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糖多孢红霉菌bldD基因提高活跃链霉菌诺西肽产量的研究
目的 将糖多孢红霉菌bldD基因转入活跃链霉菌(Streptomyces actuosus)N-H,探讨其对诺西肽产量的影响.方法 将bldD基因连接到链霉菌整合型表达载体pZMW上构建pZMW-bldD质粒,利用PEG介导的原生质体转化方法将重组质粒pZMW-bldD及对照质粒pZMW-vgb分别导入活跃链霉菌,通过对枯草芽孢杆菌抑菌试验和分光光度计法测定发酵液中诺西肽产量.结果 成功构建了活跃链霉菌N-H/pZMW-bldD工程菌株及对照菌株N-H/pZMW-vgb.与出发菌株N-H相比,N-H/pZMW-bldD菌株诺西肽产量提高了68%;与对照菌株N-H/pZMW-vgb相比,N-H/pZMW-bldD菌株诺西肽产量提高了19%.结论 在活跃链霉菌中导入糖多孢红霉菌bldD基因可以提高诺西肽产量,其作用效果较 vgb基因更为明显,说明bldD基因对抗生素产量的提高具有广谱性.
关键词： 活跃链霉菌 糖多孢菌属bldD基因 诺西肽 抗菌药 -
诺西肽产生菌的菌种选育
目的 对诺西肽产生菌进行菌种选育.方法 自然分离、物理和化学诱变育种(其中包括紫外线诱变和NTG 诱变)的方法.结果 选定了出发菌株;考察得到紫外线和NTG 对出发菌株进行诱变的佳剂量;出发菌株经几次诱变得到诱变菌株.结论 终得到的诱变菌株其诺西肽的产量是出发菌株的3 倍.
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诺西肽产生茵活跃链霉菌的原生质体制备与再生
目的 研究诺西肽产生菌活跃链霉菌的原生质体制备与再生的适条件.方法 使用溶菌酶脱去细胞壁制备原生质体,并考察原生质体制备和再生的各种影响因素.结果 确定了原生质体制备的条件:一级培养采用种子培养基,培养30 h,转种量的体积分数为5%;二级培养采用R2YE培养基,培养时间为32 h,适甘氨酸质量浓度为6.0 g·L-1,佳溶菌酶质量浓度为1.5 g·L-1,酶解时间为60 min,原生质体再生率达到5.3%.结论 上述条件为活跃链霉菌原生质体制备与再生的适条件,该条件的建立为活跃链霉菌原生质体的诱变育种奠定了基础.
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兽用抗生素诺西肽(nosiheptide)的研究进展
诺西肽(nosiheptide)是我国近年批准使用的兽用抗生素,由于其具有显著的抑制革兰氏阳性细菌、促进动物生长、在动物体内无残留等特点,因而作为饲料添加剂在畜牧业得到了越来越广泛的应用.文章就其理化性质,作用机制,生物合成途径,生物合成基因克隆,菌种选育与发酵工艺研究,检测方法,提取与精制等方面国内外研究的状况分别进行了综述.
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喷雾干燥法制备诺西肽掩味微囊的研究
目的 探索喷雾干燥法制备诺西肽微囊的佳掩味工艺.方法 以干粉得率、包封率、掩味效果、吸湿性作为指标,采用正交设计法确定佳喷雾干燥工艺参数.结果 佳工艺参数为:进风温度185 ℃,进料速度600 mL·h-1,压缩空气压力0.5 mPa.结论 该工艺合理,诺西肽微囊质量达到预期要求,产品稳定性好,为工业化生产提供了实验依据.
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噻唑肽类抗生素研究进展
多数噻唑肽类抗生素能与细菌的50s核糖体亚基相结合抑制其蛋白质的合成,有些还能抑制肾索-血管紧张素系统.产生抗性的链霉菌可以合成一种甲基转移酶,将自身的23S rRNA 1067位点上的腺苷2'-OH转化成2'-CH3,阻碍噻唑肽类抗生素与50s核糖体亚基结合.通过研究噻唑肽类化合物生物合成基因发现,产生该类抗生素的劳伦链霉菌和活力链霉菌中均含有编码非核糖体合成酶的基因.因此噻唑肽类化合物极可能是由非核糖体肽合成酶(NRPS)根据巯基模板机制装配而成.本文重点就噻唑肽类化合物的作用机制、抗性机制以及合成途径的研究进展进行综述.
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游动放线菌PDF-1代谢产物中抗耐药菌株活性成分研究
目的 从一株游动放线菌Actinoplanes sp.PDF-1发酵液中分离抗多种耐药细菌的活性化合物.方法 通过活性追踪,利用多种色谱技术手段,结合现代波谱学方法分离鉴定化合物结构.结果 从Actinoplanes sp.PDF-1的发酵产物中分离纯化得到6个化合物,诺西肽(Nosiheptide,1)、2′-脱氧胸腺嘧啶核苷(2′-Deoxythy nidine,2)、2′-脱氧胞嘧啶核苷(2′-Deoxycytidine,3)、胡萝卜苷(Daucosterol,4)、邻氨基苯甲酸(2-Aminobenzoic acid,5)和Nb-乙酰基色胺(Nb-Acetyltryptamine,6).结论 从 Actinoplanes sp.PDF-1的发酵产物中分离纯化得到6个化合物,其中化合物1为抗耐药细菌的主要活性成分.
