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携带有Foxp3基因慢病毒载体的构建及其转染大鼠T细胞的实验研究

肖江卫;王崇树;魏寿江;王城;周彤

摘要: [目的]构建携带有Foxp3基因的慢病毒载体,使之能高效地转染原代大鼠T细胞.[方法]采用PCR技术从携带有Foxp3基因的FL24796质粒扩增出Foxp3基因序列,并将其接入慢病毒载体pRRLSIN-LacZα中,经PCR、酶切和测序鉴定后,转染人293细胞和大鼠T细胞,并通过流式细胞技术观察病毒转染效果.[结果]经过PCR、酶切和测序鉴定,pLenti-Foxp3-EGFP慢病毒载体被成功构建,其转染T细胞的佳感染复数为50:1,所包装的病毒对大鼠T细胞的感染效率可达28.5%左右.[结论]成功地构建出携带有Foxp3基因的慢病毒载体,并能高效地转染进入原代大鼠T细胞.

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