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基质金属蛋白酶-13过表达抑制大鼠肝星状细胞中I型胶原表达
目的 肝纤维化的主要病理变化是细胞外基质的沉积与降解障碍,本研究旨在观察大鼠肝星状细胞过表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)后肝纤维化相关指标的变化.方法 构建含MMP-13全长编码基因的表达质粒,并转染大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),荧光定量PCR与Western blotting方法 分别检测MMP-13、Collagen I基因与蛋白水平的表达.结果 成功构建含MMP-13全长编码基因的表达质粒dl6-95-MMP-13;dl6-95-MMP-13转染大鼠HSC细胞7 d后,荧光定量PCR结果 显示,MMP-13基因转录水平明显增加,而Collagen I在基因转录水平有轻度增加;Western blotting结果 显示转染7 d后,酶原及活化形式的MMP-13表达明显增加,尤其是活化形式的MMP-13;转染后的大鼠HSC中Collagen I蛋白表达明显下降.结论 大鼠HSC高表达MMP-13后显著抑制Collagen I蛋白的表达,其机制主要通过发挥其酶活性降解Collagen I蛋白,而对Collagen I在基因水平的表达无显著影响.
关键词： 星状细胞 肝纤维化 基质金属蛋白酶-13 CollagenI -
糖尿病高糖高脂对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的作用研究
目的 探讨糖尿病高糖高脂状态对四氯化碳(CCl4)诱导的化学性肝纤维化进展的影响.方法 采用高脂饲料及链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,四氯化碳诱导肝纤维化模型,高脂饲料、STZ及CCl4诱导糖尿病合并肝纤维化模型,动态监测各组大鼠体重、血糖及相关血清学指标;HE染色观察各组大鼠的肝脏病理学变化;Western blot、q-PCR检测各组大鼠肝组织中α-SMA和Collagen I的表达.结果与对照组大鼠相比,糖尿病组和糖尿病合并肝纤维化组大鼠体重明显下降,血糖血脂均升高,肝纤维化组无明显差异;HE染色及血清AST/ALT检测表明,与对照组大鼠肝组织相比,糖尿病大鼠、肝纤维化大鼠及糖尿病合并肝纤维化大鼠肝组织均有不同程度的肝损伤,以糖尿病合并肝纤维化组大鼠为严重;3组大鼠肝组织α-SMA和Collagen I表达较对照组也不同程度增加,以糖尿病合并肝纤维化组大鼠为明显,与单纯糖尿病组和肝纤维化组比较,差异有显著性.结论糖尿病可诱发肝损伤,加剧CCl4诱导的大鼠肝纤维化病变.
