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EC2文献资料
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人CD81胞外大环在大肠杆菌中的克隆表达及活性研究
目的:构建人CD81分子胞外大环(EC2)的原核表达质粒,并研究胞外大环同HCV E2蛋白的结合性能.方法:从人外周血淋巴细胞中经RT-PCR克隆出CD81胞外大环序列,插入原核表达载体pBVIL1中,构建表达质粒pBVIL1-EC2并在大肠杆菌中表达.表达产物经纯化后用间接ELISA法测定同E2蛋白的结合能力.结果:经序列测定证明,CD81分子胞外大环正确插入载体.融合蛋白得到高效表达,以包涵体形式存在,经Q-Sepharose FF阴离子交换柱得到有效纯化.初步结果表明,重组CD81胞外大环能同原核表达的截短的HCV E2(384-661)蛋白结合.结论:本研究为进一步研究CD81同E2及HCV的相互作用和制备抗EC2单克隆抗体奠定了基础.
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人CD81胞外区EC2基因的克隆和原核表达
CD81是一种跨膜的非糖基化蛋白.在人类和黑猩猩中,CD81胞外区EC2区氨基酸序列高度保守.CD81可影响细胞的粘附、激活、增殖和分化,改变细胞形态及抑制合胞体形成等生物学功能[1].近年研究发现,CD81可能作为HCV的受体引导病毒进入细胞内[2].进一步研究发现,CD81胞外区EC2是CD81与HCV E2相互作用的部位,是HCV感染的关健因素[3].目前,CD81的功能及作用机制尚有待进一步研究,我们采用分子生物学技术,构建了CD81胞外区EC2原核表达载体,为今后进一步研究CD81与HCV感染的关系奠定了基础.
