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琼脂糖凝胶电泳、毛细管电泳及高分辨熔解曲线技术在α-地中海贫血新生儿筛查中的应用
目的 比较毛细管电泳与琼脂糖凝胶电泳2种方法在α-地中海贫血(α-地贫)新生儿筛查中的应用价值；探讨新生儿脐血Hb Bart's水平与α-地贫基因型的关系；探讨高分辨熔解曲线(high resolution melting,HRM)技术用于筛查非缺失型α-地贫的可行性.方法 对1442例新生儿脐血样本同时采用琼脂糖凝胶电泳及毛细管电泳技术进行血红蛋白定量分析,将其中任意一种方法检出Hb Bart's区带(其中毛细管电泳技术Hb Bart's定量低为0.1％)的样本全部挑出进行Gap-PCR,若样本未检出异常则进一步行HRM分析,随后进行反向点杂交和基因测序.同时对2种电泳Hb Bart'ss均为阴性的样本进行2种常见静止型α地贫基因(-α3.7、-α4.2)的分子筛查.结果 1442例样本中,2种电泳方法HbBart's均为阳性的样本为151例,基因确诊150例.4例琼脂糖凝胶电泳检测Hb Bart's阳性而毛细管电泳检测Hb Bart's阴性的样本,基因检测未见异常.7例琼脂糖凝胶电泳检测Hb Bart't' s阴性而毛细管电泳检测Hb Bart's阳性的样本,基因检测均为静止型α-地贫.1280例两种电泳Hb Bart's均为阴性的样本检出10例静止型α-地贫.HRM技术将3种常见非缺失型α-地贫全部检出.结论 与琼脂糖凝胶电泳相比,毛细管电泳技术定量分析Hb Bart' s更为简便、准确.脐血Hb Bart's的含量随着α-基因缺陷的个数的增加而升高,其中α+-地贫中不同基因型的Hb Bart's水平亦存在差异.新生儿脐血毛细管电泳Hb Bart's含量0.1％应作为区分正常人与α-地贫携带者的指标.HRM技术可作为非缺失型α-地贫(尤其是αCSα和αQSα)的一种筛查方法.
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高分辨率熔解曲线分析技术在非缺失型α-地中海贫血新生儿筛查中的前瞻性应用
目的:验证高分辨率熔解曲线分析技术(HRM技术)用于筛查非缺失型α-地中海贫血的可行性.方法:应用全自动毛细管电泳技术对6 525例新生儿脐血进行血红蛋白定量分析,将Hb Bart's含量在0.1％ ～2.5％的样本挑出,排除3种常见缺失型α-地贫基因(--SEA、-α 3.7、-α4.2)后剩下的样本,用HRM技术分别对α-基因的3个外显子进行扫描后对这些样本进行基因确诊.结果:所有28例非缺失型α-地中海贫血全部被检出.结论:HRM技术可作为非缺失型α-地中海贫血的一种筛查方法,且具有准确、高效、低成本的优点.
关键词： 非缺失型α-地中海贫血 Hb Bart's 高分辨熔解曲线技术 突变
