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细胞周期素E P27KIP1多参数测定在胃癌早期诊断中的应用
目的 探讨细胞周期素E(cyclinE)、P27KIP1的表达在胃癌早期诊断中的价值.方法 本研究共选取34例胃癌、10例癌前病变及10例正常胃黏膜,机械法或胶原酶和透明质酸酶混合消化法制备单细胞悬液.异硫氰酸荧光素(FIT℃)标记的二抗和藻红蛋白(PE)标记的单抗经多参数流式细胞术的方法分别检测cyclinE、P27KIP1的表达.结果 胃癌cyclinE和P27KIP1的表达率分别为(32±15)%、(6±5)%,与正常胃黏膜及癌前病变相比较,差异有统计学意义(P《0.01).结论 CyclinE过表达和P27KIP1低表达使G1/S转换点调节失控,与胃癌的发生、进展密切相关.二者的联合测定有利于胃癌的早期诊断.
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细胞周期素E P27KIP1多参数测定在胃癌早期诊断中的应用
目的 探讨细胞周期素E(cyclinE)、P27KIP1的表达在胃癌早期诊断中的价值.方法 本研究共选取34例胃癌、10例癌前病变及10例正常胃黏膜,机械法或胶原酶和透明质酸酶混合消化法制备单细胞悬液.异硫氰酸荧光素(FIT℃)标记的二抗和藻红蛋白(PE)标记的单抗经多参数流式细胞术的方法分别检测cyclinE、P27KIP1的表达.结果 胃癌cyclinE和P27KIP1的表达率分别为(32±15)%、(6±5)%,与正常胃黏膜及癌前病变相比较,差异有统计学意义(P《0.01).结论 CyclinE过表达和P27KIP1低表达使G1/S转换点调节失控,与胃癌的发生、进展密切相关.二者的联合测定有利于胃癌的早期诊断.
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细胞周期抑制蛋白p27kip1和周期蛋白表达与大肠癌发生预后
目的探讨细胞周期调控抑制因子 p27kip1蛋白和周期蛋白 E(cyclinE)在大肠腺癌发生发展中的作用.方法采用免疫组化技术 SP法,检测 p27kip1和 cyclinE蛋白在 37例大肠腺癌和 26例正常大肠黏膜组织中的表达.结果 p27kip1蛋白阳性表达率在大肠腺癌组织中为 45.9% , 显著低于正常大肠黏膜组织 (χ 2=4.590, P< 0.05),并与大肠腺癌组织分化程度和淋巴结转移均有关 (χ 2=9.653, χ 2=6.838, P< 0.05); cyclinE蛋白阳性表达率在大肠腺癌组织中为 64.9%,显著高于正常大肠黏膜组织 (χ 2=4.285, P< 0.05) , 并与大肠腺癌组织分化程度和淋巴结转移均有关 (χ 2=8.397,χ 2=5.261, P< 0.05); p27kip1蛋白阳性表达组 cyclinE蛋白阳性表达率低于 p27kip1蛋白阴性表达组,但两者无相关( r=- 0.1133, P >0.05).结论 p27kip1蛋白的低表达和 /或 cyclinE蛋白的高表达在大肠腺癌发生中发挥重要作用,并可能有助于预测其恶性程度及淋巴结转移,可能对大肠腺癌的治疗和生活质量的改善有指导作用.
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P21Cip/WAF1及P27Kip1与增殖细胞核抗原在人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化过程中的表达
背景:P21CIp/WAF1、P27Kip1是两种重要的细胞周期的负调控因子,增殖细胞核抗原是反映干细胞增殖的指标.目的:观察体外诱导人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化过程中P21Cip/WAF1,P27KIp1及增殖细胞核抗原的表达变化.设计、时间及地点:细胞学基因水平观察,于2006-12/2007-06在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心实验室完成.材料:骨髓来源于中山大学附属第二医院行骨髓穿刺的健康供者.方法:全骨髓贴壁筛选法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,传至第5代后,加入含20 μg/L肝细胞生长因子、10 μg/L成纤维细胞生长因子4的opti-MEM I低血清培养基向肝细胞诱导分化.主要观察指标:诱导后RT-PCR检测细胞内P21Cip/WAF1,P27 KIp1及增殖细胞核抗原基因mRNA的表达.结果:骨髓间充质干细胞向肝细胞定向诱导后0,1,3,5,7 d,细胞内P21CIp/WAF1 mRNA表达的相对量逐渐升高(P＜0.01),P27Kip1 mRNA表达的相对量无明显差异(P＞0.05),增殖细胞核抗原mRNA表达的相对量除诱导后0,1 d无明显差异(P＞0.05)外,其余各时间点均逐渐降低(P＜0.01).结论:P21 CIp/WAF1高表达抑制了骨髓间充质干细胞增殖,同时在其向肝细胞分化过程中起一定调控作用,P27KIp1可能并不起作用,增殖细胞核抗原的表达则与P21Cip/WAF1相反,呈逐步减少趋势.
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胃癌细胞p27kip1、cyclinE的表达及与幽门螺杆菌感染关系
[目的]观察胃癌细胞p27kip1、cyclinE的表达情况,并分析幽门螺杆菌(Helicobacter pylori ,Hp)感染对二者表达的影响,以探讨Hp可能的致癌机制. [方法]用免疫组织化学SP法检测59例胃癌p27kip1、cyclinE表达情况,采用改良Giemsa快速尿素酶检验法检测Hp感染.[结果]p27kip1阳性率在正常胃黏膜为84.22%,显著高于胃癌的47.46%(P<0.05),胃癌中高中分化腺癌组为68.42%,显著高于低分化腺癌的37.5%和与胃黏液癌的31.25%(P<0.05),但后两者间无显著性差异(P>0.05). cyclinE阳性率在正常胃粘膜为11.11%,显著低于胃癌的55.93%(P<0.05),胃癌中高中分化腺癌组为31.58%显著低于低分化腺癌的66.67%和胃黏液癌的68.75%(P<0.05),后两者间无显著性差异(P>0.05).p27kip1及cyclinE的阳性率在Hp阳性和Hp阴性胃癌组间无显著差异性(P>0.05). [结论]胃癌组织p27kip1表达下调、cyclinE表达上调,提示二者的表达失衡可能会促进胃癌的发生.但二者表达与Hp感染无明显相关关系.
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肿瘤中p27kipl表达的调节及其作用
p27kip1是细胞周期依赖性激酶抑制因子(CDKI)家族的一位新发现的成员,p27kip1的表达受细胞接触抑制和特殊生长因子的调节,是多肿瘤抑制基因.现已发现,p27kip1在多重基本的细胞增殖、分化、凋亡等活动中扮演重要角色.在不同的人类肿瘤中,p27kip1是作为一独立的预后因素而出现的.作者对p27kip1在肿瘤中表达的多重调节及其在治疗和预后标志方面的研究作了综述.
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p27kip1和cyclin D1在肾癌中的表达及临床意义
目的:研究肾癌组织中p27kip1和cyclin D1蛋白的表达,探讨其与肾癌生物学特征的内在联系.方法:应用免疫组化S-P法,对53例肾癌及6例正常肾组织中p27kip1和cyclin D1蛋白进行检测.结果:在正常肾组织中p27kip1均呈阳性表达,p27kip1阳性表达率在肾癌不同临床分期,不同病理分级中差异显著(G1～G2:70.00%,G3～G4:27.27%,P＜0.05;T1～T2:70.83%,T3～T4:20.69%,P＜0.05).cyclinD1在正常肾组织呈阴性表达,cyclin D1阳性表达率在肾癌不同临床分期,不同病理分级中差异显著(G1～G2:51.35%,G3～G,4:27.27%,P＜0.05;T1～T2:58.33%,T3～T4:20.69%,P＜0.05).结论:p27kip1和cyclin D1蛋白在肾癌中的表达与肿瘤生物学行为密切相关,p27kip1和cyclin D1在肾癌的发生、发展中起重要作用.
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Cdk2及其抑制因子p27Kip1在胃癌中的表达和意义
目的:探讨细胞周期素依赖性激酶2(Cdk2)及其抑制因子p27Kip1与胃癌生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学S-P法对60例胃癌组织原发灶和淋巴结转移灶进行Cdk2、p27Kip1免疫组化染色,腹水或腹腔冲洗液行脱落细胞学检查.结果:Cdk2阳性表达率56.67%(34/60),阳性细胞定位于细胞核和细胞浆,以Ⅲ、Ⅳ期表达率较高(P<0.01),与胃癌大体类型及浆膜分型关系密切(P<0.01);p27Kip1阳性表达率为43.33%(26/60),阳性细胞定位于细胞浆,在高分化及Ⅰ、Ⅱ期胃癌高表达(P<0.05),且与淋巴结转移密切相关(P<0.01);Cdk2、p27Kip1同时阳性表达19例,占31.67%(19/60).结论:Cdk2与胃癌浸润深度、淋巴结转移呈正相关,p27Kip1表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移呈负相关.
关键词： 胃癌 细胞周期素依赖性激酶2 p27kip1 免疫组织化学方法 -
锯叶棕提取物对U266细胞凋亡相关蛋白表达的影响
目的 探讨锯叶棕提取物诱导U266细胞凋亡及对U266细胞凋亡相关蛋白表达的影响.方法 1)体外培养U266细胞并加入到不同浓度的锯叶棕提取物(0.5μL/mL或1.0μL/mL)培养24小时,利用流式细胞仪测定位于前G1时期的细胞百分比以检测细胞凋亡.2)体外培养U266细胞并加入到锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24小时,应用Western Blot检测p27kip1 、MCl-1蛋白表达.结果 1)锯叶棕提取物诱导U266细胞凋亡有剂量依赖性(P<0.05 ).2)U266细胞暴露于锯叶棕提取物(1.0μL/mL)培养24小时,Mcl-1减少60.0%;同时p27kip1蛋白水平表达明显增加.结论 锯叶棕提取物通过调节p27kip1、MCl-1蛋白水平诱导U266细胞生长抑制和促凋亡.
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表皮生长因子对食管鳞癌细胞Eca109细胞周期及其调控因子的影响
目的:探讨表皮生长因子( EGF)对食管鳞癌细胞Eca109 细胞周期及相关调控因子的影响. 方法:20 ng/ml重组人EGF( rhEGF)作用于血清饥饿的Eca109细胞24 h,采用流式细胞术检测EGF对Eca109细胞周期的影响,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测p21CIP1/WAF1(p21)、p27KIP1(p27)mRNA的表达情况,Western blot 检测p21、p27蛋白的表达情况. 结果:EGF组和对照组G1期细胞所占比例分别为(54.90±0.82)%和(65.94±0.74)%(P<0.01);qRT-PCR结果显示p21 mRNA表达水平EGF组明显高于对照组,p27 mRNA表达水平EGF组明显低于对照组( P<0.01 );Western blot结果显示, p21蛋白表达水平EGF组明显高于对照组,p27蛋白表达水平EGF组明显低于对照组( P<0.01 ). 结论:EGF有利于Eca109细胞从G1期过渡到S期,促进细胞增殖,可能与调节p21、p27的mRNA和蛋白的表达相关.
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P27kip1在胃癌中的表达与其临床生物学行为关系的研究
目的 研究胃癌组织中P27kip1蛋白的表达及其与胃癌临床生物学行为的关系.方法 采用免疫组织化学方法(SP法)检测胃癌组织和正常胃粘膜中P27kip1蛋白的表达.结果 P27kip1蛋白阳性表达率在胃癌中(38%)显著低于正常胃粘膜(100%)(P＜0.01);P27kip1蛋白表达与胃癌患者性别、年龄、肿瘤发生部位、大小及大体分型均无关(P＞0.05).P27kip1蛋白表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移、FTNM分期及术后5年生存率相关(P＜0.05或P＜0.01).结论 P27kip1蛋白的异常表达参与了胃癌的发生、发展.
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Skp2-siRNA对Eca-109食管癌细胞系p27kip1蛋白表达的影响
目的 观察通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)使Skp2基因沉默转染后对食管癌Eca-109细胞株中p27kip1表达的影响.方法 以Eca-109食管癌细胞系作为实验对象,设计合成针对Skp2的siRNA并进行转染.实验分为转染组、空白对照组、转染对照组、阴性对照组.采用免疫组化方法(SP法)检测各组Eca-109食管癌细胞系p27kip1蛋白表达的情况,采用Imageproplus(IPP)测定累积光密度值(IOD).每张切片选5个视野,求IOD 均值.采用方差分析进行组间均数比较,以p<0.05表示差异有统计学意义.结果 ①RNAi-Mate转染Eca-109细胞6 h后用荧光显微镜检测,计数转染Eca-109细胞的效率＞80%,本实验选此比例作为实验浓度.②经过转染后24 h的细胞开始变圆,生长比同时间正常培养的对照组细胞缓慢,48 h后细胞出现凋亡,有部分细胞脱落,72 h后细胞脱落变多.③免疫组化检测结果显示:转染 24 h后p27kip1蛋白表达开始上升IOD值为7.295±0.277、48 h后上升明显IOD值为9.075±0.880、72 h 后p27kip1蛋白表达开始下降IOD值为3.506±0.160,与空白对照组相比较,差异有显著统计学意义(P<0.01,psiRNA=0.000),转染组24 h、48 h、72 h之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 将人Skp2-siRNA转染入Eca-109食管癌细胞系后,能有效通过下调Skp2的表达,而上调p27kip1蛋白的表达.说明Skp2在Eca-109食管癌细胞增殖调控中起到重要作用,RNAi技术有可能作为抑制肿瘤细胞生长的一种手段.
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p27kip1在中老年舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义
目的探讨中老年舌鳞状细胞癌组织中p27kip1的表达情况,揭示p27kip1表达与舌鳞状细胞癌的临床特征之间的关系及作用.方法应用免疫组织化学S-P法对40例舌癌组织、癌旁组织及20例正常口腔黏膜组织进行p27kip1检测.结果 (1)p27kip1蛋白表达在舌癌、癌旁组织及正常口腔黏膜之间有显著性差异.(2)p27kip1蛋白低表达与颈淋巴结转移、患者预后有相关性(P＜0.05),而与病人性别、年龄、吸烟史,病理分化无相关性(P＞0.05).结论 p27kip1是判断舌癌预后的有效指标且具有相关性.
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PTEN基因稳定转染联合辐射对肿瘤细胞周期进程及G1期激酶抑制蛋白P27kip1表达的影响
目的:研究辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN体外转染对人脑胶质瘤SHG-44细胞周期进程及G1期激酶抑制蛋白P27表达的影响.方法:脂质体包裹重组载体体外转染肿瘤细胞并经G418筛选稳定表达细胞株,光学显微镜和透射电镜观察稳定转染细胞形态,以Western blotting法检测PTEN基因的辐射诱导表达情况,应用流式细胞术研究稳定转染联合0～10 Gy X-射线照射对胶质瘤细胞周期进程及P27kip1的表达.结果:稳定转染PTEN基因的SHG-44细胞PTEN蛋白的相对表达量可被辐射诱导增强,5Gy以内PTEN蛋白的相对表达量随照射剂量增加而增加;稳定转染细胞超微结构有明显的退行性改变,可见核内染色质趋边的类似早期凋亡的改变;稳定转染联合X-射线照射细胞周期发生明显改变,细胞从G1期到S期发生阻滞,细胞周期相关蛋白P27表达上调.结论:PTEN基因稳定转染联合辐射可诱导肿瘤细胞G1期阻滞,并与P27kip1表达上调有关.
关键词： pEgr-hPTEN X线 神经胶质瘤 p27kip1 细胞周期 -
Skp2-P27kip1通路及其相关凋亡基因在结肠癌组织中的表达及意义
目的:探讨Skp2和P27kip1蛋白在结肠癌中的表达及其相关性,阐明两者在结肠癌的发生和发展中的作用.方法:应用免疫组织化学SABC法检测50例结肠癌患者癌组织和20例正常结肠组织中Skp2、P27kip1、P53和Bcl-2蛋白的表达,比较不同组织中阳性细胞表达百分比,分析其与结肠癌临床病理参数的相关性.结果:与正常组织比较,结肠癌组织中Skp2蛋白阳性表达率增加(P＜0.05),P27kip1蛋白阳性表达率降低(P＜0.05).Skp2蛋白阳性表达率在临床Duck's分期C和D期结肠癌、低分化结肠癌及伴有淋巴结转移的结肠癌组织中增加(P＜0.05),P27kip1蛋白阳性表达率在临床Duck's分期A和B期结肠癌、高分化结肠癌及无淋巴结转移的结肠癌组织中增加(P＜0.05).P53和Bcl-2蛋白在低分化结肠癌组织中均高表达(P＜0.05).结肠癌中Skp2与P27kip1的表达率呈负相关关系(r=-0.282,P＜0.05),与P53及Bcl-2蛋白阳性表达率分别呈正相关关系(r1=0.345,r2=0.231,P＜0.01).结论:Skp2和P27kip1蛋白的异常表达参与了结肠癌组织的分化、浸润和转移,相关凋亡基因P53及Bcl-2蛋白表达上调可能是其作用机制之一.
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p27kip1和Cyclin E 在子宫内膜癌表达的临床病理意义
目的:研究p27kip1和Cyclin E在子宫内膜癌组织的表达以及与临床病理参数的关系,探讨其在肿瘤发生、发展及预后的意义.方法:采用免疫组化S-P法检测p27kip1和Cyclin E在正常子宫内膜(8例)、子宫内膜不典型增生(8例)和子宫内膜癌(52例)组织中的表达.结果:① p27kip1和Cyclin E阳性表达主要定位于细胞核,与正常子宫内膜和内膜不典型增生组织相比,p27kip1在子宫内膜癌的表达明显下降,Cyciin E明显上升,差异具有显著性,在内膜癌中p27kip1与Cyclin E蛋白表达呈负相关(r=-0.302 6,P＜0.05).②p27kip1和Cyclin E蛋白表达与内膜腺癌组织学分化程度和肿瘤肌层浸润程度或有无淋巴结转移有关,与病理类型无关;Cyclin E表达高低也与临床分期和5年生存率有关.结论:p27kip1表达降低和(或)Cyclin E过度表达与子宫内膜癌的发生发展有关,Cyclin E可作为判定内膜癌预后的指标.
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p27kip1及相关分子skp2在肺癌组织中的表达及其临床意义
目的:研究细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白27(p27kip1)和细胞S相激酶相关蛋白2(skp2)在肺癌癌组织中的表达及意义.方法:选取于我院就诊的72例肺癌患者的肺癌组织和20例癌旁正常肺组织,采用免疫组化技术检测标本中p27kip1和skp2的表达,并分析其与患者的临床病理之间的关系.结果:skp2在肺癌组织中的表达高于正常肺组织,而p27kip1在肺癌组织中的表达低于正常肺组织,差异均有统计学意义(P＜0.05),且两者的表达呈负相关关系,相关系数r=-0.855(P＜0.05),skp2的表达与肺癌组织学类型、分化程度、TNM分期、淋巴结有无转移、吸烟与否及p27kip1蛋白表达有关(P＜0.05).结论:p27kip1低表达和skp2高表达可能是肺癌发生发展的重要原因,可应用于临床诊治肺癌患者和判断预后.
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p27、Cyclin D1在膀胱癌中的表达及免疫组织化学研究
目的 通过检测p27kip1与Cyclin D1在膀胱癌中的免疫组织化学研究,以探讨两者在膀胱癌发生、发展中的作用及其与临床病理特征的关系.方法 对70例标本进行SP免疫组织化学方法检测p27kip1,Cyclin D1的表达水平.其中正常组织28例,膀胱癌组织52例.结果 P27kip1,Cyclin D1在正常膀胱组织中的表达率和在膀胱癌组织中的表达均具有显著性差异(P＜0.01).p27蛋白在低分化组中的表达水平显著低于高分化组(P＜0.01)和中分化组(P＜0.01),Cyclin D1表达水平在低分化组中显著高于高分化组(P＜0.01),在中低分化组间无显著性差异(P＞0.05).结论 p27kip1的表达与临床分期无关而Cyclin D1的表达与临床分期相关.p27kip1与Cyclin D1的相互关系呈负相关.
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P27kip1、cyclinE与结肠癌临床病理因素及预后关系的研究
目的分析P27kip1、cyclinE与结肠癌生物学行为和预后的关系.方法采用S-P法免疫组化观察71例结肠癌与21例正常肠粘膜组织的P27kipl和cyclinE的表达情况.结果P27kip1、cyclinE异常表达同结肠癌的发生与进展有关.结论P27kip1、cyclinE联合检测有利于对结肠癌预后的评价.
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P27kip1、Ki-67蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义
目的 研究P27kip1、Ki-67在胃癌中的表达及与肿瘤分期的关系.方法 SP免疫组化法对72例胃癌的P27kip1和Ki-67表达进行观察.结果 P27kip1在胃癌中呈散在表达(36.1%),其阳性表达率显著低于正常粘膜(P<0.01);Ki-67阳性表达率50%,其表达率与肿瘤进展程度密切相关;P27kip1与Ki-67之前阳性表达呈现负相关.结论 P27Kip1表达的缺失与胃癌的发生发展密切相关,Ki-67能客观反映肿瘤的恶性程度,与肿瘤预后有一定的相关性.
