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大鼠pEGFP-C3/BMP-2真核表达载体的构建
目的 通过克隆大鼠的BMP2基因,构建EGFP-C3/BMP2基因的真核细胞表达载体.方法 把大鼠的基因组DNA通过PCR获得BMP2,克隆构建载体pEGFP/C3-BMP2,并将其转化到大肠杆菌里面,后进行重组真核表达载体pEGFP-C3-BMP2的构建和鉴定,并可观察其在真核细胞中的表达.结果 以大鼠总DNA为模板扩增出1 200 bp左右的特异性条带,测序结果与Gene-Bank测序结果相比,翻译成的氨基酸序列相同并完全一致,并可在真核细胞中表达.对重组质粒pEGFP-C3/BMP2进行双酶切鉴定并测序,结果也完全一致.结论 为进一步研究利用BMP2基因修饰骨组织工程骨,促进骨折愈合再生提供实验基础.
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中国汉族人群近视与BMP2基因多态性的关联研究
目的 研究BMP2基因是否是中国汉族人群中低度近视的候选基因,从而寻找与近视关联的致病基因位点,揭示近视眼相关的发病环节.方法 临床病例对照关联研究.于2013年1月至2014年1月在川北医学院眼视光中心收集无相关的中国汉族南方人群(100名正常对照和100例近视患者),利用HapMap基因型数据库选择标签单核苷酸多态位(SNP),采用SNP直接测序法进行基因分型检测.根据样本所得各SNP基因型,计算其基因型与等位基因的频率;采用卡方检验比较病例-对照组之间基因型与等位基因频率分布的差异.结果 共选取3个标签SNP,3个标签SNP (rs7270163、rs2335767、rs1005464)的基因分型结果在对照组和病例组中都符合Hardy-Weinberg平衡检验,人群具有代表性.其中rs 1005464基因分型结果矫正前显示出病例-对照组之间基因型频率与等位基因频率的显著性差异(P分别=0.016及0.005),矫正后仍然显示出与近视有关联(Pc=0.014).结论 BMP2基因SNP点rs1005464与近视发病易感性相关,rs 1005464位点等位基因A可能是近视的一个危险基因,需进一步加大病例对照样本量及遗传标记位点的密度来加以确证.
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IGF-1R基因通过调控BMP2表达影响SMMC7721细胞的增殖和凋亡
背景与目的：胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factor-1，IGF-1)是一种重要的肽类激素，通过与其受体(IGF-1 receptor，IGF-1R)和胰岛素受体(insulin receptor，IR)结合并激活下游信号通路发挥生物学作用，骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins，BMPs)因可促进多种肿瘤细胞的增殖和侵袭而日益成为肿瘤分子研究领域的热点。该研究通过RNA干扰(RNAi)技术沉默IGF-1R基因，探讨其对肝癌SMMC7721细胞中BMP2表达的影响以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法：构建靶向IGF-1R基因的RNAi真核表达质粒，转染至肝癌SMMC7721细胞，用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测IGF-1R和BMP2基因表达抑制效应，MTT实验检测IGF-1R基因沉默后细胞生长曲线，流式细胞术检测IGF-1R基因沉默后细胞凋亡情况。结果：成功构建靶向IGF-1R基因的真核表达质粒， IGF-1R-siRNA-1和IGF-1R-siRNA-2转染至肝癌SMMC7721细胞后，对IGF-1R基因的mRNA抑制效率分别达到68.9%和80.7%(P<0.05)，对BMP2基因的mRNA抑制效率分别达到79.5%和83.3%(P<0.05)，对IGF-1R蛋白表达抑制率分别为46.1%和62.1%，对BMP2蛋白表达抑制率分别为42.5%和60.9%(P<0.05)。根据MTT实验结果，绘制的生长曲线显示，IGF-1R基因沉默后SMMC7721细胞增殖速率明显低于对照组(P<0.05)，细胞凋亡比例高于对照组(P<0.05)。结论：IGF-1R基因沉默表达能介导BMP2基因不同水平下调表达，抑制SMMC7721细胞增殖，并促进细胞发生凋亡。
关键词： IGF-1R基因 BMP2基因 肝癌SMMC7721细胞 细胞增殖 细胞 凋亡 -
六味地黄丸对下颌骨骨折术后相关基因表达的影响
目的 探究六味地黄丸对下颌骨骨折术后相关基因表达的影响.方法 将120例下颌骨骨折的患者分成对照组(60例)和给药组(60例),采用Real-time PCR技术检测与骨生长和骨折愈合过程相关基因TGF-β1、BMP2、CGRP和VEGF基因在给药组相对于对照组中表达情况.结果 TGF-β1、BMP2和VEGF基因在给药组相对于对照组中表达量均有不同程度的增加,而CGRP基因在整个治疗过程中并无明显变化.结论 六味地黄丸对下颌骨骨折手术后的愈合促进作用和TGF-β1、BMP2和VEGF基因的高表达密切相关,为临床中药治疗提供了理论基础.
