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糖尿病患者背痈引流液中同时检出具核梭杆菌、微小消化链球菌和化脓隐秘杆菌一例
患者男,63岁,患糖尿病10年,7 d前发现右侧背部一包块,伴疼痛,于2009年7月6日入院.查体:神智清,查体合作,右侧背部见一约16 cm×16 cm包块,外观红肿,触之有波动感,压痛明显,体温36.5℃,血压130/80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa).
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具核梭杆菌与结直肠疾病相关性研究进展
肠道微生物在结直肠疾病发生发展过程中起着至关重要的作用,具核梭杆菌(Fn)作为肠道共生菌群与结直肠疾病具有密切关系,受到越来越多的关注.研究发现具核梭杆菌可促进肠道炎症及肿瘤的进展并且影响疾病的预后.本文就近年来具核梭杆菌致病机制及其对结直肠疾病影响的相关研究进展进行综述.
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具核梭杆菌外膜FomA蛋白的获得及其免疫原性研究
目的 检测具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)的主要外膜孔道FomA蛋白的免疫原性、免疫水平以及对牙龈组织的免疫效果,为研究以FomA蛋白为靶点预防及治疗牙周感染的可行性提供理论依据.方法 应用基因重组技术,使用大肠杆菌表达系统表达并获取纯化的FomA蛋白,将50 μg该蛋白或50 ml磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)通过皮下注射方式免疫C57小鼠(随机数字法分组,每组各10只),在小鼠血清中检测FomA特异性抗体表达情况,比较组间差异,评估FomA蛋白的免疫原性.再将上述小鼠分成FomA Fn组、FomA Fn+牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)组、PBS Fn组、PBSFn+Pg组,分别使用Fn菌悬液或Fn与Pg混合菌悬液制备牙周脓肿模型(PBS为相应FomA组的对照组),对小鼠牙龈脓肿评分,酶联免疫吸附测定法测定小鼠血清和牙龈组织中白介素(interleukin,IL)1β的浓度,比较上述指标的组间差异,评价FomA蛋白的免疫效果.结果 通过基因重组技术成功获取1.0～1.5 g FomA蛋白,将该蛋白皮下注射免疫小鼠后,小鼠血清中均可检测到FomA特异性抗体,该抗体效价在二次免疫后2周达峰值.利用牙周致病菌Fn及Fn+Pg成功构建小鼠下颌牙龈脓肿模型,FomA Fn组小鼠牙龈脓肿评分[(1.82±0.35)分[显著低于PBS Fn组[(2.62±0.71)分[(P=0.049);FomA Fn+Pg组小鼠牙龈脓肿评分[(2.31±0.55)分]亦显著低于PBS Fn+Pg组[(3.63±0.45)分[(P=0.003);FomA Fn+ Pg组与FomA Fn组小鼠血清及牙龈组织中IL-1β浓度均分别显著低于PBS对照组(P＜0.001).结论 使用大肠杆菌表达系统能成功表达并获得一定量的Fn外膜FomA蛋白,该重组蛋白具有一定的免疫原性,通过对小鼠皮下注射的方式可使小鼠血清中产生一定水平的抗体,有助于机体降低牙周致病菌Fn及Pg引起的牙周感染程度.
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唾液富组蛋白5抑制牙龈卟啉单胞菌与具核梭杆菌共聚的初步研究
目的 研究唾液富组蛋白5抑制牙龈卟啉单胞菌与具核梭杆菌共聚的能力并进行初步的机制分析,以期揭示富组蛋白5在抑制慢性牙周炎发生过程中的作用.方法 收集49例就诊于中国医科大学口腔医学院牙周科的慢性牙周炎患者(慢性牙周炎组)和27名牙周健康者(牙周健康组)的唾液及龈上、龈下菌斑,采用酶联免疫吸附测定试剂盒检测唾液中富组蛋白5的含量,实时荧光定量PCR(绝对定量)检测龈上、龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)和总细菌的DNA拷贝数;采用黏附实验和扫描电镜分别检测25 mg/L富组蛋白5对Pg-Pg、Pg-Fn共聚的影响;实时荧光定量PCR(相对定量)技术检测25 mg/L富组蛋白5对Pg血凝素基因、精氨酸牙龈素基因及Fn FomA基因表达的影响.实验组(加入25 mg/L富组蛋白5)与对照组(未加入富组蛋白5)之间差异的比较采用独立样本t检验,以双侧P<0.05为差异有统计学意义.结果 慢性牙周炎组唾液富组蛋白5与龈上菌斑中Fn、Pg均呈负相关关系(r=-0.379, r=-0.624);与龈下菌斑中的Fn、Pg也均呈负相关关系(r=-0.404,r=-0.314).牙周健康组富组蛋白5仅与龈上、龈下菌斑中的Pg呈负相关关系(r=-0.572,r=-0.533).25 mg/L的富组蛋白5能抑制Pg-Pg及Pg-Fn的共聚;实时荧光定量PCR(相对定量)结果显示,唾液富组蛋白5使Pg血凝素基因表达升高(14.52±3.25)倍,使Fn FomA基因表达下降至原来的(0.22±0.10).结论 唾液富组蛋白5可能通过调节Pg血凝素基因、Fn FomA基因的表达抑制Pg-Pg和Pg-Fn的共聚.
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紫外线对钛与钛合金表面抗菌性能的影响
目的 研究经紫外线照射后钛和钛合金表面金黄色葡萄球菌与具核梭杆菌的黏附行为及生物活性,探讨紫外线对钛及钛合金表面抗菌性能的影响.方法 钛与钛合金试件经抛光、大颗粒喷砂酸蚀处理,常温常压黑暗环境中储存4周后,按是否接受紫外线照射分为纯钛光照组和纯钛对照组、钛合金光照组和钛合金对照组(每组43个试件).接触角测试仪检测试件表面接触角(每组1个试件);试件表面接种金黄色葡萄球菌和具核梭杆菌15、30 min和1h后(每组每种细菌每个时间点3个试件),采用荧光染料进行染色计数,检测细菌早期黏附情况;接种1和24 h后用沙黄溶液染色(每组每种细菌每个时问点3个试件),检测细菌黏附情况;接种1和24 h后超声振荡(每组每种细菌每个时间点3个试件),梯度稀释菌悬液,在固体培养基上培养,计算菌落数,探讨细菌活性.结果 纯钛光照组与钛合金光照组表面接触角分别为(1.32±0.29)°和(0.89±0.07)°,均分别显著小于纯钛对照组[(81.18±1.46)°]与钛合金对照组[(83.34±0.06)°](P＜0.05).接种细菌15、30 min和1h后,金黄色葡萄球菌在纯钛光照组与钛合金光照组的黏附荧光计数[分别为(31±13)、(73±13)、(263±49)与(64±19)、(57±16)、(304±53)个]均显著低于相应纯钛对照组[(139±30)、(271±51)和(749±172)个]与钛合金对照组[(174±11)、(387 ±39)和(1409±262)个](P＜0.05);具核梭杆菌在纯钛光照组与钛合金光照组的黏附荧光计数[分别为(10±7)、(26±19)、(105±37)和(11±5)、(59±18)和(124±53)个]也均分别显著低于纯钛对照组[(164±16)、(227±65)和(483±64)个]与钛合金对照组[(265±45)、(374±133)和(910±103)个](P＜0.05).接种1和24 h后,纯钛光照组和钛合金光照组的两种菌落计数均显著低于相应对照组(P＜0.05).结论 紫外线照射能降低钛和钛合金表面的细菌黏附和活性,具有抗菌作用,且抗菌作用至少维持24 h.
