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Lewis y抗原对人卵巢癌细胞RMG-I-H部分耐药相关蛋白基因表达的影响
目的 探讨细胞表面Lewis y抗原对人卵巢癌细胞系RMG-I-H细胞的部分耐药相关蛋白基因表达的影响.方法 RT-PCR法检测转染α1,2-岩藻糖转移酶基因和未转染α1,2-岩藻糖转移酶基因的人卵巢癌细胞系RMG-I-H和RMG-I细胞中,以及10 μg/ml抗Lewis y单克隆抗体处理及未处理的RMG-I-H细胞中部分耐药相关蛋白mRNA的表达量.免疫细胞化学方法检测RMG-I和RMG-I-H细胞中P-糖蛋白(P-gp)的表达;分别建立RMG-I和RMG-I-H细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,采取免疫组织化学方法检测移植瘤组织P-gp的表达.结果 与RMG-I细胞比较,RMG-I-H细胞中蛋白激酶C-α(PKC-α)、拓扑异构酶Ⅰ(Topo Ⅰ)、多药耐药相关蛋白-1(MRP-1)及MRP-2基因mRNA的相对表达量均显著增高(0.46±0.02 vs.0.27±0.05、0.82±0.08 vs.0.52±0.04、0.66±0.07 vs.0.34±0.12和0.44±0.08 vs.0.23±0.05,均P<0.05),而多药耐药基因-1(MDR-1)mRNA的相对表达量显著降低(0.26±0.05 vs.0.45±0.08,P<0.05).免疫化学染色分析显示,不论体内还是体外,P-gP在RMG-I-H细胞中的表达量均显著高于RMG-I细胞中的表达量(均P<0.05).经Lewis y单克隆抗体处理后,RMG-I-H细胞中MDR-1、MRP-1、MRP-2、PKC-α及Topo Ⅰ的mRNA相对表达量均呈时间依赖性下降(均P<0.05),而对照组以上基因mRNA的表达量不随时间的变化而变化(均P>0.05).经Lewis y抗体处理6 h的RMG-I-H细胞中MDR-1、MRP-1、MRP-2、PKC-α及Topo Ⅰ的mRNA相对表达量均显著低于对照组(均P<0.05),Lewis y单克隆抗体对上述基因表达的抑制率分别为48.55%、77.50%、70.18%、45.86%和46.13%.结论 人卵巢癌细胞表面Lewis y抗原与部分耐药相关蛋白基因表达的调节密切相关.
关键词： Lewis y抗原 抗Lewis y单克隆抗体 卵巢癌 耐药相关蛋白 -
卵巢浆液性癌中Lewisy抗原表达与耐药相关性研究
目的 探讨Lewis y抗原表达与卵巢浆液性癌耐药的关系.方法 2005 - 2009年于中国医科大学附属盛京医院应用免疫组化法检测卵巢浆液性乳头状腺癌54例(其中耐药组24例,敏感组30例)中Lewis y抗原的表达情况,并分析其与卵巢癌耐药的关系.结果 卵巢浆液性乳头状腺癌耐药组Lewis y抗原的阳性表达率为(91.67％)明显高于敏感组(60.00％),P＜0.01；耐药组Lewis y抗原表达强度(0.2426±0.0629)也明显高于敏感组(0.2113±0.0390),P=0.028.Lewis y为耐药相关的独立危险因素(P＜0.05).结论 Lewis y抗原与卵巢浆液性乳头状腺癌化疗耐药相关.
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Lewis y抗原及α1,2-岩藻糖转移酶基因在卵巢癌细胞系中的表达
目的 探讨卵巢癌细胞系中Lewis y抗原及α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-FT)基因FUT1表达变化对卵巢癌细胞增殖、耐药和转移的影响.方法 采用免疫细胞化学法、免疫细胞荧光法测定α1,2-FT基因FUT1转染前后的人卵巢癌细胞系RMG-I和RMG-I-H、人卵巢癌高转移细胞系H08910PM及亲本细胞系H08910、人卵巢癌耐药细胞系COC1/DDP及亲本细胞系COC1中Lewis y抗原的表达.利用RT-PCR法及real-time PCR法检测上述6种细胞中FUT1基因表达的变化.结果 经免疫化学方法和免疫细胞荧光法分析,在RMG-I-H、H08910PM及COC1/DDP细胞系中Lewis y表达强度分别为(53.90±4.33),(37.31±0.19)和(28.52±1.45),与相应的亲本细胞系RMG-I(32.18±0.64)、H08910(14.96±0.61)及COC1(19.26±0.83)比较均明显升高(P均<0.05).与RMG-I相比,RMC-I-H中的FUT1基因表达上调3.07倍.与HO8910相比,H08910PM中的FUT1基因表达上调2.13倍,与COCI相比,COC1/DDP中的α1,2-FT基因表达上调2.42倍(P均<0.05).结论 人卵巢癌细胞表面Lewis y抗原与卵巢癌细胞的增殖、耐药及转移等生物学行为密切相关.
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α-L-岩藻糖苷酶对Lewis y抗原高表达卵巢癌细胞系的体外抑制作用
目的 探讨α-L-岩藻糖苷酶对Lewis y抗原高表达卵巢癌细胞系的体外增殖、黏附以及细胞膜通透性的影响.方法 以α-L-岩藻糖苷酶处理α1,2-岩藻糖转移酶基因转染前、后卵巢癌细胞系作为实验组(RMG-I-H-A、RMG-I-A),以未经α-L-岩藻糖苷酶处理的细胞作为对照组(RMG-I-H-C、RMG-I-C).利用免疫细胞化学染色法检测4组细胞中Lewis y抗原的表达,利用细胞计数法、荧光分光光度计测定细胞的生物学特性.结果 α-L-岩藻糖苷酶处理后的实验组RMG-I-H-A和RMG-I-A细胞黏附性差,生长速度减慢,细胞边缘整齐,呈椭圆型,无延伸生长,处于细胞分裂期的细胞个数少.实验组RMG-I-H-A和RMG-I-A细胞的膜通透性比对照组RMG-I-H细胞增加了4.4倍,比RMG-I细胞增加了2.3倍.结论 Lewis y抗原具有促进卵巢癌细胞系增殖,提高其生存能力的作用.
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Lewis y抗体对α1,2岩藻糖转移酶基因转染后卵巢癌细胞的体外抑制作用
目的: 探讨Lewis y单克隆抗体(mAb)对α1,2岩藻糖转移酶基因转染后高表达Lewis y抗原的卵巢癌细胞系RMG-I-H的体外增殖能力、黏附力以及侵袭力的抑制作用. 方法: 通过体外细胞增殖实验、细胞黏附实验、细胞体外侵袭实验, 以羊抗人IgG抗体处理组或无抗体处理组为对照, 检测Lewis y mAb处理前后RMG-I-H细胞增殖能力、黏附力及侵袭力的变化.结果: 细胞增殖力与黏附力测定结果表明, 实验组与对照组之间有统计学意义(P＜0.05), 且与对照组相比, 第2～7天的生长抑制率分别为5.62%、 19.75%、 34.96%、 46.51%、 49.78%和33.33%.不同培养时间(15、 30、 60 min)的黏附抑制率分别为47.59%、 58.64%和13.85%.体外细胞侵袭实验显示不同浓度Lewis y抗体处理组与对照组比较均无统计学意义(P＞0.05).结论: 抗Lewis y mAb能明显抑制体外RMG-I-H细胞的生长及增殖能力、降低体外培养的RMG-I-H细胞的黏附性, Lewis y抗原与卵巢癌细胞增殖、黏附的生物学行为有关, Lewis y抗体在肿瘤的治疗中显示出潜在的应用价值.
关键词： Lewis y抗原 抗Lewis y单克隆抗体 卵巢癌 抑制 -
Lewis y抗原对人卵巢癌细胞RMG-Ⅰ裸鼠移植瘤p-Akt蛋白表达的影响
目的:探讨α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对人卵巢癌细胞株RMG-Ⅰ裸鼠移植瘤中磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达的影响.方法:利用已经建立的Lewis y抗原稳定高表达的卵巢癌细胞株RMG-Ⅰ-H建立裸鼠移植瘤模型,利用免疫组织化学染色法检测基因转染前后裸鼠移植瘤组织中Lewis y抗原及p-Akt蛋白的表达.结果:基因转染后的裸鼠移植瘤组织细胞表面Lewis y抗原及p-Akt蛋白的表达均明显增加,转染组与非转染组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Lewis y抗原明显促进卵巢癌细胞株RMG-Ⅰ裸鼠移植瘤p-Akt蛋白的表达.
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HE4与Lewis在卵巢上皮性肿瘤中的表达及相关性研究
目的：研究HE4与Lewis y抗原在卵巢上皮性肿瘤中的表达、相关性及临床意义。方法：免疫组化法检测卵巢上皮性恶性肿瘤、卵巢上皮性交界性肿瘤、卵巢上皮性良性肿瘤及正常卵巢组织中HE4与Lewis y抗原的表达。应用免疫荧光双标记方法检测卵巢上皮性肿瘤中HE4与Lewis y的结构关系。结果：HE4在卵巢恶性肿瘤组的阳性率高，明显高于良性及正常卵巢组（ p均﹤0.05）。Lewis y表达与HE4相似，在卵巢恶性上皮性肿瘤中，Lewis y抗原的阳性表达率明显高于交界性、良性及正常卵巢组。相关性分析显示：HE4与Lewis y呈直线相关（ r＝0.813，p﹤0.05）。在激光共聚焦显微镜下可见HE4与Lewis y抗原有空间位置上的重叠。结论：HE4与Lewis y抗原在卵巢恶性肿瘤中均呈现明显高表达，且两者在卵巢上皮性肿瘤中的表达呈正相关。
