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PRMT1结合并增强HMGCR活性对食管鳞癌细胞增殖能力的影响

侯广杰;何苡;杨光煜

摘要: 目的 探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)结合羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)后活性变化及其对食管鳞癌细胞增殖能力的影响.方法 以食管鳞癌ECA109细胞为模型,通过免疫共沉淀法观察PRMT1与HMGCR在细胞中的相互结合作用.将ECA109细胞随机分为感染组和对照组,分别以表达特异性针对PRMT1的RNA干扰分子的慢病毒质粒转染48 h,采用Western blot法分别检测PRMT1、HMGCR蛋白及甲基化HMGCR蛋白,分光光度法检测HMGCR酶活性,CCK-8法检测细胞增殖活性.结果 细胞裂解后的蛋白共沉淀复合物分别用抗PRMT1 、HMGCR抗体捕获后,可检测到HMGCR、PRMT1蛋白条带.感染组和对照组ECA109细胞中PRMT1蛋白相对表达量分别为0.057 ±0.011和0.239 ±0.041 (P <0.01),HMGCR蛋白相对表达量分别为0.175±0.031和0.184 ±0.037(P >0.05).感染组和对照组ECA109细胞甲基化HMGCR蛋白相对表达量分别为0.028±0.006、0.107±0.016,HMGCR相对活性分别为0.104 ±0.009、0.277 ±0.013,P均<0.01.感染组ECA109细胞培养24 h后,细胞增殖的OD450值已低于对照组(P<0.05);培养48 h及72 h后,两组OD450值差距进一步扩大(P均<0.01).结论 PRMT1可通过结合HMGCR蛋白促进其甲基化途径增强HMGCR蛋白活性,进而促进食管鳞癌细胞的体外增殖能力.

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