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一起由肠侵袭性大肠埃希菌O136:K78引起的聚集性腹泻暴发
目的 明确聚集性食源性腹泻暴发的病原.方法 根据现场流行病学调查,对患者肛拭子标本18份,粪便标本2份,厨师粪便标本1份,进行分离培养,对分离到的可疑病原菌进行生化鉴定,采用Real-time PCR技术检测可疑病原菌的ipaH毒力基因,同时进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型分析.结果 分离到11株血清型为O136:K78的肠侵袭性大肠埃希菌,除1份肛拭子外,其余7份患者肛拭子、3份粪便标本Real-time PCR均阳性;除1株菌外,其余10株菌株的PFGE带型一致.结论 具有侵袭性相关基因ipaH的O136:K78肠侵袭大肠埃希菌是本次聚集性腹泻暴发的主要原因.
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一起侵袭性大肠埃希菌引起食物中毒暴发的流行病学调查
目的:对侵袭性大肠埃希菌引起的食物中毒暴发进行流行病学调查分析.方法:对中毒患者的呕吐物、粪便及接触可疑食物--猪肉的苫布和案板进行微生物培养鉴定.结果:分别从呕吐物、粪便、苫布和案板样本中检测出侵袭性大肠埃希菌.结论:根据本次食物中毒暴发的特点、临床表现及实验室检测结果,此次食物中毒暴发是因为猪肉被侵袭性大肠埃希菌所污染引起的.
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侵袭性大肠埃希菌IpaC的表达和纯化与检验学研究
目的 研究分析侵袭性大肠埃希茵的发病机制,表达和纯化侵袭性大肠埃希茵毒力蛋白IpaC与临床意义.方法 将含有ipaC基因的pET32a-ipaC表达质粒载体转化大肠杆菌BL21(λDE3),在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,对诱导后的表达产物进行SDS-PAGE鉴定,并采用QIAexpressionitsTM蛋白纯化系统纯化目的蛋白.结果 诱导后的表达产物经SDS-PAGE发现有一相对分子量约为63 kD的条带,其含量约占总蛋白量的13％,对目的蛋白进行纯化后发现,以400 mmol/L咪唑洗脱液洗脱时效果为理想,纯度可达90％以上.结论 pET32a-ipaC重组表达质粒转化大肠杆菌B121(λDE3),可稳定、高效地表达目的蛋白;QIAexpressionistTM蛋白纯化系统是一种简便、高效的纯化系统,可获得高纯度的目的蛋白.
关键词： 侵袭性大肠埃希菌 毒力蛋白(IpaC) 原核表达蛋白 纯化 -
侵袭性大肠埃希菌引起群体食物中毒的实验室快速分析
目的 快速分析由微生物引起的71人群体食物中毒的病原菌.方法 按GB/T 4789.1～14-2003、微生物学及微生物学检验中的方法.结果 结合71名食物中毒患者的流行病学调查,样品采集24 h后即有了目标菌的初步结果,后结果与初步结果相符.结论 这是一起由侵袭性大肠埃希菌引起的食物中毒.在优势菌生长旺盛的情况下,样品检测可以快速确定初步结果,为事故处理提供参考依据.
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PCR检测志贺菌和侵袭性大肠埃希菌的侵袭性质粒抗原H基因
目的建立一种志贺菌和侵袭性大肠埃希菌的PCR诊断方法.方法根据志贺菌和侵袭性大肠埃希菌的侵袭性质粒抗原H(ipaH)基因序列,设计一对引物,优化各种工作条件,建立一种PCR诊断方法.结果本法特异性好,敏感性可达10 CFU,整个实验过程在6～7 h内完成.结论建立的方法在理论和实际应用上都有优越性,可用于临床诊断.
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一次食物中毒相关的侵袭性大肠杆菌分子分型分析
目的 对一起食物中毒分离的病原菌进行鉴定、毒力基因检测及分子分型.方法 利用生化试验、血清学试验对病原菌进行鉴定,用普通PCR和real-time PCR对病原菌进行毒力基因检测,用PFGE对其同源性进行分析.结果 分离的12份病原菌均为Escherichia coli Ⅰ,血清型为EIEC O136K78,12份病原菌均携带uid、ipaH基因,其中5份检测携带vir基因.PFGE电泳图谱显示12株病原菌带型完全相同,表明来源于同一克隆株.结论 分子生物学技术与传统方法的有机结合对侵袭性大肠埃希菌的快速鉴定及分子分型具有重要意义.
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LAMP技术应用于志贺菌及侵袭性大肠埃希菌ipaH基因快速检测
目的:建立一种适合基层实验室快速检测志贺菌及侵袭性大肠埃希菌(EIEC)的实验方法.方法:根据志贺菌及EIEC共同含有的侵袭性质粒抗原ipaH基因序列设计4条引物,应用环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal am-plification)方法,分别对8株背景明确的不同血清型志贺菌标准株、34株志贺菌地方分离株、1株EIEC实验标准株、7株大肠埃希菌本室保存标准株、3株大肠埃希菌暴发株、10株其他肠道实验对照株进行检测,验证该方法的特异性及低检测限,通过肉眼目测与电泳检测比较结果.结果:本方法中共计42株志贺菌、1株EIEC及1株44147大肠埃希菌,经用LAMP方法检测,均为绿色并电泳有相应阶梯状条带为阳性结果,而9株其他大肠埃希菌及10株其他肠道实验对照株均呈橙色并电泳无相应阶梯状条带为阴性结果.至于1株44147大肠埃希菌为何也检测出ipaH基因,我们怀疑该菌株要么是EIEC中的一种,要么是在长期进化过程中从别处获得该基因,这尚待今后做进一步探讨.本方法具有较好的特异性,其低检测限为53 cfu/反应,自然光下通过肉眼即可判断结果,从菌株核酸的提取至检测完成仅需1.5 h左右.应用本方法对24份不同临床病人样本进行实际考核,3份痰液、1份胸积水、2份粪便及18份尿样经检测ipaH基因均为阴性,该结果与分离培养/普通PCR检测结果相符.结论:本次建立的LAMP方法,能快速、特异地检测志贺菌/EIEC,较适合基层实验室应用.
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一株极易误检为侵袭性大肠埃希菌O124:K72的无丙二酸柠檬酸杆菌
柠檬酸杆菌属肠杆菌科,主要存在于人和动物的胃肠道,也存在于外界环境中,为条件致病菌,多见于肠道、泌尿道、伤口等部位的混合性感染与血液性感染如败血症、脓毒症等,也有引起婴幼儿细菌性脑膜炎、脑脓肿的报道[1].
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从业人员体检中检出侵袭性大肠埃希菌O29:K?的报告
2006年7月28日在从业人员体检的沙门菌、志贺菌检验中,检出一株血清型为O29:K?的侵袭性大肠埃希菌(EIEC).现将检验情况报告如下:
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食物中毒标本中检出一例少见的侵袭性大肠埃希菌O164:K?
本市自2001年所辖某县检出过一例出血性大肠埃希菌(EHEC,O157)以来,多年未再检出过一例致泻大肠埃希菌.今年,在10月份的一起食物中毒标本中检出一例血清型为O164:K?的侵袭性大肠埃希菌(EIEC).经多次试验确认该菌在培养特性、生化反应上与其它EIEC有不同之处,现将检验过程和体会叙述如下.
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EIEC污染饮用水所致腹泻暴发的病原学研究
目的:从污染饮用水和患者大便中分离鉴定侵袭性大肠埃希菌(EIEC).方法:取水样 400 ml 加入10倍浓缩肠道菌增菌液 100 ml,患者大便 1 g 加入 10 ml GN增菌液.经增菌、分离培养、纯培养、生化试验、血清学试验、患者双份血清抗体效价测定等一系列微生物学鉴定.确定所致腹泻的病原菌以及对抗菌药物的敏感性.结果:经黑马Bat-IST分析系统鉴定和血清学试验.从水源水Ⅰ、水源水Ⅱ、饮用水和4例患者大便中分离鉴定出7株相同的EIEC O28ac:K73血清型.药敏试验表明,7株菌对哌拉西林、头孢哌酮、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、诺氟沙星,氯霉素敏感.结论:该次腹泻暴发的病原菌是EIEC O28ac:K73血清型污染饮用水所致.做水样增菌提高增菌液浓度5倍,增加水样量,可提高阳性检出率.7株EIEC生化反应乳糖阴性、赖氨酸脱羧酶阴性、不利用丙二酸盐,无动力,葡萄糖发酵不产气,应与志贺菌相区别.
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关于侵袭性大肠埃希菌的鉴定
近几年来,报道侵袭性大肠埃希菌的比较多,撰文介绍侵袭性大肠埃希菌鉴定方法的也比较多.可以说明这一类细菌正在受到更密切的关注.
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一株具有痢疾志贺菌抗原与基因相关性的侵袭性大肠埃希菌O29
目的 对造成婴儿腹泻的粪便标本中所分离出的一株菌株进行鉴定.方法 使用VITEK 2和志贺菌血清以及大肠埃希菌血清对此株菌进行生化和血清学鉴定.毒力基因和药敏试验以及对菌株进行多位点序列分析找出它与大肠杆菌和志贺菌之间的基因相关性.结果 生化鉴定为大肠埃希菌,此菌对侵袭性大肠埃希菌O29以及痢疾志贺菌1型血清都凝集.检测出ipaH基因.多位点序列分析显示属于ST38这一簇.结论 此菌株是侵袭性大肠埃希菌.
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一株与侵袭性大肠埃希菌O144诊断血清交叉凝集的蜂房哈夫尼亚菌
[目的]对试验中发现的一株与EIEC诊断血清O144:K?发生凝集反应的蜂房哈夫尼亚菌进行较详细的生化与血清学鉴定,为今后的相关细菌鉴定工作提供参考.[方法]参考国家食品卫生检验标准微生物分册GB/T4789-2003、临床微生物手册中的相关方法进行.[结果]该蜂房哈夫尼亚菌菌株生化不典型,且与EIEC O144:K?血清型存在交叉凝集反应.[结论]该菌株为蜂房哈夫尼亚菌中少数的、生化不典型的菌株,若不进行较详细的生化鉴定易误检为EIEC O144:K?.
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一起侵袭性大肠埃希菌食物中毒事件的溯源分析
目的 调查一起以发热、腹痛、腹泻为主要症状的食物中毒事件的病因,查找传染源.方法 开展病例个案调查和现场勘察,并采集病例、食堂厨师粪便样本进行实验室检测.结果 从病例粪便和厨师肛拭子样本中均检出侵袭性大肠埃希菌(血清型为O136∶K78),且其PFGE带型一样,菌株间呈高度同源.结论 这是一起由侵袭性大肠埃希菌感染造成的食源性疾病暴发.建议规范和落实学校餐饮卫生监管,注意食品生熟分开,防止交叉污染,做好从事食品加工和餐饮服务行业人员的健康体检,无症状带菌者对人群的威胁应引起重视,防止食源性疾病暴发的发生.
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一起侵袭性大肠埃希菌食物中毒调查分析
目的 探讨防制食物中毒事件发生的对策.方法 采用流行病学卫生学和实验室检测方法进行调查分析.结果 累计报告病例26例.罹患率32.5%,食物粪便中检出大肠埃希菌.结论 该起事件为侵袭性大肠埃希菌(EIEC029:K?)污染食物引起的食物中毒.
