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白藜芦醇诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的线粒体机制
目的探讨白藜芦醇诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的线粒体机制.方法用100 μmol*L-1白藜芦醇分别处理细胞0(对照), 2, 4, 8, 12, 24 h和分别用0, 25, 50,100, 200 μmol*L-1白藜芦醇处理CNE-2Z细胞8 h,采用Western印迹分析Bcl-2, Bax和胞浆中细胞色素C(Cyt C)的蛋白水平变化,罗丹明123荧光染色后经流式细胞术检测线粒体膜电位(△ψm)变化,比色法测定半胱天冬酶-9的活性改变.结果①100 μmol*L-1白藜芦醇处理细胞不同时间,Bcl-2蛋白表达和△ψm减少、胞浆中的Cyt C和半胱天冬酶-9活性增高均呈时间依赖性(P<0.01),但Bax蛋白表达无改变.除Bax以外的其他指标均自白藜芦醇处理2 h即有变化.Bcl-2的蛋白表达受抑和△ψm的丧失在4～8 h间明显(与对照组比较P<0.01),在24 h时已无意义.胞浆中Cyt C水平和半胱天冬酶-9活性在8 h达高峰(分别为0 h的3.0, 5.4倍),24 h时仍明显高于对照组(P<0.01).②细胞经不同浓度的白藜芦醇处理8 h后,Bcl-2的蛋白表达受抑、△ψm的丧失、Cyt C的释放和半胱天冬酶-9活性的升高均具有剂量依赖性(P<0.01),但Bax的蛋白表达未受影响.结论白藜芦醇可能经一个线粒体/半胱天冬酶-9的特定途径诱导CNE-2Z细胞凋亡,但此凋亡过程可能与Bax无关.
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5-脱氧杂氮胞苷对HepG2肝癌细胞恶性表型及caspase-3和bcl-2表达的影响
目的观察5-脱氧杂氮胞苷(5-aza-CdR)对HepG2细胞株生长抑制和凋亡的影响.方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测5-aza-CdR对HepG2细胞的生长抑制;通过Giemsa染色观察细胞贴壁克隆形成率;用流式细胞术分析5-aza-CdR对细胞凋亡的影响;用免疫细胞化学方法检测caspase-3和bcl-2蛋白的表达变化.结果 5-aza-CdR可抑制HepG2细胞株生长,并呈剂量依赖性,第4天时的抑制率大,可达60.2%,细胞贴壁克隆形成率从36.3%下将至17.3%;流式细胞术结果表明8 μmol/L 5-aza-CdR作用第4天凋亡率为10.26%,与对照相比差异有统计学意义;caspase-3蛋白表达明显增加,而bcl-2蛋白表达则明显下调.结论 5-aza-CdR可抑制HepG2细胞增殖并能促进凋亡,其机制可能是通过恢复某些抑癌基因表达,上调caspase-3蛋白并下调bcl-2蛋白表达.
关键词： 肝肿瘤 5-脱氧杂氮胞苷 HepG2 蛋白Caspase-3 蛋白Bcl-2 -
菟丝子黄酮对雷公藤多苷损伤雄性幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白Bcl-2和蛋白Bax表达的影响
目的:研究菟丝子黄酮对雷公藤多苷(GTW)损伤雄性SD幼鼠睾丸组织凋亡相关蛋白蛋白Bcl-2和蛋白Bax的表达的影响.方法:健康3周龄SD雄性幼鼠36只,随机分为三组:空白组、雷公藤多苷组、菟丝子黄酮+雷公藤多苷组.免疫组化法测定Bcl-2/Bax表达.结果:各实验组Bcl-2蛋白表达:雷公藤多苷组表达少,与其他各组之间比较(P＜0.05)差异有统计学意义.空白组表达高,菟丝子组次之,空白组与菟丝子组之间比较(P＞0.05)差异没有统计学意义.各实验组Bax蛋白表达:雷公藤多苷组表达高,与其他各组之间比较(P＜0.05)差异有统计学意义.空白组表达少,空白组与菟丝子组之间比较(P＜0.05)差异有统计学意义.结论:菟丝子黄酮能增强雄性幼鼠生育能力,其机制可能是对抗雷公藤多苷所致雄性幼鼠睾丸组织Bcl-2蛋白表达减少和Bax蛋白表达增强.
