分子诊断技术在弓形虫检测和基因分析中的研究进展

弓形虫是一种专性细胞内寄生的寄生虫,人感染后多呈隐性感染,临床表现缺乏特异性,检测及诊断较为困难.分子诊断是应用分子生物学方法,检测患者体内遗传物质结构或表达水平的变化,继而做出诊断的技术,它为疾病的预防、诊断、治疗和转归提供更为准确的信息.目前,分子诊断技术主要有核酸探针技术、PCR及其衍生技术、环介导等温扩增技术、基因芯片技术等.该文对分子诊断技术在弓形虫中的应用进行综述.

弓形虫病免疫学诊断研究进展

弓形虫病是严重危害人类健康的人兽共患病,临床表现缺乏特异性,且弓形虫病原学检出率低.免疫学检测具有敏感、特异、快速、简便等特点,已成为辅助诊断弓形虫病的常用方法.该文综述了弓形虫病免疫学诊断方法的研究进展.

刚地弓形虫分子诊断的研究进展

刚地弓形虫感染是一种在世界范围内流行的寄生虫病,严重危害人体健康,给全世界的畜牧业带来巨大的经济损失.传统的弓形虫病原学诊断方法较为费时且不稳定,以核酸扩增为基础的分子生物学技术省时省力,为弓形虫病的诊断提供了重要依据.

弓形虫病免疫学研究现状

弓形虫病是由弓形虫引起的一种危害严重的全球性人兽共患病.本文就宿主感染弓形虫后的免疫效应及弓形虫病免疫诊断、免疫预防进行综述,为该病有效防治提供参考.

云南省昆明市临床疑似弓形虫病患者血清流行病学分析

目的 对云南省昆明市疑似弓形虫病患者进行血清流行病学分析. 方法 应用ELISA法对2008-2012年在云南省疾病预防控制中心进行排查的昆明市3 782例弓形虫病疑似患者进行弓形虫IgG抗体检测,并收集相关的人口学特征、流行病学史和临床症状等信息. 结果 3 782例疑似弓形虫病患者中,弓形虫IgG抗体阳性率为13.38％.男性患者阳性率为14.16％、女性患者阳性率为12.33％,不同性别阳性率差异无统计学意义(x2=2.67,P＞0.05);不同年龄组阳性率差异有统计学意义(x2=46.57,P＜0.01);不同民族阳性率差异有统计学意义(=11.11,P＜0.05).癫痫、头痛和发热等3种弓形虫病常见症状是弓形虫病的非特异性症状.有宠物接触史患者的阳性率(14.67％)高于无宠物接触史患者的阳性率(12.23％),差异有统计学意义(x2=6.41,P＜0.05);有食生肉史患者的阳性率(18.73％)高于无食生肉史患者的阳性率(12.35％),差异有统计学意义(x2=16.05,P＜0.01). 结论 患者感染弓形虫的原因与其生活饮食习惯和居住环境相关,需要改善人群的卫生和饮食习惯,减少弓形虫感染的机会.

419名大学生弓形虫感染的调查

目的 了解高校新生弓形虫的感染情况,为进一步采取干预措施提供依据.方法 获取宜春学院2010级419名新生知情同意后,每人空腹抽取静脉血2 ml,采用ELISA法检测血清弓形虫IgG抗体.结果 新生弓形虫抗体阳性率为4.30％,其中男生4.17％,女生4.38％,差异无统计学意义(x2=0.01,P＞0.05)；家住城镇和农村的新生弓形虫抗体阳性率分别为4.50％和3.57％,差异亦无统计学意义(x2=0.02,P＞0.05).结论 宜春学院医学院新生中存在弓形虫感染,表明人群对弓形虫普遍易感.

弓形虫感染妊娠中期BALB/c小鼠对胎鼠生长发育及胎盘系数的影响

目的 探讨弓形虫感染妊娠中期BALB/c小鼠对胎鼠生长发育以及胎盘系数的影响.方法在妊娠第8天采用腹腔注射法建立弓形虫感染的动物模型,于妊娠第12、14、16、18天分批处死孕鼠,分离胎盘胎鼠,解剖显微镜下观察胎鼠存活情况,电子天平称量胎盘和胎鼠重量,游标卡尺测量胎鼠体长和尾长. 结果 随着妊娠天数的增加,实验组孕鼠吸收胎明显增多,出现死胎和流产,正常对照组未见异常;正常对照组胎鼠重量、体长和尾长增加明显(胎鼠重量:40.69±11.63,173.43±30.19,495.56±73.97,967.62±83.34:体长:11.53±0.95,16.83±1.15,20.86±1.25;尾长:5.26±0.56,8.08±0.98,10.54±0.58),胎盘重量呈现先增后减趋势(48.62±11.87,87.14±14.05,94.44±12.29,93.33±13.00),胎盘系数呈降低趋势(1.30±0.52,0.51±0.09,0.20±0.05,0.10±0.02),实验组变化趋势不及正常对照组的明显(胎鼠重量:51.11±13.89,148.16 ±36.09,296.11±58.63;体长:11.51±1.42,14.04±1.59;尾长:4.04±0.95,6.87±0.87;胎盘重量:49.31±9.42,66.41±13.28,52.22±12.15;胎盘系数:1.03±0.32,0.48±0.15,0.18±0.05),组内比较差异均有统计学意义(P<0.05);相同时间点的比较显示除第12天组的胎盘胎鼠重量、第14和16天的胎盘系数,还有第14天的胎鼠体长外,其他数据实验组均低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 弓形虫感染妊娠中期BALB/c小鼠可导致胎盘功能障碍,胎鼠生长发育受限,且随着感染天数的增加,可出现死胎和流产等病理性妊娠.

弓形虫病基因诊断的研究进展

应用基因诊断技术对弓形虫病进行临床实验诊断,是近年来弓形虫病诊断的一个十分重要的研究领域.本文就基因诊断技术在弓形虫病诊断中所用的核酸分子杂交技术、PCR、基因芯片及其在各种类型弓形虫病的应用作一综述.

PCR技术诊断弓形虫病的研究进展

应用PCR技术对弓形虫病进行定性和定量研究是近年来弓形虫病诊断的一个重要研究领域.本文就PCR技术在弓形虫病诊断中所用的引物、PCR类型以及在各种类型弓形虫病的应用研究作一概述.

阿联酋主要地区儿童刚地弓形虫病流行情况的血清学调查

弓形虫感染间接免疫荧光检测试剂盒的检测效果评价

目的 研制检测弓形虫IgG抗体的间接免疫荧光(IFA)检测试剂盒. 方法 在成功建立弓形虫感染IFA检测方法的基础上,构建人弓形虫感染IFA检测试剂盒.对弓形虫阳性血清、羊抗人FITC-IgG的佳稀释浓度进行优化.对试剂盒的敏感性、特异性、稳定性和保存期等进行评价,并与国外同类试剂盒比较. 结果 弓形虫阳性血清、羊抗人FITC-IgG的佳稀释浓度分别为1∶40和1∶100.该试剂盒可检测到弓形虫阳性血清的大稀释倍数为1∶640,与恶性疟、间日疟、血吸虫病、棘球蚴病和囊尾蚴病患者血清均无交叉反应,但与类风湿因子阳性患者血清有交叉反应.该试剂盒的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、符合率和Youden指数分别为90.9％、100％、100％、96.2％和97.2％和0.91,而国外同类试剂盒分别为100％、98％、95.7％、100％和98.6％和0.98,两种试剂盒的敏感性和特异性间差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 该试剂盒检测弓形虫IgG抗体敏感性和特异性较高.

PCR技术监测大蒜素及其与复方磺胺甲基异噁唑伍用治疗小鼠弓形虫病的研究

目的用聚合酶链反应(PCR)评价大蒜素及其与复方磺胺甲基异噁唑(SMZco)伍用治疗小鼠弓形虫病的疗效.方法昆明系小鼠147只,以2×104RH株弓形虫速殖子感染后随机分成5组,每组35只.A组和B组为大蒜素与SMZco联合用药组:其中A组两药用至7 d后停用SMZco,大蒜素继续用至21 d;B组两药用至14d后停用SMZ-co,大蒜素继续用至21 d;C组为大蒜素单药组连续用药21 d;D组为SMZco单药组连续用药7 d;E组7只小鼠为未用药对照组.剂量:SMZco 400 mg/kg每天1次,大蒜素35 mg/kg每天1次.于感染后5、10、15、20、25、30、40和50 d从各组随机取3只小鼠,眼眶取血以及取肝实质组织分别提取DNA,PCR检测各组疗效.从各治疗组随机取9只小鼠观察其治疗后存活情况.结果实验小鼠感染后5 d血样,除大蒜素组有特异性194 bp带,其余各组均未见扩增带.感染后10 d到观察结束,均未见特异性扩增带.感染后5 d到50 d,所有肝组织标本均有特异带,感染后5 d扩增带较亮,治疗结束后到观察终止,扩增带较弱.分析结果表明,小鼠存活率,联合用药的A组为77.8%,B组为88.9%;C组小鼠在急性期即很快死亡;D组为44.4%.结论大蒜素与SMZco联合应用治疗弓形虫病具有协同作用,大蒜素单药治疗作用不明显,PCR技术可用于监测疗效及检测弓形虫隐性感染状态.

免疫缺陷性疾病患者弓形虫抗体的调查

[目的]调查免疫缺陷性疾病患者弓形虫IgG抗体的阳性率.[方法]以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测临床多种免疫缺陷性疾病,包括实体性恶性肿瘤(消化系统恶性肿瘤未化疗组、实体性恶性肿瘤未化疗组及实体性恶性肿瘤化疗组)、慢性肝病、接受免疫抑制剂者(皮肌炎、银屑病、天疱疮、肾移植术后、系统性红斑狼疮及其它使用免疫抑制剂者)及血液系统恶性肿瘤(淋巴瘤及白血病)患者血清标本共371份,同时以100例健康人血清为对照.[结果与结论]实体性恶性肿瘤接受化疗者、接受肾移植者、慢性肝病、系统性红斑狼疮及白血病患者抗弓形虫IgG抗体阳性率分别为19.0%、33.3%、16.5%、45.5%及20.0%,与对照组相比较,其差异均具有显著性意义(P＜0.05).以上疾病的患者有继发弓形虫病的高度危险.

上海市徐汇区公共卫生从业人员弓形虫感染的血清学调查分析

随机抽取2010年12月～2011年3月上海市徐汇区公共卫生从业人员448名,采集静脉血,ELISA法检测血清弓形虫特异性IgG抗体,抽检的448名公共卫生从业人员中,弓形虫IgG阳性率为10.3％ (46/448).不同来源地(上海、安徽、江苏、河南和四川等)和性别人员之间感染率差异均无统计学意义(P＞0.05).≥30年龄组阳性率(14.9％,29/195)明显高于＜30年龄组阳性率(6.7％,17/253) (P＜0.05),30～～39岁年龄组高,为15.8％ (16/101).食品生产加工行业从业人员阳性率(12.6％,36/286)显著高于非食品生产加工行业从业人员阳性率(6.2％,10/162)(P＜0.05).

先天感染弓形虫胎儿、儿童发育及干预研究

孕期活动性弓形虫感染,可导致流产、早产、死胎、畸形等异常妊娠结局,以及胎儿、儿童身体及智力发育障碍.本研究对保定市1990年2月-1996年2月孕妇感染弓形虫后妊娠结局、子代生长发育情况及乙胺嘧啶干预效果进行了追踪观察.

弓形虫感染免疫学研究近况

弓形虫病是一种广泛寄生于多种哺乳动物的人兽共患疾病。成人感染弓形虫，绝大多数为隐性感染，婴幼儿、孕妇和免疫抑制者感染后，则可能导致流产、畸胎和急性获得性弓形虫病，死亡率甚高，危害严重。尤其是近年来艾滋病(AIDS)患者不断增多，其中10％～30％并发弓形虫脑炎，严重的弓形虫机会致病性感染为艾滋病患者死亡的主要原因之一。弓形虫感染后的免疫机制及免疫预防方面的研究日益受到重视，本文就近期的研究作一综述。

弓形虫病误诊2例

病例1 患者,女,23岁,黑龙江省哈尔滨市人.于2010年12月5日因“发热(自测38.2℃),进行性头痛,乏力3d”就诊于黑龙江省医院,以“发热待查”收入住院.查体:体温38.1℃,血压100/75 mm Hg;全身皮肤无皮疹,瘀点和瘀斑;腹部平软,无压痛及反跳痛;双侧腹股沟淋巴结肿大、活动良好、压痛不明显;心肺未见异常;生理反射正常,有颈项强硬,布氏征阳性.血常规:白细胞8.1×109/L,中性粒细胞80.4％,嗜酸性粒细胞6.4％,淋巴细胞12.4％,红细胞2.45×1012/L,血红蛋白102g/L.头颅CT示脑积水及脑室扩大.

不常见的弓形虫病一例

获得性弓形虫病多发生于免疫缺陷者,儿童均为先天性弓形虫感染.本院于2000年7月收治了1例以间断高热、肝脾进行性肿大为主要临床表现的儿童单纯弓形虫病患者.现报告如下.

河南省新乡市郊区猪羊弓形虫病流行病学调查

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)可感染人、猫、猪、牛、羊、犬、小鼠、兔、鸟类及冷血动物 [1,2] .近年来我国养猪业也受到影响.

DIGFA和SPA-ELISA检测弓形虫特异性抗体

弓形虫病的临床表现常因侵犯脏器的不同而异,几乎涉及内、外、妇、儿、眼、耳鼻喉、神经精神、传染病、肿瘤等各个学科[1].