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能使体外培养细胞长期存活的技术
美国科学家的新研究表明Rho激酶抑制剂(Y-27632)与纤维母细胞饲养细胞合用能够诱导许多组织的正常上皮细胞以及肿瘤上皮细胞在体外无限增值,而不需要转导外源性病毒或细胞基因.例如原始前列腺和乳腺细胞重编程为基底细胞样干细胞样表型并在基底膜中形成有序的前列腺球和乳腺球.相较于筛选稀少的干细胞样细胞,在所述的生长条件下能够在活检组织获取后的5 d～6 d内产生2×106个细胞,能够从冷冻组织少于4个活细胞培养起来.持续的细胞增殖依赖于纤维母细胞饲养细胞和Y-27632两者,进行有条件重组的细胞(CRCs)保持了正常的核型和非致瘤性.该技术也能够有效建立人和啮齿类动物肿瘤细胞的培养系.例如,从人前列腺癌建立的CRCs表现出第13号染色体的不稳定性,在基底膜中的异常增殖以及在有严重合并免疫缺陷的老鼠中形成肿瘤.这种从少量活检样本和冷冻组织迅速产生许多肿瘤细胞的能力为基于细胞的诊断和治疗(包括测试化学敏感性)提供了很大机会并大大提高了生物银行的价值.另外,CRC方法能够对取自体内的上皮细胞进行遗传操作以及随后的自体体内评估.
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体外培养细胞生物节律研究进展
所有的生物体都存在着调节自身生命活动的生物钟，而使得生命体的各种活动得以有规律的进行。例如，机体内的许多生理活动过程（睡眠-觉醒循环、温度、心率、血压、内分泌、肾脏的活动、肝脏的代谢活动）都受到昼夜节律的调节，即都在昼夜节律起搏器的控制之下。体外培养的机体组织和细胞的生理活动同样具有生物节律特征。本文对体外培养细胞生物钟进行了简要的概述，分析了神经元和外周组织细胞生物钟的分子机制以及存在的问题，为全面阐释生物钟的分子机制提供参考。
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细胞体外培养工作中存在的问题及预防
体外细胞培养是指在体外模拟体内的生理环境,在无菌、适当温度和一定营养条件下,使从体内取出的细胞生长、繁殖并维持其结构和功能的方法.细胞培养技术广泛用于科研、教学及临床研究实验中,这项技术受多种因素的影响,如:工作环境是否无菌、操作手法是否正确以及维持细胞所需的培养液等.笔者通过多年来从事细胞培养技术的研究工作,现将体会报道如下.
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氟对人脑神经母细胞瘤细胞株体外培养细胞活性氧水平及线粒体融合的影响
目的 分析研究氟对人脑神经母细胞瘤细胞株体外培养细胞活性氧水平及线粒体融合的影响.方法 将0.4mmol/L及4.0 mmol/L的氟化钠注人人脑神经母细胞瘤细胞株体外培养细胞中,对照组中仅注入双蒸水,作用时间为0.25d、0.Sd、1.0d、2.0d,通过细胞内氧化应激活性氧高质荧光测定试剂盒和活体细胞线粒体形态荧光染色试剂盒Mito Tracher RED对氧自由基和线粒体进行染色处理,对比经不同浓度氟化钠处理的人脑神经母细胞瘤细胞株体外培养细胞中活性氧水平及Ⅱ型线粒体形态与对照组的差异和尿氟含量变化情况.结果 染氟人脑神经母细胞瘤细胞株体外培养细胞中活性氧荧光出现染色异常,并且随染氟时间的增加,氟离子浓度越高,活性氧水平上升幅度越大,人脑神经母细胞瘤细胞株体外培养细胞活性氧水平和染氟时间及氟离子浓度呈正相关关系,三组活性氧水平对比差异均有统计学意义(P＜0.05);对照组人脑神经母细胞瘤细胞株体外培养细胞中线粒体融合分裂功能基本正常;经不同浓度氟化钠处理的人脑神经母细胞瘤细胞株体外培养细胞线粒体均分裂亢进,并且随着处理时间的增加及氟离子浓度的增加,人脑神经母细胞瘤细胞株体外培养细胞线粒体分裂程度不断增强;随着处理时间的增加及氟离子浓度的增加,尿氟含量呈持续上升趋势,三组尿氟含量对比差异有统计学意义(P＜0.05),4.0 mmol/L氟化钠组尿氟含量与0.4 mmol/L氟化钠组对比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 摄取氟量过高时,会导致人脑神经母细胞瘤细胞株细胞氧自由基水平异常增高,使其线粒体呈分裂状,并且随剂量和时间的增加而加重.
关键词： 氟 人脑神经母细胞瘤细胞株 体外培养细胞 活性氧水平 线粒体融合 -
介绍一种体外培养细胞免疫组化检测方法
随着生物医学及临床医学的发展,免疫组化检查越来越多的被用到体外培养细胞的研究中.本文介绍一种在平底细胞培养板上直接进行的免疫组化SP法,效果满意,现介绍如下.1 材料与方法1.1 材料透明平底聚苯乙烯细胞培养板,作免疫组化检查的体外培养细胞株,SP法试剂.
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体外培养细胞机械加力装置研究进展
细胞力学是现代生物学发展的前沿领域,细胞力学研究的基础和关键是体外培养细胞机械加力装置的研制.目前已研制出多种体外培养细胞机械加力装置,按加载力的不同性质分为离心力加载装置,流体剪切力加载装置,空气液体传导静压力加载装置和基底形变加载装置四类.
