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鸟苷酸结合蛋白5和二磷酸腺苷核糖化因子鸟苷酸激酶1基因在肺结核患者和潜伏结核感染人群中的表达研究
目的 探讨鸟苷酸结合蛋白5(GBP5)和二磷酸腺苷核糖化因子鸟苷酸激酶1 (ASAP1)基因在肺结核患者及潜伏结核感染人群中的表达情况.方法 选取2016年8月至2017年5月确诊肺结核患者40例(肺结核组)、潜伏结核感染患者40例(潜伏结核感染组)及健康对照者40例(健康对照组),取入选者外周抗凝血4 ml,应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测这三组人群GBP5、ASAP1基因表达情况.结果 肺结核组、潜伏结核感染组和健康对照组GBP5基因相对表达量分别为1.58 ± 0.80、1.09 ± 0.68和1.04 ± 0.61,差异有统计学意义(F=7.23,P=0.001);肺结核组GBP5基因相对表达量高于潜伏结核感染组(t=2.93,P=0.004)和健康对照组(t=3.40,P=0.010),差异有统计学意义;潜伏结核感染组GBP5基因相对表达量与健康对照组比较差异无统计学意义(t=0.39,P=0.700).三组ASAP1基因表达量比较差异无统计学意义(F=0.26,P=0.770).结论 GBP5基因表达在肺结核患者、潜伏结核感染患者和健康对照者中存在差异,GBP5基因检测可能筛选出潜伏结核感染人群,可作为筛选潜伏结核感染人群的标志物.
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RNA干扰抑制二磷酸腺苷核糖化因子鸟苷酸激酶1基因表达对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭的影响
目的 观察小干扰RNA(siRNA)抑制二磷酸腺苷(ADP)核糖化因子鸟苷酸激酶1基因(ASAP1)表达对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭能力的影响.方法 设计合成靶向ASAP1基因的siRNA,采用阳离子脂质体试剂瞬时转染膀胱癌细胞株T24,利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测RNA干扰(RNAi)后ASAP1基因的沉默效果,评价siRNA设计的合理性及RNAi抑制ASAP1表达的有效性,分别在RNAi后1、2、3d应用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖状态,并绘制生长曲线;应用Transwell法检测各实验组膀胱癌细胞的侵袭能力.结果 靶向ASAP1的siRNA成功抑制膀胱癌细胞株T24中ASAP1 mRNA及蛋白表达,ASAP1-siRNA组mRNA相对表达量为空白对照组的13.5％,蛋白相对表达量为对照组的14.3％;MTT比色法结果显示ASAP1-siRNA组细胞增殖能力显著减弱(P＜0.05),在1、2、3d后重复检测,分别达到了同时间空白对照组的76.3％、59.1％和51.4％;Transwell小室迁移实验结果表明,ASAP1被抑制后,膀胱癌穿膜细胞数明显减少[(49.5±10.4)个比(122.6±14.2)个,P＜0.05],侵袭能力降低.结论 应用siRNA技术能有效抑制ASAP1基因的表达,同时有效抑制T24细胞的体外增殖和侵袭能力.
关键词： 膀胱癌 二磷酸腺苷核糖化因子鸟苷酸激酶1 增殖 侵袭 RNA干扰
