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DHA调节人脑血管周细胞氧糖剥夺-复氧复糖时血管生成素表达的机制:与SSeCKS的关系
目的 评价二十二碳六烯酸(DHA)调节人脑血管周细胞(HBVPs)氧糖剥夺-复氧复糖时血管生成素(Ang)表达的机制与Src抑制的蛋白激酶C底物(SSeC KS)的关系.方法 HBVPs以密度2×105个/ml分别接种于96孑板或6孔板,采用随机数字表法分为5组(n=18):正常对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD/R组)、DHA组(D组)、SSeCKS基因沉默(S组)、SSeCKS基因沉默+DHA组(SD组).氧糖剥夺-复氧复糖损伤模型制备方法:采用无糖-无血清培养液,置于94％N2-5％CO2-1％O2条件下缺氧缺糖24 h,再置于高糖DMEM培养基常氧环境中复氧复糖6h.D组于缺氧前lh加入DHA,终浓度40 μmol/L.S组和SD组采用siRNA进行SSeCKS基因沉默,随后SD组于缺氧前1h加入DHA,终浓度40 μmol/L.于复氧6h时,采用CCK-8法确定细胞存活率,采用ELISA法检测LDH漏出量,采用Western blot法检测SSeCKS、Ang-1和Ang-2的表达.结果 与C组比较,OGD/R组细胞存活率降低,LDH漏出量增加,SSeCKS和Ang-1表达下调,Ang-2表达上调,Ang-1/Ang-2比值降低,S组SSeCKS表达下调(P＜0.05).与OGD/R组比较,D组细胞存活率升高,LDH漏出量降低,SSeCKS和Ang-1表达上调,Ang-2表达下调,Ang-1/Ang-2比值升高(P＜0.05),SD组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).与D组比较,SD组细胞存活率降低,LDH漏出量升高,SSeCKS和Ang-1表达下调,Ang-2表达上调,Ang-1/Ang-2比值降低(P＜0.05).结论 DHA增加HBVPs氧糖剥夺-复氧复糖时Ang-1/Ang-2比值的机制可能完全与上调SSeCKS表达有关.
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A型激酶锚定蛋白12与肿瘤
A型激酶锚定蛋白12(AKAP12)是一种细胞支架蛋白,能够锚定一些关键信号分子,如蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)和细胞周期素D1(cyclin D1),以及动态调节β2-肾上腺素受体复合物.AKAP12在多条信号转导通路中发挥重要作用.研究发现,AKAP12在前列腺癌、食管癌、胃癌等多种肿瘤中表达下调或缺失,是一个肿瘤抑制基因,同时也是潜在的肿瘤转移抑制基因.
关键词： 肿瘤 A型激酶锚定蛋白质类
