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同期放化疗诱导人结直肠癌细胞发生上皮-间质转化
目的:探讨放化疗抵抗的结直肠癌细胞发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的意义.方法:采用5-FU化疗同期进行放疗对人结直肠癌野生型细胞(HCTll6)进行干预,诱导放化疗共同抵抗的细胞株(HCT1 16CRR)并采用克隆形成实验进行放化疗抵抗性的鉴定.高倍显微镜下观察细胞形态学变化.采用Real-time PCR和Western印迹,检测上皮表型标志物E-cadherin,间质表型标志物N-cadherin、波形蛋白(vimentin)、核转录因子(Snail)mRNA及其蛋白的表达.结果:放化疗抵抗的结直肠癌细胞发生与EMT相符的形态学改变,细胞呈纺锤体状,极性消失,并出现伪足;Real-time PCR和Western印迹结果显示E-cadherin mRNA及蛋白表达下调;N-cadherin,vimentin,Snail mRNA及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:放化疗抵抗后的人结直肠癌细胞发生EMT,其与结直肠癌的治疗抵抗相关.
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口腔鳞状细胞癌瘤芽与上皮-间质转化相关性分析及临床意义
目的：观察口腔鳞状细胞癌瘤芽(tumor budding)与上皮–间质转化(EMT)相关性，进一步探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法：收集我院2007年至2013年收治的30例口腔鳞状细胞癌患者手术切除的标本，根据HE染色瘤芽数量将其分为2组，低瘤芽组(≤5)，高瘤芽组(>5)。免疫组织化学观察切片组织波形蛋白(Vimentin)表达情况，分析瘤芽数量与上皮间质转化的相关性以及与临床病理特征的关系，Kaplan-Meier法进行生存分析，组间差异采用Log-rank检验。结果：低瘤芽组共22例，高瘤芽组共18例，病理学检查发现瘤芽内肿瘤细胞形态与肿瘤主体细胞无差异，瘤芽数量与患者年龄、性别、无相关性，瘤芽与肿瘤大小、临床分期以及淋巴结转移呈正相关(P<0.05)，高瘤芽组其Vimentin的表达率明显高于低瘤芽组，提示瘤芽与口腔癌EMT过程相关，是EMT的形态学表现。两组患者的中位生存期(overall survival，OS)分别为40.4，26.5个月(χ2=5.265， P=0.012)，两组中位无进展生存期(progression-free survival，PFS)分别为35.8，22.1个月(χ2=6.744， P=0.009)。结论：口腔鳞状细胞癌组织瘤芽数量与EMT密切相关，代表恶性和侵袭能力更高的癌细胞亚群，可作为口腔鳞状细胞癌患者的预后判断指标。
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胃癌组织YAP1、E-cadherin、N-cadherin表达及临床意义
目的:探讨YAP1、E-cadherin、N-cadherin在胃癌组织中表达及意义.方法:用免疫组化法检测胃癌组织芯片中135例患者癌组织和癌旁组织中YAP1、E-cadherin、N-cadherin表达,分析YAP1表达与E-cadherin、N-cadherin表达的关系,以及与胃癌患者临床病理因素以及预后的关系.结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中YAP1表达明显升高,E-cadherin表达明显降低(均P<0.05),N-cadherin表达无明显差异(P>0.05);在胃癌组织中,YAP1表达与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.273,P=0.032),与N-cadherin表达呈正相关(r=0.304,P=0.019).YAP1在胃癌组织中的表达与胃癌患者淋巴转移、脉管侵犯有关(均P<0.05),且YAP1阳性表达患者总生存率明显低于阴性表达患者(χ2=4.354,P=0.037).结论:YPA1与E-cadherin在胃癌组织中表达有明显变化,YAP1高表达与胃癌患者不良临床病理特征及预后密切相关.
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Snail在肝内胆管癌中的表达及其临床意义
目的:探讨Snail在肝内胆管癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和生存预后的关系.方法:回顾性分析1999年12月-2010年1月外科手术治疗的55例肝内胆管癌病例及随访资料,免疫组织化学检测上述患者癌组织及癌旁组织标本中Snail的表达情况,分析Snail表达与临床病例资料、病理特征及预后的关系.结果:肿瘤组织中Snail表达量(2.764 vs.0.914)与高表达率(48.6％vs.18.0％)均明显高于癌旁组织(均P＜0.05),且Snail表达与肿瘤分化(x2=4.231,P=0.040)、TNM分期(x 2=6.631,P=0.010)、淋巴结转移(x2=4.134,P=0.042)、微血管侵犯(x 2=10.197,P=0.001)以及复发(x 2=4.610,P=0.032)有关,与Snail低表达患者比较,Snail高表达患者总体生存率降低(P=0.018)、术后累计复发率升高(P=0.032).单因素分析与多因素Cox回归模型分析结果示,微血管侵犯、淋巴结转移以及Snail表达是肝内胆管癌患者预后的独立影响因素(均P＜0.05).结论:Snail在肝内胆管癌组织中表达增加,且Snail过表达与肝内胆管癌患者恶性病理特征及不良预后密切相关.
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膜联蛋白A2、上皮细胞钙黏蛋白及波形蛋白在肝内胆管结石相关肝内胆管癌中的表达及意义
目的:探讨膜联蛋白A2(annexin A2)与上皮-间质转化(EMT)标志物上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)及波形蛋白(vimentin)在肝内胆管结石相关肝内胆管癌中的表达及意义.方法:用免疫组化检测46例肝内胆管结石相关肝内胆管癌组织(肿瘤组)、50例单纯肝内胆管结石慢性炎症胆管组织(炎症组)及35例来自血管瘤旁和肝外伤的正常胆管组织(正常组)中annexinA2、E-eadherin、vimentin的表达,比较各组3种蛋白表达的差异,并分析3种蛋白的表达与肿瘤组患者临床病理特征及预后的关系.结果:annexin A2与vimentin的阳性表达率在肿瘤组、炎症组、正常组均呈依次明显降低(69.6％vs.36.0％vs.11.4％;54.3％vs.28.0％vs.8.6％,均P＜0.05),而E-cadherin的阳性表达率则相反(21.7％vs.48.0％vs.71.4％,均P＜0.05);在胆管癌组织中,annexin A2与vimentin的表达呈正相关(r=0.627,P＜0.05),E-cadherin的表达与annexin A2、vimentin的表达均呈负相关(r=-0.682;r=-0.575,均P＜0.05).annexin A2、vimentin的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关,E-cadherin的表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移有关(均P＜0.05).肝内胆管结石相关肝内胆管癌患者中,annexin A2和vimentin各自阳性者的生存率低于其各自阴性者,E-cadherin阴性者生存率低于其阳性者(均P＜0.05).结论:annexin A2/EMT通路在肝内胆管结石相关肝内胆管癌的发生和发展中可能至关重要,annexinA2、E-cadherin及vimentin的表达与肿瘤的恶性程度和患者预后密切相关.
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胃癌细胞奥沙利铂耐药与上皮-间质转化关系研究
目的:探讨胃癌细胞奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药与上皮-间质转化(EMT)的关系.方法:采用逐步递增L-OHP浓度持续体外诱导人胃癌SGC-7901细胞,建立L-OHP耐药细胞系SGC-7901/L-OHP;通过形态学、群体倍增时间、药物敏感性检测确定SGC-7901/L-OHP成功建立;比较SGC-7901/L-OHP细胞与亲代细胞EMT相关标记物N-cadherin和E-cadherin表达差异.结果:经6个月诱导,L-OHP耐药细胞系SGC-7901/L-OHP成功建立,表现为该细胞的形态由上皮表型转变为间质样细胞表型;群体倍增时间较亲代细胞明显延长(P＜0.05);L-OHP的IC50为亲代细胞的9.7倍.与亲代细胞SGC-790比较,SGC-7901/L-OHP细胞中N-cadherin mRNA和蛋白表达明显上调,E-cadherin mRNA和蛋白表达明显下调(均P＜0.05).结论:EMT可能是人胃癌细胞对L-OHP产生耐药的重要机制.
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CDH17对胃癌细胞侵袭性的影响及其机制
目的:探讨CDH17在胃癌细胞中的表达及其对胃癌侵袭性的影响.方法:分别用Transwell侵袭实验、免疫荧光染色及Western blot法检测正常胃黏膜GES-1细胞和胃癌MGC803细胞与BGC823细胞的侵袭力与CDH17、上皮标志物E-cadherin、间质标志物N-cadherin的表达,以及两种胃癌细胞转染CDH17siRNA后以上指标的变化.结果:正常胃黏膜GES-1细胞无穿膜细胞、无CDH17与N-cadherin表达,而有明显的E-cadherin表达;与GES-1细胞比较,两种胃癌细胞均有明显的穿膜细胞及明显的CDH17与N-cadherin表达,而E-cadherin呈低表达(均P＜0.05),且高侵袭力的MGC803细胞上述变化较低侵袭力的BGC823细胞更为明显;两种胃癌细胞转染CDH17siRNA后,上述指标变化较转染前明显抑制(均P＜0.05),且在两种细胞间的差异缩小(均P＞0.05).结论:CDH17高表达可能通过上皮间质转化促进胃癌细胞系侵袭性.
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低氧对肝癌细胞上皮间质转化及侵袭转移能力的影响
目的:观察低氧环境下肝癌细胞上皮-间质转化(EMT)情况和侵袭转移能力的改变.方法:选取2种具有不同侵袭转移能力的人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2,通过1％ O2低氧培养建立人肝癌细胞物理缺氧模型.动态观察2种细胞在低氧环境中的形态学改变；应用Westernblot方法检测上皮细胞标志蛋白E-cadherin和间质细胞标志蛋白vimentin表达的变化；应用Transwell小室检测肝癌细胞迁移、侵袭能力.结果:低氧环境中,该2种肝癌细胞均由原来的紧密排列上午上皮样状态转为较松散的纺锤体样改变；Western blot检测显示,2种肝癌细胞株的E-cadherin表达量明显下降(均P＜0.01),而vimentin表达量明显升高(均P＜0.01)；Transwell迁移及侵袭实验显示,2种肝癌细胞的迁移及侵袭能力明显增强(均P＜0.01)；SMMC-7721细胞的上述变化均较HepG2细胞明显(均P＜0.01).结论:低氧环境可诱导肝癌细胞发生EMT,并增强肝癌细胞的迁移和侵袭能力.
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细胞核Snail因子在胰腺癌上皮-间质转化中的作用
目的：探讨细胞核因子Snail在胰腺癌组织中的表达及与胰腺癌上皮-间质转化（EMT）过程的相关性。
方法：采用免疫组织化学方法检测77例胰腺癌组织（研究组）与13例正常胰腺组织（对照组）中的Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达。
结果：研究组中胰腺癌患者胰腺组织中Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达阳性率为70.13%、68.83%、36.36%、72.73%。对照组13例正常胰腺组织中 Snail、Slug 均不表达，E-cadherin、vimentin的表达阳性率分别为92.31%、7.69%。胰腺癌组织中Snail表达与E-cadherin表达呈负相关（r=-0.225，P=0.025），与vimentin表达呈正相关（r=0.493，P<0.01）；Slug表达与vimentin表达呈正相关（r=0.358，P=0.001）。Slug的表达与肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关、E-cadherin的表达与淋巴结的转移与肿瘤分化程度有关、vimentin的表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关（均P<0.01）。
结论：Snail的高表达可能通过调控EMT过程在胰腺癌的发展过程中发挥作用，是胰腺癌浸润和转移的重要生物学指标。 -
MiR-324-3p经上皮-间质转化调控鼻咽癌迁移侵袭的实验分析
目的 探讨miR-324-3p对鼻咽癌细胞体外迁移侵袭能力的影响.方法 MiR-324-3p转移上调其在鼻咽癌5-8F和6-10B细胞中的表达,采用划痕愈合实验及Transwell侵袭实验检测上调后的鼻咽癌5-8F和6-10B细胞迁移及侵袭能力;western blot检测上皮-间质转化(EMT)上皮细胞标志物E-cadherin和间质细胞标志物Vimentin的表达.结果 MiR-324-3p成功转移上调了其在鼻咽癌5-8F和6-10B细胞中的表达.过表达miR-324-3p的鼻咽癌5-8F和6-10B细胞的体外迁移及侵袭能力显著下降,可同时伴随着E-cadherin的表达上调,Vimentin 的表达下降.结论 MiR-324-3p可能通过诱导EMT改变调控鼻咽癌细胞的侵袭转移能力.
关键词： 鼻咽癌 miR-324-3p 侵袭 转移 上皮-间质转化 -
AEG-1介导上皮-间质转化调控头颈部鳞状细胞癌的侵袭转移
目的 分析星形胶质细胞上调基因-1(astroeyte elevated gene-1,AEG-1)可介导上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)调控头颈鳞癌侵袭转移的分子机制.方法 采用慢病毒介导AEG-1的上调载体上调AEG-1在头颈鳞癌Tu686细胞中的表达,划痕愈合实验、Transwell侵袭小室实验检测其体外迁移侵袭能力的改变,同时Western blot检测EMT分子标志物E-cadherin及Vimentin的表达情况.结果 Tu686细胞中AEG-1表达上调后,细胞划痕愈合率增加,穿过Transwell聚碳酸酯膜的细胞明显增多,且Tu686细胞上皮细胞标志物E-cadherin的表达量显著下调,间质细胞标志物Vimentin表达显著上调.结论 AEG-1表达上调可显著提高头颈部鳞癌细胞的体外侵袭能力,且该侵袭能力的增强可能与AEG-1介导的EMT改变密切相关.
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HA 转 hGM-CSF HepG2疫苗对 IL-6诱导 HepG2细胞 EMT的影响及机制
目的：探讨 HA 转 hGM-CSFHepG2疫苗逆转 IL-6诱导 HepG2肝癌细胞上皮-间质转化（EMT）的机制。方法：体外用 HA 转 hGM-CSFHepG2疫苗共培养受 IL-6刺激的 HepG2细胞，采用 Traswell 迁移实验，Western-blot、RT-PCR 方法分别检测疫苗处理前后 HepG2细胞的增殖及侵袭能力的变化、EMT 标志物 E-cadherin、调控因子（p-Stat3、Twist）蛋白及 E-cadherinmRNA、TwistmRNA 表达变化情况。结果：① IL-6组较阴性对照组穿膜细胞数明显增多，侵袭能力明显增强，差异有统计学意义。② IL-6组较阴性对照组 E-cadherin 的表达水平降低， p-Stat3、Twist 蛋白表达升高，差异均有统计学意义。③疫苗组的穿膜细胞数较其他三组明显减少，侵袭能力下降，差异均有统计学意义。④转染后的疫苗组较其他三组 E-cadherin 蛋白表达升高，而 p-Stat3、Twist 蛋白表达下降，且差异均有统计学意义。⑤疫苗组较其他三组 E-cadherinmRNA 表达上调、TwistmRNA 表达下调，且差异均有统计学意义。结论：① IL-6能诱导 HepG2细胞产生 EMT 现象。②60Co 处理的转 hGM-CSF 基因 HepG2疫苗可能通过下调转录因子 Twist及 Stat3的表达进而逆转 IL-6诱导 HepG2细胞 EMT。
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前列腺癌叉头转录因子O4的表达与临床病理关系及其对前列腺癌细胞侵袭的影响
目的:探讨叉头转录因子O4(forkhead transcription factor O4,FOXO4)在前列腺癌组织中的表达与临床病理的关系及其对前列腺癌细胞侵袭的影响.方法:利用免疫组织化学检测前列腺增生组织及不同临床病理参数的前列腺癌组织FOXO4的表达;Western印迹检测前列腺增生细胞株BPH-1及前列腺癌细胞株PC-3和DU145中FOXO4的表达.对FOXO4表达相对较高的PC-3细胞进行FOXO4siRNA和杂乱序列siRNA(Scramble siRNA)转染,对FOXO4低表达的DU145细胞进行FOXO4质粒、空白载体转染.利用细胞迁移侵袭试验检测转染后癌细胞的侵袭能力;Western印迹检测转染后癌细胞上皮-间质转化(endothlial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达.结果:FOXO4在前列腺癌组织及前列腺癌细胞中的表达水平显著低于正常前列腺增生组织及前列腺增生细胞(均P＜0.05);前列腺癌特异性抗原(prostate cancer specific antigen,PSA)值＜4的前列腺癌组织FOXO4的表达显著高于4≤PSA≤10及PSA＞ 10的癌组织,差异均有统计学意义(均P＜0.05);前列腺癌病理分级Gleason评分＜8的癌组织FOXO4表达水平明显高于Gleason≥8的癌组织,差异有统计学意义(P＜0.05);临床T分期为T1～T2的前列腺癌组织FOXO4表达高于临床T分期为T3-T4的癌组织,差异有统计学意义(P＜0.05);无淋巴结转移的前列腺癌组织FOXO4表达明显高于有淋巴结转移的前列腺癌组织,差异有统计学意义(P＜0.05).下调PC-3细胞FOXO4表达水平可显著促进该癌细胞的EMT和E-cadherin表达水平下调,N-cadherin和vimentin表达水平增加,且促进癌细胞侵袭(均P＜0.05);上调DU145细胞FOXO4表达水平会抑制该癌细胞的EMT和E-cadherin表达水平上调,N-cadherin和vimentin表达水平下调,且抑制细胞侵袭(均P＜0.05).结论:FOXO4与前列腺癌进展有关,并能通过调节前列腺癌细胞EMT而抑制前列腺癌细胞的侵袭.
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熊果酸拮抗巨噬细胞促进肝癌细胞迁移和侵袭的作用及其机制
目的:研究熊果酸对巨噬细胞-肝癌细胞共培养体中肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其作用机制.方法:采用Transwell迁移和侵袭试验检测熊果酸处理与非处理的巨噬细胞-肝癌细胞共培养体中肝癌细胞的迁移和侵袭能力的变化;Western印迹法检测共培养体中肝癌细胞上皮-间质转化蛋白E-cadherin,N-cadherin和vimentin的表达情况.结果:共培养后的肝癌细胞的迁移和侵袭能力显著增强,并发生了上皮-间质样表型转变,上皮-间质转化的标志蛋白E-cadherin的表达下调,而N-cadherin和vimentin的表达均上调;熊果酸处理的巨噬细胞-肝癌细胞共培养体中,肝癌细胞的迁移和侵袭能力降低,E-cadherin表达上调,N-cadherin和vimentin的表达下调.结论:熊果酸能够显著抑制共培养体中肝癌细胞的迁移和侵袭能力及上皮-间质转化能力.
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BEZ235对体外前列腺癌细胞的抑制作用
目的:探讨PI3K/mTOR双重靶向抑制剂BEZ235对人前列腺癌细胞株的增殖、迁移能力的影响.方法:采用MTT实验分析BEZ235对正常前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌细胞PC3及DU145增殖能力的影响;划痕试验检测BEZ235对RWPE-1,PC3及DU145细胞迁移的影响;Western印迹及免疫荧光染色方法检测BEZ235对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物蛋白表达的影响.结果:BEZ235对PC3和DU145细胞的增殖具有明显的抑制作用(P<0.01),而对RWPE-1作用不明显;BEZ235明显上调PC3和DU145细胞标志物E-cadherin的表达,下调间质标志物Vimentin的表达(P<0.01).结论:BEZ235可体外抑制PC3和DU145细胞增殖和迁移,其部分机制可能是通过抑制EMT途径而实现.
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同时稳定抑制X连锁凋亡抑制蛋白和生存素表达对胰腺癌细胞上皮-间质转化及侵袭性的影响
目的:探讨同时抑制X连锁凋亡抑制蛋白(XMP)和生存素(survivin)后,对胰腺癌Panc-1细胞上皮-间质转化(EMT)及侵袭性的影响,并初步探讨其机制.方法:在前期实验构建的胰腺癌Panc-1-XS细胞(XIAP和survivin同时稳定抑制)中,运用Transwell小室实验及划痕实验分别检测细胞侵袭和迁移能力；半定量Western印迹分别检测钙黏蛋白-E (E-cadherin,上皮标志物)、锌指转录因子(Slug)蛋白(间质标志物)及第10号染色体同源丢失性磷酸酶——张力蛋白基因(PTEN)和磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)蛋白的表达情况.结果:Panc-1-XS细胞侵袭和迁移能力显著下降,同时伴随E-cadherin蛋白表达显著上调及Slug蛋白显著下调,即出现间质-上皮转化(MET); PTEN 蛋白表达上调、P-Akt蛋白表达下调.结论:同时抑制XIAP和survivin表达,能部分逆转胰腺癌Panc-1细胞EMT表型,显著减弱其侵袭和迁移能力；此调控过程可能通过PTEN/PI3K/Akt途径实现.
关键词： 胰腺癌 凋亡抑制蛋白 上皮-间质转化 侵袭性 PTEN/PI3K/AKT -
FGF8b调控前列腺癌细胞上皮间质转化的分子机制
目的:探讨成纤维细胞生长因子8b (fibroblast growth factor 8b,FGF8b)促进前列腺癌DU145细胞上皮间质转化的分子机制.方法:先选取3组细胞,分别为空白对照组(DU145细胞)、阴性对照组[(DU145细胞转染空白质粒(简称pcDNA3.1/DU145)]和实验组[DU 145细胞转染FGF8b(简称FGF8b/DU 145)].采用Western印迹检测细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)通路活性,然后将FGF8b/DU145细胞及DU145细胞在PD98059 (ERK激酶抑制剂)作用下分为4组:A组为2％胎牛血清(FBS)处理的FGF8b/DU145细胞；B组为2％FBS+PD98059 (50 μmol/L)处理的FGF8b/DU145细胞；C组为2％FBS处理的DU145细胞；D组为2％ FBS+PD98059 (50μmol/L)处理的DU145细胞,培养观察细胞形态学的变化,后Western印迹和Transwell小室检测各组细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标志物的变化以及细胞的迁移能力改变.结果:实验组ERK1/2活性明显高于空白对照组和阴性对照组.给予PD98059后,B组与未给予PD98059组的A组相比,上皮细胞标志物上皮钙黏素蛋白表达量明显上调(P＜0.05)；间质标志物波形蛋白表达量明显下调(P＜0.05).细胞迁移试验结果提示:在给予PD98059后,B组FGF8b/DU145细胞的迁移能力与A组相比明显减弱.结论:FGF8b调控前列腺癌细胞DU145发生上皮-间质转化,可能由ERK激酶通路介导,MAPK激酶1作为该信号通路的关键因子之一,可能是干预前列腺侵袭转移的有效靶点.
关键词： 前列腺癌 成纤维细胞生长因子-8 上皮-间质转化 侵袭转移 -
S100A4真核表达载体构建及对鼻咽癌细胞侵袭转移的影响
目的：构建S100A4稳定高表达的鼻咽癌细胞株，研究S100A4与鼻咽癌侵袭转移关系。方法 PCR方法扩增S100A4片段，将产物插入pCMV载体，将重组质粒及其空白质粒分别转染到鼻咽癌细胞CNE2；MTT法绘制细胞生长曲线，Western blot检测S100A4、E- cadherin、Fibronectin、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶9（MMP9）的表达；Transwell实验检测细胞侵袭转移能力变化。结果成功构建了S100A4稳定高表达的重组细胞株；细胞生长曲线表明S100A4稳定高表达的重组细胞株生长较快；S100A4稳定高表达的重组细胞株中E- cadherin、Fibronectin低表达而MMP2、MMP9高表达；Transwell实验发现S100A4稳定高表达的重组细胞株的侵袭细胞计数明显高于空白载体转染组和未转染组（>0.01）。结论 S100A4能调控鼻咽癌上皮-间质转化（EMT）过程，并上调MMP2、MMP9表达而促进鼻咽癌细胞侵袭和转移。
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HIF-1α与Snail、E-cadherin对结直肠癌SW480细胞侵袭增殖的影响
目的 研究基因沉默缺氧诱导因子-1 α(HIF-1 α)和不同缺氧条件下HIF-1α、锌指转录因子(Snail)及上皮钙黏蛋白(E-cadherin)在SW480细胞中的表达,及其对生长增殖和侵袭迁移力的影响.方法 构建SW480细胞缺氧模型,设计合成HIF-1α的小干扰RNA并将其转染入细胞内于无氧环境培养.采用MTT法检测生长增殖活性,Transwell法检测体外侵袭迁移能力,RT-PCR检测HIF-1 α、Snail及E-cadherin mR-NA的表达.结果 MTT显示无氧组和阴性对照组生长增殖活性增加,基因干扰组降低(P＜0.05)；体外侵袭实验显示无氧组、阴性对照组侵袭迁移率增加,基因干扰组降低(P＜0.05)；RT-PCR检测显示无氧组、阴性对照组HIF-1 α和Snail mRNA表达升高,E-cadherin降低,基因干扰组HIF-1 α和Snail表达降低,E-cadherin升高(P＜0.05),且相关分析显示HIF-1 α与Snail呈正相关,HIF-1α与E-cadherin呈负相关.结论 缺氧及HIF-1 α可促进SW480细胞株的体外生长增殖活性,增强其体外侵袭迁移能力,基因沉默HIF-1 α可抑制其体外生长增殖与侵袭迁移.
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IL-33参与促进A549细胞上皮-间质转化及作用机制
目的 探讨在上皮来源的A549细胞上皮-间质转化进程中,IL-33/ST2L信号传导系统的作用及其机制.方法 培养A549细胞,RT-PCR检测受体ST2L mRNA;不同浓度白细胞介素-33(IL-33)刺激细胞,在不同时间点以MTT方法检测IL-33对A549细胞增殖的影响;以Real-time PCR法检测不同时间点A549细胞标志性基因E-cad mRNA、α-SMA mRNA以及Vimentin mRNA等的变化和IL-33/ST2L信号通路中关键因子TRAF-6 mRNA的表达改变;Westem blot法检测细胞标志性蛋白E-cad、collagenI、Vimentin 以及TRAF-6的改变.结果 IL-33对A549细胞的增殖没有影响;不同浓度(5、10及50 ng/mL)IL-33刺激A549细胞24 h,E-cad的表达随浓度的升高逐渐下降、α-SMA的表达随浓度的升高逐渐上调,选择10 ng/mLIL-33作为A549细胞的刺激浓度;随着IL-33刺激时间的逐渐延长,E-cad的表达先降低后升高,α-SMA、Vimentin、collagenI以及TRAF-6的表达呈现先升高后降低的趋势.结论 IL-33/ST2L信号通路的激活能促进A549细胞间质变,尤其是在早期炎症反应阶段作用为明显.
关键词： IL-33/ST2L信号通路 A549细胞 增殖 上皮-间质转化
