首页 > 文献资料
-
MicroRNA-137与AngⅡ在自发性高血压大鼠心脏重构中的作用
目的：探讨微小核糖核酸195（MicroRNA?137，miRNA?137）、TGF?β1／Smads信号转导通路及血管紧张素Ⅱ（ AngⅡ）在自发性高血压大鼠（ SHR）心脏重构中的作用。方法取雄性SHR大鼠16只，随机分为SHR干预组（卡托普利10 mg／kg·d）和SHR 对照组（蒸馏水）各8只，另取Wistar大鼠8只为正常对照组，分别给予SHR大鼠卡托普利10 mg／kg·d和蒸馏水灌服，共持续8周。造模前后测大鼠尾动脉血压，8周后股动脉放血处死大鼠， HE 染色观察大鼠心脏形态学改变，实时荧光定量多聚酶链式反应（ qRT?PCR）法检测大鼠心脏中 miRNA?137的表达，Western?blot 检测转化生长因子β1（transforming growth factor beta1，TGF?β1）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、Smad蛋白3（small mother against decapen?taplegic protein three，Smad3）、I 型胶原（Col?Ⅰ）和Ⅲ型胶原（Col?Ⅲ）蛋白表达水平。结果 SHR大鼠心脏miRNA?137、AngⅡ、TGF?β1、Smad3、Col?Ⅰ及 Col?Ⅲ的表达量均高于 Wistar 大鼠（ P ＜0．01或 P＜0．05），SHR 干预组大鼠心肌细胞较 SHR 对照组明显变小，细胞排列较其紧密有序，miRNA?137、AngⅡ、TGF?β1、Smad3、Col?Ⅰ及Col?Ⅲ表达量均明显降低（ P ＜0．01或 P ＜0．05）。结论 miRNA?137可能通过上调AngⅡ及TGF?β1／Smads信号转导通路促进SHR心脏重构；卡托普利干预可抑制 miRNA?137表达。
-
miRNA-137在骨肉瘤中的作用及机制研究
[目的]通过转染miRNA-137至人骨肉瘤细胞MG-63,观察细胞内TWIST蛋白含量变化及其对细胞增殖活性的影响以探讨miRNA-137在骨肉瘤中的作用及机制.[方法]TargetScan预测miRNA-137与TWIST结合靶位;PCR扩增TWIST基因3'UTR区并克隆至荧光素酶报告基因表达载体;化学法合成miRNA-137 mimics,miRNA-137 inhibitor及NC序列,与荧光素酶报告基因表达载体共转染293细胞,48 h后检测荧光素酶活性;转染miRNA-137至MG-63细胞,转染后48 h,Real Time-PCR检测转染后细胞内miRNA-137含量,Western-blot检测细胞中TWIST蛋白含量变化;转染后0～72 h,CCK-8检测肿瘤细胞增殖活性.[结果]证实了miRNA-137与其靶基因TWIST的结合位点;miRNA-137 mimics转染MG-63细胞,可明显抑制细胞内TWIST蛋白表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),而miRNA-137 inhibitor转染细胞后可明显增强胞内TWIST蛋白的表达,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05));miRNA-137 mimics可明显抑制MG-63细胞对数期增殖活性,而miRNA-137 in-hibitor则使细胞增殖活性进一步增强,相同时间点与对照相比较,均有差异(P＜0.05).[结论]miRNA-137可以通过抑制其靶基因TWIST表达来抑制MG-63细胞增殖活性.
