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甲胺对兔心血管内皮的慢性毒性
目的 探讨甲胺在体内慢性分布是否导致氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)活性上调从而诱导心血管内皮损伤.方法 新西兰兔灌胃给予甲胺100 mg·kg-1,每日1次,连续6个月,隔周称量体重调整给药量.分析动脉血中循环内皮细胞数、血清NO浓度和主动脉内皮细胞的超微结构.高效液相色谱法检测血浆SSAO活性及甲醛浓度.结果 甲胺组兔动脉血中内皮细胞数、血清NO浓度、血浆SSAO活性及甲醛浓度明显增高.主动脉内皮细胞超微结构显示核内大量包函体、核浓缩和核分裂等病理形态学改变.结论 低剂量甲胺在体内慢性分布能够诱导SSAO活性上调而引起心血管内皮损伤.
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氨基脲敏感胺氧化酶对弓形虫感染小鼠组织器官毒性作用研究
[目的]以真核单细胞微生物弓形虫为实验对象研究氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)的细胞毒性作用. [方法]通过腹腔注射和脂肪组织感染途径小鼠感染来自腹腔液传代弓形虫,6 d后,取脂肪组织制备组织切片并进行HE染色,观察脂肪组织病变及弓形虫在脂肪组织的存在情况,并采用酶联分光光度法检测小鼠脏器组织SSAO的活性.根据弓形虫P1基因设计引物,通过PCR方法检测脂肪组织、肝脏、脾脏、肺和脑各组织弓形虫的感染情况. [结果]腹腔注射组小鼠脂肪细胞病变严重,且发现有大量弓形虫存在,脂肪组织注射组小鼠非注射处脂肪组织结构基本正常,且没有检测出弓形虫感染,而其他组织器官检测到大量弓形虫感染.与其他组织器官相比较,小鼠脂肪组织中SSAO的活性高. [结论]脂肪细胞由于表达大量SSAO其分解底物后对真核生物的细胞感染具有毒性作用,这可能与SSAO所致血管内皮细胞损伤从而引起的动脉粥样硬化的产生与发展有着内在的联系.
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SSAO及其抑制剂氨基脲在3T3-L1分化过程中对葡萄糖转运的影响
氨基脲敏感胺氧化酶可以氧化伯胺,主要表达于脂肪细胞,参与包括葡糖糖转运和脂肪转化多种细胞过程,高活性水平的氨基脲敏感胺氧化酶与糖尿病,动脉粥样硬化和中风等疾病有关,因此,研究氨基脲敏感胺氧化酶和它的抑制剂作为治疗靶点正逐渐成为热点.
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酶联分光光度法测定3T3-F442A分化细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶的活性
测定3T3-F442A细胞分化成脂肪细胞的过程中,细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶(Semicarbazide-sensitive amine oxidase, SSAO)活性的变化情况,用于SSAO病理生理学功能的研究.3T3-F442A细胞在分化的不同天数内,收集细胞,超声波破碎后制备SSAO初提物.用分光光度法研究酶活性的基础上加入一种氧化酶,即采用酶联分光光度法分别研究细胞分化不同时间所表达的SSAO活性.结果显示,体外3T3-F442A细胞在分化过程中,SSAO在细胞内的表达呈曲线上升趋势.分化前细胞内几乎检测不到SSAO的存在,分化的第3 d只能检测到少量SSAO,此后,SSAO的表达呈急剧上升趋势,细胞分化后的第6～7 d SSAO活性达到高峰.
关键词： 3T3-F442A细胞 氨基脲敏感胺氧化酶 分化 酶联分光光度法 -
脂多糖诱导急性肺损伤过程中SSAO酶的活性变化
背景与目的:探讨SSAO酶在脂多糖诱导急性肺损伤过程中的活性变化.材料与方法:将15只雄性成年新西兰兔随机分为模型A组、模型B组和对照组,每组5只.模型组通过气管插管直接给予脂多糖2 mg/kg,其中A组在给药后48 h与对照组均用于制作肺组织HE切片;B组用于动物体征观察、外周血白细胞计数和SSAO酶活性检测,并对给药前、后各指标的变化进行比较.结果:模型组给药后外周血白细胞数目和肺组织HE染色等炎症指标与对照相比均有明显变化,SSAO酶活性在给药后的16 h酶活性迅速上升至高,然后在48 h逐渐下降至低点,其升高或降低幅度,较给药前均有统计意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:采用气管直接插管法给予脂多糖的造模方法稳定可靠,在产生急性肺损伤过程中会导致外周血SSAO酶活性明显的规律性波动.
