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微透析技术用于江浙蝮蛇毒镇痛组分对中枢内阿片肽调控作用的研究
目的研究江浙蝮蛇毒镇痛C4组分对中枢亮氨酸脑啡肽、β-内啡肽、P物质水平的调节作用.方法采用微透析技术,探针定位于尾状核,以人工脑脊液透析,HPLC检测神经肽的含量,动态监测其变化.结果微透析膜的回收率为18%～43%,大鼠在给予C4组分后,尾状核亮氨酸脑啡肽含量显著增高,亮氨酸脑啡肽含量为可乐定组的1.5倍,并持续作用8h以上,而β-内啡肽、P物质含量变化较小.结论 C4组分主要作用于亮氨酸脑啡肽,通过提高其含量发挥镇痛作用.
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江浙蝮蛇毒镇痛组分分离纯化方法的研究
采用国际先进的AKTA-explorer蛋白快速纯化系统对蛇毒进行分离,通过多级分离与条件优化,将江浙蝮蛇毒镇痛组分分离纯化,并结合药理实验确定其镇痛组分.方法:江浙蝮蛇经过多步分离法分离.将分离的各组分,进行小鼠镇痛实验,以确定镇痛组分.结果:经三步柱分离可得单一色谱峰,纯度为99%.分离所得3、6号主峰具有显著镇痛作用.结论:利用三步柱分离法可将江浙蝮蛇毒中主要组分分离纯化.3、6号组分可基本确定为江浙蝮蛇毒镇痛组分.
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江浙蝮蛇毒镇痛组分对吗啡依赖大鼠尾状核神经肽的调控作用
目的:研究江浙蝮蛇毒镇痛C4组分对大鼠尾状核中神经肽水平的调控作用.方法:应用微透析技术,探针定位于大鼠尾状体,以人工脑脊液透析,HPLC检测亮氨酸脑啡肽、β-内啡肽和P物质的含量,动态监测其变化.结果:在吗啡依赖大鼠给予C4组分后,尾状核亮氨酸脑啡肽含量显著增高,为可乐定组的1.5倍,并持续作用8h以上,而β-内啡肽和P物质含量变化较小.结论:C4组分主要作用于亮氨酸脑啡肽,通过提高其含量发挥镇痛作用.
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江浙蝮蛇毒对体外培养人滑膜细胞凋亡的影响
目的 探讨江浙腹蛇毒(AHV)诱导类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞凋亡的作用及对相关蛋白Caspase-3表达的影响.方法 AHV处理培养的滑膜细胞后,采用MTT比色法检测AHV对滑膜细胞增殖的抑制作用,并采用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,以免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白的表达.结果 MTT的检测结果显示5μg/mL AHV处理组滑膜细胞增殖抑制率达67.2%,且与时间、剂量具有正相关关系(P<0.05),AHV体外作用滑膜细胞24 h的1C50为3.508 μg/mL.流式细胞仪结果显示,与对照组相比,AHV各剂量组凋亡率明显增加(P<0.05),并与剂量呈正相关.AHV体外作用滑膜细胞24 h时出现了明显的Caspase-3蛋白表达,其蛋白表达率明显高于对照组.结论 AHV对滑膜细胞具有较强的增殖抑制作用,细胞凋亡率明显增加可能与AHV诱导滑膜细胞Caspase-3活化相关.
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江浙蝮蛇毒 C4组分的中枢镇痛作用及其机理研究
目的：研究江浙蝮蛇毒镇痛C4组分的中枢镇痛作用并初步探讨其镇痛机理。方法：通过侧脑室给药、脊髓化鼠镇痛实验和足跖定压刺激试验研究C4组分的镇痛作用部位；通过C4组分与阿托品、利血平、纳络酮药物的相互作用，研究其与乙酰胆碱受体、阿片受体间的作用关系。结果：C4组分的镇痛部位主要在脑中枢，且C4组分不通过乙酰胆碱受体作用，而与阿片受体相关。结论：江浙蝮蛇毒C4组分镇痛通过中枢起效，提示江浙蝮蛇毒C4组分可能与增加内源性阿片肽系统的活动有关。
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江浙蝮蛇毒的抗凝作用及应用
心脑血管病是我国的多发病,有很高的致残率和病死率.根据中国高血压联盟公布资料,我国高血压病人近亿人.脑血管病患者450万人,每年新发生150万人.
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江浙蝮蛇毒的质量分析
目的:建立江浙蝮蛇毒的质量分析方法.方法:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对江浙蝮蛇毒进行定性鉴别,以Lowry法测定江浙蝮蛇毒的总蛋白量.结果:聚丙烯酰胺凝胶电泳法能较好的鉴别江浙蝮蛇毒;Lowry法测定,表明江浙蝮蛇毒总蛋白量在25μg·mL～250μg·mL-1范围内有较满意的线性关系,回归方程为Y=0.0147+1.4553X,r=0.9992,平均回收率为100.09%,RSD=1.76%(n=6).结论:上述方法简便、精确,可以作为江浙蝮蛇毒的质量控制方法.
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江浙蝮蛇毒诱导类风湿性关节炎患者滑膜细胞凋亡的实验研究
类风湿性关节炎(RA)是一种以滑膜增生、淋巴巨噬细胞浸润滑膜层并伴有少量的凋亡为特征的自身免疫性疾病.既往研究表明抗凋亡蛋白Bcl-2在RA患者中较普通骨关节炎患者显著上调,从而抑制滑液成纤维细胞的凋亡,并导致RA患者滑膜的超常增生.
