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超氧阴离子和过氧化氢对抗辐射菌增殖的影响
目的探讨不同浓度的超氧阴离子(O-2)和过氧化氢(H2O2)与抗辐射菌(Dr)增殖的关系.方法利用细胞色素C还原法测定正常状态下和受不同剂量照射后Dr的O-2释放,加入还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶抑制剂DPI,观察在同样条件下Dr的O-2释放和增殖的变化.利用激光共聚焦显微镜测定受照后Dr内H2O2浓度变化.用3H-TdR掺入法测定上述条件下Dr的增殖.结果Dr中O-2、H2O2的释放与其增殖有关,较小剂量(＜1 kGy)照射能刺激Dr增殖并释放O-2、H2O2,较大剂量下该效应被抑制.结论适当浓度的O-2、H2O2对于Dr的增殖是必要的.
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抗辐射微球菌KD8301和KH3111的特性
抗辐射菌Dr对γ射线辐射、紫外线照射、化学制剂均具有很强的辐射抗性,采用集落法、3H-TdR掺入法,测试Dr KD8301、KH3111和E.Coli JM109的剂量效应曲线,分析它们的辐射耐受性.目前已进行了大量而极重要的研究,普遍认为Dr的辐射耐受性缘自于该菌属具有高水平的耐辐射基因.笔者首先对Dr菌KD8301,KH3111的抗辐射特性进行研究,确定其抗辐射的程度,根据剂量-效应曲线计算出几个主要的参数值Do、Dq等,以分析抗辐射特性和主要参数之间的相互关系.
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γ-射线对抗辐射菌抗氧化酶活性的影响
目的研究不同剂量60Co γ-射线作用后抗辐射菌中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性的变化,与不同剂量60Co γ-射线照射后大肠杆菌中这两种酶活性变化相比较,探讨SOD、CAT与抗辐射菌辐射抗性的相关性.方法应用单胺氧化法和钼酸铵法分别测定SOD和CAT活性,用Bradford法测定蛋白质含量.结果未受照射时抗辐射菌的CAT和SOD活性大于大肠杆菌中这两种酶的活性(P＜0.01);当受到不同剂量的γ-射线作用后,抗辐射菌中这两种酶的活性随着剂量的增加出现先升高后降低的趋势,而大肠杆菌受照后这两种酶活性几乎均呈下降趋势.并且受照后抗辐射菌中这两种酶的活性均高于大肠杆菌(P＜0.01).结论抗辐射菌的抗氧化能力高于大肠杆菌.
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RecA激活的抗辐射菌LexA蛋白降解及其在碱性条件下的诱导降解
目的研究在碱性条件下LexA蛋白的降解,观察D.radiodurans(抗辐射菌)LexA在两种条件下的降解反应.方法采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法,用考马斯亮蓝R-250染色.结果 37℃时,LexA蛋白在pH 7.0及pH 8.0时不发生分解反应;pH 9.0时完整的LexA蛋白量略有减少;pH 10.0时,LexA蛋白大量分解,电泳带可见明显的蛋白片段.结论高pH值条件下D.radiodurans LexA蛋白在37℃发生降解.其对碱性pH条件的依赖提示了降解的激活需LexA蛋白离子化基因的去氢离子反应.
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抗辐射菌DNA结合蛋白的氨基酸序列分析
目的对抗辐射菌D.radioudurans的DNA结合蛋白(DBP)进行N-末端氨基酸(AA)序列分析,探讨其抗辐射分子学组成的特性.方法采用地高辛(DIG)标记染色体DNA作为探针,South-Western印迹法检测DBP,在N-端AA自动序列仪上分析AA序列.结果野生型抗辐射菌存有8种DBP的特性蛋白(分子量分别为122、93、33、29、16、15、14和12kd);AA序列分析发现其中93kd和33kd可能为新的蛋白质;两种新DBP的表达水平随不同培养基和培养时间而变化.结论抗辐射菌的DBP,尤其是93kd和33kd的DBP与其辐射耐受性可能有密切关系.
关键词： 抗辐射菌 D.radiodurans DNA结合蛋白 氨基酸序列 辐射耐受性
