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介绍一种简便的红细胞无氧糖酵解率测定方法
目的:为了简化现有的华伯氏呼吸仪检测红细胞无氧糖酵解的方法,进行此项研究.方法:实验用葡萄糖试剂盒,高氯酸,可见光分光光度计,氮气瓶和摇床.实验分4步进行:任氏液.Trls-HCI溶液等试液的配制,任氏血的制备,红细胞无氧糖酵解率的测定和红细胞无氧糖酵解率的计算.结果:用SOD保养液.在4℃条件下保存入红细胞75d时糖酵解率为86.2%±5.0%,明显优于GMA保养液39.2%±8.9%.结论:不用华伯氏仪的红细胞无氧糖酵解率的测定方法,操作简便,方法准确可靠,在普通实验室即可进行.
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全血长期保存对增殖性血液病细胞参数检测的影响
临床血液分析要求在6 h内完成并回报结果,剩余血液保存1周以备复查.血液病患者血液成分变异大,稳定性较低,这方面相关报道较少.本文对69例增殖性血液病患者全血保存1周复查,结果分析如下.
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4℃条件下保存不同时间点小鼠骨髓间充质干细胞的细胞活性和生物学特性研究
目的:本研究旨在比较4℃条件下保存时间对小鼠骨髓间充质干细胞的细胞活性和生物学特性的影响,为安全有效短期保存BMSCs提供参考.方法:体外分离培养纯化小鼠骨髓间充质干细胞,使用磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline PBS)为小鼠骨髓间充质干细胞的短期储存液,直接将骨髓间充质干细胞置于4℃保存,分别在0、4、12、24、48 h观察细胞形态、活细胞比例、细胞增殖和分化能力.结果:小鼠骨髓间充质干细胞于4℃条件下保存0、4、12 h和24 h镜下见细胞形态良好、活细胞比例仍接近80％,细胞增殖和分化能力与0h相比未见显著性差异；保存至48 h镜下见死细胞和细胞碎片增多、活细胞比例仅接近20％,细胞增殖和分化能力与0h相比存在显著性差异(P＜0.05).结论:4℃条件下24 h内保存小鼠骨髓间充质干细胞,是一种简洁有效可行的短期保存方法.随保存时间的延长细胞逐渐丧失细胞活性和生物学特性.
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4℃冰箱保存骨髓及外周血造血干细胞
目的为骨髓造血干细胞(BMSC)及外周血造血干细胞(PBSC)的短期保存建立简便有效的方法.方法采用自体血浆为骨髓单个核细胞(BMMCs)及外周血单个核细胞(PBMCs)冷藏营养液,直接置BMMCs及PBMCs于4℃冰箱中保存,分别在当天至第7d选择性测其细胞活力,CD+34细胞阳性率及粒-单系造血祖细胞(CFU-GM)集落形成能力.结果 BMMCs及PBMCs置4℃冰箱保存3d后,台盼兰拒染率、CD+34细胞回收率和CFU-GM回收率分别达80%以上;保存4d后,上述三项指标仍达70%以上.结论当患者接受高剂量化疗时用此方法能在4d内安全地保存BMSC或PBSC.
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4℃长期保存洗涤红细胞体外质量研究
目的探讨延长洗涤红细胞(WRC)的保存期限.方法将悬浮红细胞均分为3份:1份不洗涤(对照组),其余2份分别用生理盐水(盐水组)和红细胞添加剂(MAP组)洗涤,终产品用MAP液悬浮,4℃保存,分6个时间段取样检测红细胞活性、功能.结果上清游离K+、Na+、Hb:盐水组0～35d,MAP组0～28d均符合标准[1];pH:MAP组＜盐水组＜对照组(P＜0.01);ATP:盐水组与对照组下降趋势基本一致(P＞0.05),35d时分别保留70.8%和66.9%,而MAP组自保存7d起低于盐水组、14d起低于对照组(P＜0.01),至35d时仅保留27.8%;2-3-DPG:MAP组下降速度明显大于盐水组和对照组(P＜0.01),7d时下降了92.5%;洗涤效果:盐水组红细胞回收率83.1%,白细胞清除率84.5%,血浆蛋白清除率98.9%,细菌试验阴性.结论盐水、MAP对红细胞膜基本无损伤;但较之盐水洗涤,MAP洗涤不适于WRC持续保存;盐水洗涤后WRC可在4℃继续保存21d.
