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泛耐药鲍曼不动杆菌PBP1A、CarO及β-内酰胺酶的编码基因分析
目的 了解一株泛耐药鲍曼不动杆菌(js01株)可能存在的β-内酰胺类药物耐药机制.方法 对自2011年12月宁波市第一医院住院患者的痰样本js01株分离,用gyrA和parC基因PCR扩增、测序和BLASTn比对确认菌种.用PCR法分析33种β-内酰胺酶基因(13种A类酶基因、10种B类酶基因、2种C类酶基因、8种D类酶基因)和插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测以及CarO膜孔蛋白编码基因.再用分段PCR法扩增PBP1A编码基因,双向测序后拼接成全长序列.结果 js01株检出β-内酰胺酶TEM-1、ADC-30、OXA-23和OXA-66编码基因.插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测显示ISabaI-ADC-30和ISabal-OXA-23为阳性.js01株carO基因序列与鲍曼不动杆菌敏感株(SDF)相比存在有义突变,氨基酸序列一致率为76.0% (189/249),存在3个氨基酸缺失.js01株PBPIA编码基因序列与SDF株相比存在有义突变,氨基酸序列的一致率为99.6%( 848/851),存在3个氨基酸变异,但js01株PBPIA蛋白分子立体结构比SDF株丢失2个螺旋结构.结论 本株鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与该菌株管家基因(PBP1A、CarO编码基因)突变与可移动遗传元件介异的β-内酰胺酶编码基因有关.