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氧化还原信号转导抑制剂对人晶状体上皮细胞增殖的调控作用
目的 观察过氧化氢酶、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)、二碘基苯(DPI)、AACOCF3四种氧化还原信号转导抑制剂对人晶状体上皮细胞(HLEC)SRA 01/04细胞增殖的作用.方法 为实验研究.取5～10代SRA 01/04细胞逐步降低血清浓度,在无血清培养液中培养2 h,分别用过氧化氢酶、NAC、DPI、AACOCF3预处理细胞30 min后,给予EGF 20μg/L或bFGF 20μs/L,48 h后检测3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入量,计数活细胞数.在短期实验中,抑制剂只作用于细胞30 min;长期实验中,抑制剂共作用48.5 h.采用单因素方差分析对不同浓度EGF、bFGF对细胞增殖作用的样本均数进行统计.抑制剂对细胞增殖作用的实验设计属于非平衡多因素组合设计,采用拆分组别法进行统计分析.其中对照组与生长因子组间比较采用独立样本t检验,生长因子组与不同抑制剂组间比较采用单因素方差分析,不同抑制剂的不同浓度间比较采用嵌套设计定量资料方差分析.结果 作用30 min(短期实验)和作用48.5 h(长期实验),四种抑制剂都能显著抑制EGF或bFGF引起的细胞增殖.在EGF刺激下的短期实验中,105U/L过氧化氢酶,0.5 mmol/L NAC,0.1 izmoL/L DPI或0.5μmol/LAACOCF3预处理细胞30 min可以使EGF引起的细胞DNA合成分别减少18.0%(t=6.132,P<0.01),24.6%(t=6.188,P<0.01),28.5%(t=6.386,P<0.01)和16.4%(t=3.705,P=0.001).在EGF刺激下的长期实验中,能抑制细胞增殖的低浓度低于短期实验需要的低浓度,分别为5×104U/L过氧化氢酶,0.2 mmol/L NAC,0.01 μmol/L DPI和0.1μmol/L AACOCF3.短期实验及长期实验中抑制剂的作用强度均有剂量依赖性.相同浓度下,长期实验的抑制效果强于短期实验.在bFGF刺激下的短期实验及长期实验中得到了相似的结果.结论 氧化还原信号转导对HLEC SRA01/04增殖有重要的调控作用,阻断活性氧的产生或清除细胞内的活性氧能显著抑制LEC增殖.
