首页 > 文献资料
-
乳糖化羧甲基壳聚糖包覆苦参碱脂质体在大鼠体内组织分布研究
目的 研究乳糖化羧甲基壳聚糖包覆的苦参碱脂质体的制备方法并考察其在大鼠体内的组织分布.方法 采用逆相蒸发-短时超声法制备苦参碱脂质体.合成乳糖化羧甲基壳聚糖并用其包覆苦参碱脂质体.采用反相高效液相色谱法测定大鼠组织中的苦参碱浓度.结果 包覆后脂质体的平均粒径无明显变化,Zeta电位由负转正,包封率为51.0%,渗漏率略有降低,包覆前后的脂质体的体外释放均符合Higuchi方程.乳糖化羧甲基壳聚糖包覆的苦参碱脂质体的肝脏AUC值相对于苦参碱脂质体和苦参碱溶液具有显著性差异(P<0.05),包覆后的苦参碱脂质体相对摄取率为肺脏>肝脏>脾脏.乳糖化羧甲基壳聚糖包覆的苦参碱脂质体、苦参碱脂质体和苦参碱溶液肝脏靶向效率分别为28.85%,20.93%和13.31%.结论 与苦参碱溶液和普通脂质体相比,乳糖化羧甲基壳聚糖包覆的苦参碱脂质体可以提高肝靶向性.
-
乳糖化羧甲基壳聚糖的合成及转运质粒DNA的作用
目的探讨乳糖化羧甲基壳聚糖(Lac-CMCS)的合成及其对DNA的转运作用.方法还原胺化法共价连接乳糖和羧甲基壳聚糖(CMCS),并使其与含HBV反义x基因的质粒DNA进行复合,转染细胞进行培养,用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察对细胞内病毒复制的抑制作用.结果制备出的Lac-CMCS共价结合物中乳糖与CMCS的摩尔比为15:1.DNA与Lac-CMCS形成复合物的佳质量比是1:10.此复合物能有效携带药物进入细胞发挥作用,大抑制率达83.6%.结论乳糖化羧甲基壳聚糖在体外能有效转运DNA进入细胞.
-
利用乳糖化羧甲基壳聚糖构建小鼠OX40转基因细胞株
目的利用乳糖化羧甲基壳聚糖(Lac-CMCS)构建小鼠OX40转基因细胞株,探讨Lac-CMCS在HepG2细胞定向转染中的可行性.方法从Con A活化的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR方法,扩增获得编码小鼠OX40分子的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体,测序证实后构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体,利用Lac-CMCS与载体偶联靶向性转染HepG2细胞,G418筛选,RT-PCR法鉴定获得表达OX40分子的阳性细胞株.结果pUCm-T-OX40和pIRES2-EGFP-OX40经PCR、酶切和测序分析,证实插入的目的片段与GenBank记载的小鼠OX40 cDNA序列完全一致.利用Lac-CMCS能将小鼠OX40靶向转染HepG2细胞并获得表达;经G418筛选后获得稳定表达小鼠OX40的细胞株.结论利用Lac-CMCS能够成功将OX40靶向转染入HepG2细胞中.
关键词： OX40 绿色荧光蛋白表达载体 乳糖化羧甲基壳聚糖
