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DT40细胞文献资料
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转基因DT40细胞导入早期鸡胚后的分布及绿色荧光蛋白表达的研究
目的 为了研究经过基因修饰的体细胞导入到禽类胚胎以后,供体细胞及外源基因是否能在受体胚胎中成活并且外源基因是否可以长期表达.方法 筛选得到稳定整合绿色荧光蛋白基因的鸡DT40细胞作为外源蛋白的运载工具,通过血管微注射的方法将其导入到于38.5℃温度条件下孵化65～70 h的鸡胚中,并将操作后的鸡胚在原孵化条件下继续孵化.在孵化的不同时期取移植了DT40细胞的嵌合体胚胎在荧光显微镜下观察荧光细胞的存活与分布情况.并通过PCR以及免疫组织化学方法检测供体细胞在受体中的位置以及绿色荧光蛋白的表达情况.结果 荧光标记的DT40细胞可以存活于受体不同的组织器官中,包括:脑、心脏、肝脏等.导入胚胎的整合外源基因的DT40细胞可以存活到胚胎出雏之前,并且外源基因能够正常表达.结论 可以通过此方法将外源基因导入到受体中,并使目的 蛋白在受体胚胎中持续表达,为胚胎期导入外源蛋白诱导免疫耐受的研究以及将转基因细胞移植到动物体内生产目的 蛋白的研究提供科学依据和技术平台.
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白藜芦醇诱导DT40细胞DNA损伤的机制研究
目的 研究白藜芦醇(RSV)诱导DT40细胞DNA损伤的作用机制.方法 采用MTT试验检测RSV对细胞增殖的影响;利用染色体畸变试验分析RSV对细胞的DNA损伤作用以及抗氧剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对RSV诱导DNA损伤的干扰作用.结果 50μmol· L-1 RSV连续处理16 h后可诱导DT40细胞的DNA损伤;RSV对DT40细胞的增殖呈剂量依赖性抑制作用,1 mmol·L-1NAC预处理1h后可提高DT40细胞的生存率,同时也可抑制RSV诱导的DNA损伤.结论 RSV可诱导DT40细胞的DNA损伤,其作用机制可能与RSV的氧化损伤相关.
