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  • HIV/AIDS病人CD4+、CD8+ T淋巴细胞检测结果与标本存放时间的相关性研究

    作者:朱晓娟;吴晓芳;徐德顺;沈月华;查赟峰

    目的 研究血样处理前后的存放时间,对艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(简称HIV/AIDS病人)CD4+、CD8+T淋巴细胞(简称CD4、CD8细胞)检测的影响.方法 选取2013年新确证的HIV/AIDS病人119例,其抗凝全血室温放置6、24、48、72小时用FACSCalibur流式细胞仪分别检测CD4、CD8细胞绝对数,在样品处理后4℃放置0、24、48、72小时再上机检测C D4、CD8细胞绝对数;结果用EPI INFO软件进行统计学分析.结果 抗凝全血存放24、48、72小时,与存放6小时相比,CD4、CD8细胞绝对数变化均无差异(P>0.05);血样处理后存放24、48、72小时,其CD4细胞数与存放0小时相比变化无差异(P>0.05),而血样处理后存放48小时,其CD8细胞数变化差异有统计学意义(P<0.05).结论 抗凝全血在室温放置72小时,检测CD4、CD8细胞结果是可靠的,所以血样采集后放置时间可延长至72小时,处理过的血样在4℃放置72小时,虽然CD4细胞结果是可靠的,但CD8细胞却发生了明显变化,其二者比例也将随之发生变化,故处理后的样品应在24小时内完成检测.

  • 联合应用棕榈酰化肽与聚肌胞对黑色素瘤特异性CD8+T细胞的影响

    作者:王自力;孙立军;张念海;张帆;王日雄;谢贤和

    目的:探讨联合应用棕榈酰化肽与聚肌胞(poly IC )对肿瘤特异性CD8+ T 细胞的影响。方法15只C57BL/6小鼠随机分为5组(每组3只):对照组(仅给予PBS )、线性肽(g p10025‐33,黑色素瘤特异性CD8+ T细胞表位)组、线性肽+poly IC组、棕榈酰化肽组、棕榈酰化肽+poly IC组。经肌内注射免疫小鼠后,取得外周血及脾组织,通过流式细胞仪分析黑色素瘤特异性CD8+ T细胞数量,通过Elisa及Elispot法分析疫苗活化的CD8+ T细胞体外对黑色素瘤细胞的识别。取15只荷黑色素瘤C57BL/6小鼠,监测不同方法免疫后皮下肿瘤的大小。结果与线性肽+poly IC组比较,棕榈酰化肽与poly IC联合应用显著增加外周血gp10025‐33特异性CD8+ T 细胞的数量[(23.53±5.398)% v s(1.158±0.239)%,P=0.014],且内源性CD8+ T 细胞可以识别黑色素瘤细胞并显著抑制皮下肿瘤生长(P<0.001)。结论联合应用棕榈酰化肽与poly IC可促进黑色素瘤特异性CD8+ T细胞的免疫应答,从而显著抑制肿瘤生长。

  • 多种炎性疾病患者外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞的检测与临床意义分析

    作者:王詝;曹炬;张莉萍

    目的:探讨恶性肿瘤、肺结核、干燥综合征、葡萄膜炎等多种炎性疾病患者外周血CD4+和CD8+淋巴细胞的变化及其临床意义。方法应用BD FACSCanto II流式细胞仪检测上述疾病患者外周血CD4+、CD8+ T细胞并计算两者比值,同时检测健康者标本20例作为健康对照组,进行统计分析。结果与健康对照组比,恶性肿瘤组CD4+ T淋巴细胞、CD4+/CD8+均明显降低,CD8+ T淋巴细胞增高,差异有统计学意义( P<0.05);全身炎性反应综合征组CD4+ T淋巴细胞、CD4+/CD8+均明显降低,CD8+ T 淋巴细胞增高,差异有统计学意义( P<0.05);葡萄膜炎组CD8+ T淋巴细胞增高,差异有统计学意义(P<0.05);肺结核组CD4+ T淋巴细胞降低,差异有统计学意义( P<0.05)。结论患者的 CD4+、CD8+ T 淋巴细胞异常,表明机体细胞免疫功能异常。流式细胞仪检测CD4+、CD8+ T淋巴细胞可以作为患者临床免疫功能的初步诊断指标,辅助疾病治疗和病情观察。

  • 慢性乙型肝炎病毒感染患者外周血特异性CD8+T淋巴细胞检测的临床意义

    作者:吴月平;张红春;韩刚;沈张平;宋健辉;季沈杰;陈琳

    目的研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血特异性CD8+ T淋巴细胞(CTL)频率的变化及临床价值。方法采用乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)18-27表位肽-人类白细胞抗原(HLA)-A*0201五聚体及CD8单克隆抗体,设计流式细胞技术检测 HLA-A2+6例、HLA-A2-12例非HBV感染者、HLA-A2+49例和HLA-A2-42例 HBV 感染者外周血中针对该肽段的特异性 CTL 数量,占总计数 CD8+细胞数百分比表示。结果 HLA-A2-HBV感染未抗病毒治疗者特异性CTL(0.30%~14.40%,中位数1.13%,n=20)与 HLA-A2-非HBV感染者(0.33%~3.90%,中位数1.04%,n=12),差异无统计学意义(P>0.05),但显著低于 HLA-A2-抗病毒治疗者(0.25%~20.30%,中位数2.11%,n=22,P<0.05);HLA-A2-抗病毒治疗者特异性CTL和 HLA-A2+未抗病毒治疗者特异性CTL(0.20%~29.90%,中位数2.22%,n=20)均显著高于HLA-A2-非HBV感染者(P<0.01);HLA-A2+抗病毒治疗者特异性CTL(0.14%~39.22%,中位数1.33%,n=29)显著高于 HLA-A2-非 HBV感染者(P<0.05)。HLA-A2+未抗病毒组中血清 HBV DNA<103 copy/mL、丙氨酸氨基转移酶小于40 U/L者特异性CTL频率增高(P<0.05、0.01)。结论 HBV抗原肽-HLA-A*0201五聚体流式细胞技术能在体外直接检测外周血HBV特异性CTL频率的变化,其水平一定程度反映不同临床感染状态慢性 HBV感染患者 T淋巴细胞对特异性抗原表位免疫应答的差异。

  • 叉头蛋白3在鼻咽非角化性鳞状细胞癌组织中的表达及意义

    作者:张志兴;马韵;刘懿霄;徐华

    目的观察叉头蛋白3(FoxP3)在鼻咽非角化性鳞状细胞癌中的表达情况,以探讨调节性T(Treg)细胞在鼻咽癌发生、发展中的意义。方法通过免疫组织化学(S P )法检测Fo x P3在57例鼻咽非角化鳞状细胞癌和22例鼻咽部黏膜慢性炎症中的表达情况及CD8在鼻咽癌中的表达。结果在鼻咽癌组中FoxP3阳性Treg细胞数(105.05±52.22)显著高于鼻咽部黏膜慢性炎症(6.35±6.06),二者的差异有统计学意义(P<0.05)。FoxP3阳性Treg细胞的数量与患者性别及肿瘤分化程度有关(P<0.05)。结论在鼻咽非角化鳞状细胞癌中,FoxP3阳性Treg细胞的增殖可能抑制机体的抗肿瘤免疫功能,并为肿瘤细胞的免疫逃逸提供良好的环境。

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