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N-乙酰半胱氨酸对活性氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡的作用
目的：探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对活性氧（ROS）介导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡的抑制作用。方法用过氧化氢（H2O2）诱导H9c2心肌细胞，建立氧化损伤凋亡模型，并用NAC进行干预。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞存活率，应用流式细胞仪分析H9c2心肌细胞内ROS水平及凋亡率。结果不同剂量H2O2（0、2、4mmol/L）作用于H9c2细胞8h后，随着H2O2剂量的增高，细胞存活率降低，ROS水平及凋亡率升高（P<0.01），5mmol/L NAC有效提高了细胞存活率，明显抑制细胞内ROS水平及凋亡的发生（P<0.01）。结论 NAC通过减少自由基的产生，拮抗了ROS介导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡。
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大蒜素对 H9c2细胞钠电流的作用
目的：观察大蒜素(Gar)对 H9c2细胞钠电流的影响。方法取培养大鼠心肌细胞系 H9c2细胞,采用全细胞膜片钳记录钠电流。观察 Gar 对钠电流和门控机制的影响。结果Gar 对 INa 的抑制效应呈电压依赖性。-30 mV 时,200μmol/L Gar 可使 INa 由(-98.4±5.6)pA/pF 降低为(-66.5±5.3)pA/pF (P<0.01)。药物使 INa 半激活电压 V1/2向去极化方向移动,减少通道开放,从而减少 INa 电流峰值密度。200μmol/L 的 Gar 可以使钠通道的稳态激活曲线向去极化方向移动,半激活电压(V1/2, act)从(-50.6±5.4)mV移至(-27.8±3.2)mV(P<0.01),激活曲线斜率(kact)差异无统计学意义(P>0.05)。结论大蒜素可能通过减少钠通道激活,降低钠电流。
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miR-139-5p低表达重组慢病毒的构建及其在H9c2细胞的表达验证
目的：构建miR-139-5p低表达慢病毒载体,检测其在H9c2细胞的表达效果。方法根据大鼠miR-139-5p序列,设计合成其靶点序列,并合成寡核苷酸双链,克隆入慢病毒载体pGC-LV,与pHelper 1．0和pHelper 2．0共转染293T细胞,包装病毒。收取病毒上清液,纯化后感染 H9 c2细胞。
