCR方法检测慢性粒细胞白血病(CML)bcr/abl mRNA的方法;探讨CML bcr/abl融合基因的表达水平与疗效的关系.方法:可同时检测b2a2和b3a2两种亚型,GAPDH的mRNA作为内参照.检测14例CML患者的22个外周血和骨髓样本中bcr/abl融合基因表达水平,并对2例异基因造血干细胞移植后复发的患者进行动态监测.结果:bcr/abl及GAPDH标准曲线的相关系数均为0.999;灵敏度为10-6;14例初诊患者的mRNA表达水平范围为2.81～145;2例异基因造血干细胞移植后复发患者的bcr/ablmRNA表达水平随临床治疗而变化.结论:实时定量PCR检测CML患者的bcr/abl融合基因,敏感可靠,重复性好;其融合基因表达水平的改变与临床疾病进展关系相一致,有助于反映白血病细胞负荷、评价疗效及判断疾病预后.
关键词： 白血病 髓细胞性 实时定量聚合酶链反应 融合基因 -
Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1在大鼠肝纤维化不同阶段表达及意义
目的 观察Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(ROCK1)在大鼠肝纤维化过程中不同阶段的表达.方法 72只200~250g雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组36只、肝纤维化模型组36只.正常对照组即正常饲养,模型组即腹腔注射四氯化碳,2次/周,剂量2ml/kg.分别在3、6d、2、4、6、8周时间点随机选取6只大鼠处死,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织的病理学变化,观察肝纤维化程度.免疫组织化学方法检测ROCK1的组织定位及表达.利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测不同时间段ROCK1基因mRNA转录水平的变化.结果 免疫组织化学结果显示,给药后3、6d、2、4、6、8周,正常对照组ROCK1阳性表达率分别为11%、15%、13%、11%、17%、14%;模型组ROCK1阳性表达率分别为14%、15%、52%、65%、75%、80%;差异有统计学意义(P=0.001).Real-time PCR检测显示ROCK1表达量(以对照组为1),模型组表达分别为1.018759、1.381913、1.831238、2.515323、2.257623、2.188587.结论 ROCK1在四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的过程中,其组织表达水平逐渐升高,说明Rho/ROCK通路可能是肝纤维化发生的另一条重要信号通路.
