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EZH2基因在妇科恶性肿瘤中的研究进展
果蝇Zeste基因增强子人类同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)是近年来肿瘤领域研究的热门靶点基因,其在人类多种恶性肿瘤中表达增高,与肿瘤的发生、发展及预后密切相关.EZH2可通过表观遗传修饰调节抑癌基因表达、激活肿瘤相关信号通路和干扰DNA损伤修复等方式,促进细胞的增殖、迁移和侵袭,从而促进肿瘤的发生.近年来,愈来愈多研究表明EZH2与妇科恶性肿瘤关系密切,可作为治疗妇科恶性肿瘤的潜在靶基因.
关键词： 果蝇Zeste基因增强子人类同源物2 作用机制 恶性肿瘤 -
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EZH2基因对人食管癌细胞增殖的影响
目的:探讨过表达或沉默果蝇Zeste基因增强子人类同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因对食管癌细胞增殖的影响.方法:选用人食管癌细胞株ECA 109、TE1、KYSE30、KYSE 170作为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blotting法分别检测食管癌细胞EZH2mRNA和蛋白的表达水平,然后采用qPCR检测过表达和沉默EZH2基因后对4株食管癌细胞EZH2mRNA的表达变化;CCK-8增殖实验、克隆形成实验检测过表达和沉默EZH2基因及EZH2抑制剂DZNep(3-deazaneplanocin A)处理对食管癌细胞增殖能力和克隆形成率的影响.结果:食管癌ECA 109、TE1细胞中EZH2 mRNA和蛋白水平明显高于KYSE30、KYSE 170细胞(P＜0.05).食管癌TE1、ECA 109细胞转染EZH2-ShRNA后EZH2表达水平下调(均P＜ 0.05)、细胞增殖能力降低(1.07±±0.08 vs 1.59±±0.09,P＜0.05;0.88±0.08 vs 1.05±0.11,P＜0.05)、克隆形成数下调[(200.00±11.43) vs (480.00±±13.10)个,P＜0.05;(88.00±±8.16) vs (220.00±±±14.69)个,P＜0.05].KYSE30、KYSE 170细胞转染EZH2过表达质粒后EZH2表达水平升高(均P＜0.05)、细胞增殖能力显著增强(1.06±0.07 vs 0.76±0.06,P＜0.05;3.36±±0.30 vs 1.50±0.08,P＜0.05)、克隆形成数显著升高[(45.00±3.27) vs (18.00±±1.63)个,P＜0.05;(65.00±4.08) vs (23.00±±2.45)个,P＜0.05];DZNep处理后,ECA109和TE1细胞增殖能力降低(均P＜0.05)、克隆形成数下降(均P＜0.05).结论:EZH2基因能有效促进食管癌细胞的增殖和克隆形成能力,为深入研究EZH2作为食管癌治疗的新靶点提供了实验研究基础.
关键词： 食管癌 果蝇Zeste基因增强子人类同源物2 DZNep 细胞增殖 -
RNA 干扰抑制 EZH2基因表达对人胶质瘤细胞凋亡及对卡莫司汀敏感性的影响
目的：观察RNA干扰技术抑制EZH2基因表达对人胶质瘤U251细胞凋亡及其对卡莫司汀敏感性的影响。方法针对EZH2 mRNA序列设计合成小干扰RNA（ siRNA）的DNA模板，构建pRNAT-EZH2重组表达载体，并用其转染人胶质瘤U251细胞。用RT-PCR法检测pRNAT-EZH2转染前后U251细胞中内源性EZH2表达；激光共聚焦显微镜观察转染后及加入卡莫司汀后U251细胞凋亡情况；MTT法检测转染前后U251细胞对化疗药物卡莫司汀敏感性；用分光光度法检测转染前后以及加入卡莫司汀后U251细胞中Caspase-3活性。结果成功构建pR-NAT-EZH2重组质粒，并成功转染U251细胞。 pRNAT-EZH2重组质粒转染后U251细胞中EZH2 mRNA表达量降低（ P＜0．01）；卡莫司汀组及卡莫司汀加pRNAT-EZH2组U251细胞凋亡明显；与卡莫司汀联合时，pRNAT-EZH2组U251细胞生长抑制率明显增高（P＜0．01）；Caspase-3活性明显高于空白对照组和阴性对照组（P均＜0．01）。结论 pRNAT-EZH2可抑制EZH2在人胶质瘤U251细胞中的表达，并增强U251细胞对卡莫司汀敏感性。
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果蝇EZH2与乳腺癌分子分型及临床病理特征的关系
目的 探讨果蝇Zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)与乳腺癌分子分型及临床病理参数的关系.方法 根据新型乳腺癌分子分型标准,将乳腺癌进行分子分型;免疫组织化学方法检测乳腺癌组织石蜡切片中EZH2的表达;采用χ2检验分析EZH2表达与乳腺癌新型分子分型,以及临床病理参数之间的关系;采用Kaplan-Meier法分析EZH2表达与乳腺癌患者无病生存率(DFS)的关系.结果 13例管腔上皮A型乳腺癌患者中,3例为EZH2高表达(23.08%);10例管腔上皮B型乳腺癌患者中,5例为EZH2高表达(50.00%);7例人表皮生长因子受体2过表达型乳腺癌患者中,3例为EZH2高表达(42.86%);12例三阴性型乳腺癌患者中,10例为EZH2高表达(83.33%).乳腺癌各分子亚型间EZH2表达的比较,差异有统计学意义(P<0.05).EZH2高表达与EZH2低表达患者DFS比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 EZH2可能是预测乳腺癌预后的指标之一.
关键词： 果蝇Zeste基因增强子人类同源物2 乳腺癌 分子分型 免疫组织化学
