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柱色谱-高速逆流色谱法分离纯化虎杖中大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷
目的 建立从虎杖药材中高效制备分离大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(EG)的方法.方法 采用大孔吸附树脂柱色谱和ODS柱色谱分离目标组分,高速逆流色谱(HSCCC)纯化目标化合物,质谱和核磁共振波谱数据鉴定结构,HPLC不加校正因子的主成分自身对照法检测纯度.结果 优化确定以二氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-水(8∶1∶6∶5)为HSCCC溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,纯化制备了符合定量测定用要求的EG对照品,HPLC法检测质量分数大于98％.结论 方法适于从虎杖药材中大量制备高纯度EG,为含有该成分的天然产物及其制剂质量评价提供对照物质.
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大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对牙龈卟啉单胞菌唾液酸酶活性及其毒力基因表达影响研究
目的 探讨大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)唾液酸酶活性及其毒力基因表达的影响.方法 使用不同质量浓度的大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(0.2、0.5、2、5、10 mg/mL)处理P.gingivalis W83(实验组),用未加药物的P.gingivalis W83作对照(对照组),采用荧光法检测大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对P.gingivalis唾液酸酶活性的作用.5 mg/mL大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷作用于P.gingivalis W83,Real-time PCR法检测毒力基因fimA 、fimR 、fimS、kgp、rgpA和rgpB的表达情况.结果 大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对P.gingivalis唾液酸酶活性产生了抑制作用,当其质量浓度为0.2、0.5、2、5、10 mg/mL时,对唾液酸酶活性的抑制率分别为11.4％、32.23％、40.21％、73.54％、84.31％.与对照组比较,实验组(5 mg/mL大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷处理)的fimA 、fimR 、fimS、kgp、rgpA和rgpB基因表达均下降,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).结论 大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷可有效抑制P.gingivalis唾液酸酶活性,其抑制作用会降低细菌毒力基因表达,有望成为预防及治疗牙周炎的新型药物.
