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组织型纤溶酶原激活剂基因逆转录病毒载体兔左心耳内靶向溶栓研究

罗洪波;向道康;蔡鸿;冯超;向龙

摘要: 目的 观察组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因局部转导对特氟隆(Dacron)片(与机械瓣瓣环同质)的溶血栓作用.方法 30只兔建立左心耳内Dacron片植入血栓模型,随机分为PLEGFP-N1-tPA治疗组(n=10)、PLEGFP N1空载体对照组(n=10)、空白对照组(n=10),局部基因转导,于术后2,30 d各组1/2动物取材(6个亚组A1、B1、C1、A2、B2、C2),聚光共聚焦(confocal)观察所取左心耳组织增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达,体视镜和电视镜观察Dacron片表面血栓情况,免疫印迹(Western blot)、血浆平板和酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测所取组织tPA表达、溶栓情况.结果 术后2,30 d取材,治疗组所取左心耳组织confocal均观察到多而强的EGFP表达,Plegfp-N1对照组也有EGFP表达,但空白对照组无EGFP表达.30个Dacron片加未植入组5个Dacron片共35个,在体视镜(×160)和电视镜(×500)下观察,未植入组和治疗组Dacron片表面均无血栓,对照组表面均有血栓.治疗组所取静脉Western blot检测均有外源tPA表达,对照组未检测到.血浆平板显示:治疗组均有大的溶解圈,有明显溶栓作用,对照组没有.结论 Plegfp-N1-tPA局部基因转导能有效阻止外源移植物表面血栓形成.

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