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高效液相色谱-电化学法测定大鼠脑微透析液中多巴胺的方法建立及应用
目的:建立高效液相色谱-电化学(HPLC-ECD)法测定大鼠脑脊液中多巴胺的含量.方法:高效液相色谱采用Waters Atlantis T3色谱柱,以乙腈-缓冲液(75 mmol·L-1三水合醋酸钠,24 mmol · L-1无水柠檬酸溶液,1.2 mmol·L-1十二烷基硫酸钠溶液,0.5 mmol·L-1 EDTA-2Na溶液)(20:80)为流动相,流动相pH5.4,流速0.32 mL·min-1.考察本方法的专属性、线性范围、精密度和回收率.进一步比较第一代(氟哌啶醇)及第二代(利培酮)抗精神病药对大鼠前额叶皮层(mPFC)和伏隔核(NAC)中多巴胺释放的影响.结果:多巴胺的保留时间为6.6 min,线性范围是0.2~20 nmol·L-1(r=0.9998),日内与日间精密度均<7.3%,回收率在101.4 ~ 106.2%之间.给予氟哌啶醇后,mPFC中多巴胺含量基本无变化,NAC中多巴胺显著升高;给予利培酮后,mPFC和NAC中多巴胺均显著升高.结论:该方法准确、灵敏、稳定,适用于脑微透析样品中多巴胺的定量分析.第二代抗精神病药物(利培酮)可能通过升高前额叶皮层多巴胺水平改善阴性症状及认知功能.
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双苯氟嗪对大鼠缺血脑皮层诱发电位和氨基酸含量的影响
目的:测定双苯氟嗪(Dip)对大鼠缺血脑细胞内外氨基酸含量及皮层体感诱发电位(SEP)的影响.方法:在结扎双侧颈总动脉雌性Wistar大鼠,用HPLC法测定脑透析液和脑组织中的氨基酸含量,用电生理技术测定SEP.结果:Dip ip 50 mg·kg-1可防止缺血所致SEP潜伏期的延长及其幅度的过分增大,降低脑透析液中的谷氨酸、天冬氨酸和甘氨酸浓度以及减轻脑组织中谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、牛磺酸和γ-氨基丁酸的消耗.结论:Dip能够改善脑缺血所致的皮层功能紊乱和脑内兴奋性与抑制性氨基酸释放失调,为其抗缺血性脑损伤作用提供了进一步的实验证据.
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微透析技术在神经重症监护中的研究进展
微透析技术(microdialysis,MD)是1种活体细胞外液生化物质采样分析技术.因其独有的微创性和取样的连续性,现已被广泛应用于脑组织各种病理生理现象的探索性实验、神经生物化学的监测和药物代谢研究.近来,甚至被用于局部的治疗性给药[1].1966年,Bito等[2]首次使用MD将1张灌有液体的半透膜置入犬体内进行实验.
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重视对重型颅脑损伤后沉默的30%的研究和治疗
颅脑损伤大多数为轻型伤与中型伤。伤后过程,轻型伤无颅骨骨折者约有0.2%~0.7%的患者加重;有颅骨骨折者3.2%~10%病情转恶化。中型伤有一部分脑挫裂伤患者,数日内出现迟发性颅内血肿。这两类患者如有明显症状,宜住院观察治疗避免发生意外。重型颅脑损伤约占颅脑伤的20%,死亡率很高,是救治的重点。颅脑创伤患者的死亡率下降了50个百分点,具有明显的进步。另外一个有意思的发现是1885~1930年,颅脑创伤死亡率以每10年3个百分点的速度下降,而在1930~1970年期间死亡率无明显增减,1970~1990年出现了死亡率的迅速下降,达到了平均每10年9.2个百分点,而1990~2006年间颅脑创伤死亡率再次出现了平台期,约占病例总数的30%。可以很明显地看到脑外伤死亡率的两次明显下降之后又处在平台期。分析了这种变化趋势背后所采取的救治策略的价值,提出未来应该重视对于救治这沉默的30%颅脑创伤死亡患者的研究和治疗。
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药物分析方法研究进展
通过查阅近期国内外有关文献,综述了高效液相色谱法在药典中的发展与应用.重点介绍了其在非菌体抗炎药物分析方法中的进展.在体内药物分析方面,介绍了高效毛细管电泳的在线样品制备技术的原理、特点、及发展状况和LDL-C的自动化方法.
关键词: 高效液相色谱法 微透析 电渗析 毛细管等速电泳(LDL-C的测定方法