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生长分化因子-9与超排卵周期卵巢低反应的相关性研究
目的:研究超排卵周期卵巢低反应与颗粒细胞中生长分化因子(GDF)-9表达的相关性.方法:选取行体外受精一胚胎移植(IVF-ET)的患者70例,采用本中心常规方案进行超排卵,依据取卵时获得平均直径>14mm的卵泡数分为卵巢低反应组21例,中反应组25例,高反应组24例.应用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PeR)技术检测卵巢不同反应组患者卵泡壁颗粒细胞和卵丘颗粒细胞GDF-9 mRNA的表达,分析其与卵巢低反应的关系.结果:卵巢不同反应组患者年龄、不孕年限、基础卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)水平及促性腺激素(Gn)用量差异均无统计学意义(P>0.05).卵巢低反应组卵泡壁颗粒细胞和卵丘颗粒细胞的GDF-9 mRNA表达均低于中反应组和高反应组(P<0.05),GDF-9在卵泡壁颗粒细胞和卵丘颗粒细胞中的表达与获卵数呈正相关(r分别为0.508、0.632,均P<0.01).结论:超排卵周期卵巢低反应与颗粒细胞GDF-9表达有关.
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补肾调经膏方对肾虚型卵巢早衰患者性激素、GDF-9及BMP-15水平的影响
目的 观察补肾调经膏方对肾虚型卵巢早衰患者性激素、生长分化因子-9(GDF-9)及骨形态发生蛋白-15(BMP-15)水平的影响.方法 将110例肾虚型卵巢早衰患者随机分为2组,对照组55例给予激素替代疗法治疗,观察组55例在此基础上加用补肾调经膏方治疗,观察2组治疗前后主要证候积分、Kupperman评分及血清雌二醇(E2)、促卵泡生长激素(FSH)、黄体生成素(LH)、GDF-9及BMP-15水平变化情况,统计2组近期疗效,随访2组6个月复发情况.结果 治疗后2组主要证候积分、Kupperman评分及血清FSH、LH水平均显著降低(P均<0.05),E2、GDF-9及BMP-15水平均显著提高(P均<0.05),且观察组治疗后以上指标改善情况均显著优于对照组(P均<0.05);观察组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05),随访6个月复发率显著低于对照组(P<0.05).结论 补肾调经膏方治疗肾虚型卵巢早衰可有效减轻相关症状体征,改善生殖轴状态,上调GDF-9和BMP-15水平,且有助于降低远期复发风险.
关键词： 补肾调经膏方 卵巢早衰 性激素 生长分化因子-9 骨形态发生蛋白-15 -
补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠始基卵泡募集因子GDF-9、AMH表达的影响
目的:研究补肾调冲方对半乳糖致POF大鼠卵巢功能的调节,探讨补肾调冲方通过调控卵巢始基卵泡募集因子GDF-9及AMH调节卵巢功能及治疗POF的机制.方法:建立半乳糖致POF大鼠模型,将造模成功的POF大鼠随机分为模型组与治疗组,每组各20只,另设正常对照组.于PND80开始,治疗组大鼠每日灌服补肾调冲方水溶液,模型组及空白组大鼠每日灌服等体积生理盐水,共4周.实验结束后光镜下计数各组大鼠卵巢内各级卵泡数目,ELISA法检测各组大鼠血清FSH、LH及E2水平,Real-time PCR法检测各组大鼠卵巢内GDF-9及AMH mRNA表达水平.结果:①补肾调冲方可使POF大鼠动情周期趋于正常,并能明显降低血清FSH、LH水平(P＜0.05),提高E2水平(P＜0.05),从而改善POF大鼠血清高促性腺激素低雌激素状态;组织形态学检测结果显示治疗组大鼠卵巢体积较POF模型组增大,各级卵泡生长较好,颗粒细胞层次多,黄体数目明显增多;始基卵泡、窦前卵泡及窦状卵泡数目均较模型组增多,闭锁卵泡数目则明显减少.②与正常组比较,POF大鼠卵巢GDF-9及AMH mRNA水平均明显降低(P＜0.01),而治疗组大鼠卵巢GDF-9及AMH mRNA水平较模型组明显升高(P＜0.05或P＜0.01).结论:补肾调冲方治疗POF的作用机制之一可能是通过上调卵巢局部始基卵泡募集因子GDF-9及AMH的表达,促进卵泡的生长发育,抑制卵泡的过度耗竭与闭锁,恢复始基卵泡的正常募集状态,从而抑制卵巢功能的过早衰竭.
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生长分化因子-9和骨形成蛋白-15与控制性超排卵周期卵巢反应的相关性研究
目的 探讨人卵巢颗粒细胞生长分化因子-9 (GDF-9)、骨形成蛋白-15 (BMP-15)的表达与控制性超排卵(COH)过程中卵巢反应的关系.方法 对147例因输卵管性不孕或男性不育接受IVF/ICSI治疗的患者,采用GnRH-a黄体期长方案COH,收集患者卵巢颗粒细胞,用Real-time PCR法检测颗粒细胞GDF-9、BMP-15 mRNA表达,分析与卵巢反应性的关系.结果 卵巢颗粒细胞GDF-9 mRNA表达值高反应组＞正常反应组＞低反应组;BMP-15 mRNA表达值低反应组高于高反应和正常反应组;获卵数与GDF-9 mRNA表达值呈正相关(r=0.662),与BMP-15 mRNA表达值呈负相关(r =-0.218);Logistic回归分析显示,年龄、AFC和GDF-9mRNA表达值,是卵巢高反应的主要影响因素(OR=2.57,0.11,0.39).结论 卵巢颗粒细胞的GDF-9、BMP-15表达,可能与COH卵巢反应性相关.
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GDF-9及其受体在PCOS大鼠卵巢中的表达
目的:探讨生长分化因子-9(GDF-9)蛋白及其受体BMPR-ⅡmRNA在PCOS大鼠卵巢的表达.方法:皮下注射DHEA建立PCOS模型,用免疫组化法检测卵巢GDF-9表达;用RT-PCR法检测BMPR-ⅡmRNA的表达.结果:GDF-9主要于PCOS发育正常的初级、窦前、窦状卵泡卵母细胞胞浆中表达,表达强度与对照组的差异无统计学意义(P>0.05).BMPR-Ⅱ mRNA相对含量则显著高于对照组(P<0.05).结论:GDF-9是促进PCOS卵泡发育的主要原因;受体表达上调是诱导雄激素增高的原因之一.
关键词： 多囊卵巢综合征 生长分化因子-9 骨形态发生蛋白受体-Ⅱ 受体 -
雄激素对卵母细胞生长分化因子-9表达的影响
目的:通过观察雄激素对小鼠卵母细胞生长分化因子-9(growth differentiation factor-9,GDF-9)表达的影响,研究GDF-9参与卵泡生长发育及其表达调控机制,探讨GDF-9与多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的关系.方法:以性成熟昆明小鼠为研究模型,体内实验分为实验组(注射丙酸睾丸酮)和对照组(注射等体积的生理盐水),每组各20只小鼠,采用原位杂交法检测卵巢组织GDF-9 mRNA的表达水平.体外实验:胶原酶消化加机械法分离性成熟昆明小鼠卵泡进行体外培养,实验组培养液中加睾丸酮,对照组不加睾丸酮,72 h后收集卵泡,免疫组化检测卵母细胞GDF-9的表达水平.结果:体内实验:实验组较对照组卵巢组织GDF-9 mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05);体外实验:实验组卵母细胞GDF-9蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:雄激素减弱卵母细胞GDF-9 mRNA和蛋白的表达强度;表达强度降低的GDF-9可能与PCOS卵泡发育停滞有关.
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生长分化因子-9在人膀胱癌组织中的表达及其临床意义
目的:探讨生长分化因子9(growth differentiation factor-9,GDF-9)在人膀胱癌组织中的表达及其与膀胱癌病理分级和临床分期的关系.方法:运用免疫组化技术检测GDF-9在50例不同分期分级的膀胱癌组织和15例正常膀胱组织之间的蛋白表达情况.结果:①正常人膀胱组织中GDF-9呈高表达,且GDF-9蛋白主要定位于膀胱移行上皮细胞的胞浆中.而膀胱癌组织中GDF-9呈低表达或不表达.②GDF-9阳性表达率在膀胱癌病理分级间分别:Ⅰ级47.6％(10/21),Ⅱ级26.7％(4/15),Ⅲ级7.1％ (1/14),差异具有统计学意义(P＜0.05).GDF 9阳性表达率在膀胱癌临床分期间分别:Ta～T1期40.6％(13/32),T2～T3期11.1％(2/18),差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:GDF-9在膀胱癌组织中低表达或不表达,且与膀胱癌病理分级和临床分期呈负相关.GDF-9可能是一个潜在的人膀胱肿瘤抑癌基因.
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重复促排卵对小鼠卵母细胞发育潜能的影响
目的 研究重复促排卵治疗对成熟卵母细胞的发育潜能的影响,其与卵母细胞生长分化因子-9(GDF-9)表达是否存在关联.方法 实验组昆明小鼠接受孕马血清和人绒毛膜促性腺激素重复3次促排卵,对照组接受3次生理盐水注射,其后两组同时接受促排卵得到成熟卵世细胞并分别进行GDF-9免疫组化染色和体外受精胚胎培养,比较两组卵母细胞GDF-9表达量和受精后卵裂率、囊胚形成率.结果 实验组得到成熟卵母细胞253个,平均每只鼠11.5个;对照组共得到521个,平均每只鼠32.6个(p<0.05);实验组GDF-9染色平均光度(0.60±1.32)×104,积分光度(2.54×2.10)×104;对照组平均光度(4.81±2.65)×104,积分光度(10.20±2.33)×104(P<0.05,P<0.01);实验组成熟卵母细胞受精后卵裂率85.6%,对照组卵裂率88.8%,无统计学差异;实验组囊胚形成率20.8%,明显低于对照组囊胚形成率35.2%(P<0.01).结论 昆明小鼠经重复促排卵后排卵数目减少,GDF-9表达下降,囊胚形成率下降,重复促排卵影响卵母细胞的发育潜能,可能与GDF-9表达改变有关.
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生长分化因子-9在大鼠卵巢中的表达
目的:探讨生长分化因子-9(GDF-9)在大鼠卵巢中的表达部位.方法:选择不同发育时期的大鼠卵巢,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠卵泡各发育阶段GDF-9蛋白表达情况及分布规律.结果:免疫组化方法显示,出生0～2 d卵巢中未见GDF-9表达,出生3 d卵巢中见部分原始卵泡卵母细胞GDF-9表达阳性,以后从初级卵泡到发育成熟的卵泡卵母细胞均明显可见GDF-9蛋白表达.Western blot技术进一步提示,出生0～2 d卵巢中无GDF-9蛋白形成,第3 d开始有GDF-9蛋白产生,以后在卵巢发育的各时期均有GDF-9蛋白分泌.结论:GDF-9在卵巢发育的早期即开始产生,以后在各阶段卵巢中持续表达,提示卵母细胞通过产生GDF-9等因子对卵泡的发育进行调节.
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高脂喂养下大鼠卵巢颗粒细胞的功能变化
目的:分析高脂血症与卵巢颗粒细胞的影响,了解对卵巢激素合成功能的改变.方法:高脂喂养大鼠至性成熟期,测定卵巢组织内颗粒细胞的形态改变,免疫组化和Western blot测定性激素受体和生长分化因子9(growth differentiation factor-9,GDF-9)的蛋白水平改变.结果:高脂喂养后,颗粒细胞的出现病理性改变,其雌孕雄激素受体含量减少,GDF-9在卵巢组织内表达减弱,说明高脂喂养后卵巢颗粒细胞功能的减弱.结论:高脂喂养后,颗粒细胞结构出现损伤性改变,激素合成功能下降,与高脂血症下排卵减弱的临床症状相符合,提示高脂血症影响卵巢排卵功能的不良作用可通过损伤颗粒细胞来实现.
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GDF-9和BMP-15在PCOS患者卵母细胞和卵冠丘细胞的表达研究
目的:探讨卵源性因子生长分化因子-9(GDF-9)和骨形态发生蛋白-15(BMP-15)在行体外受精-胚胎移植PCOS患者卵母细胞和卵冠丘颗粒细胞(cumulus granulosa cell,CGC)中的表达情况.方法:按1∶4比例收集因男方因素行ICSI后废弃的PCOS患者和对照组患者未成熟生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞或第一次减数分裂中期Ⅰ(metaphase Ⅰ,MⅠ)期卵母细胞.运用免疫荧光结合激光扫描共聚焦显微镜(LCSM)对GV期卵母细胞GDF-9蛋白的表达进行检测,对MI期卵母细胞进行BMP-15蛋白表达的检测;应用免疫细胞化学方法检测两种因子在MⅡ期CGC的表达.结果:GDF-9和BMP-15在PCOS患者和对照组患者卵母细胞的表达差异无显著.GDF-9在PCOS患者CGC的表达强度为5.01±0.83,显著低于对照组患者的8.88±1.52,P＜0.05.BMP-15在PCOS患者CGC的表达与照组患者比较差异无显著.结论:PCOS患者促排卵治疗后卵母细胞GDF-9和BMP-15表达无差异,而CGC GDF-9表达低提示促排卵治疗改善了PCOS卵泡的生长,但可能导致过早黄素化.
关键词： 生长分化因子-9 骨形态发生蛋白-15 多囊卵巢综合征 卵泡发育
