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吡那地尔预处理对缺氧/复氧成后年大鼠心肌细胞内钙离子浓度的影响

邓胜利;姚刚;张琳;喻田

摘要: 目的:观察吡那地尔(Pinacidil)预处理对缺氧/复氧后成年大鼠心肌细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,以探讨吡那地尔在缺氧/复氧中抑制钙超载作用的机制.方法通过Langendorff离体心脏灌注装置,用Ⅱ型胶原酶对心脏逆行灌注,进行成年大鼠心肌细胞的分离与培养,建立心肌细胞缺氧/复氧模型.实验分组及处理:(1)正常组(NOR组):细胞正常培养;(2)缺氧/复氧组(CON组):细胞在95%N2+5%CO2培养箱中缺氧45min,复氧1h;(3)吡那地尔组(Pina组):先加入吡那地尔(30μmol/L)预处理15min,再缺氧45min,复氧1h;(4)格列苯脲拮抗Pina组(Gi+Pina组):先用格列苯脲(50μmol/L)处理5min后,余处理同Pina组.通过Fluo-3/AM荧光指示荆负载,用激光共聚焦显微镜检测心肌细胞Ca2+浓度变化.结果:NOR组心肌细胞内钙离子荧光强度值较低;细胞缺氧45min,复氧1h后其荧光强度值与NOR组相比显著增高(P<0.01);而Pina组细胞内荧光强度值较CON组及Gi+Pina组低(P<0.01).结论:心肌细胞缺氧/复氧后可导致细胞内钙超载,而吡那地尔能明显减轻心肌细胞缺氧/复氧后的钙超载现象,其机制可能与ATP敏感性钾通道的开放有关.

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