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二甲基乙二酰基甘氨酸对小鼠骨髓间充质干细胞缺血清凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响
目的 观察脯氨酸羟化酶抑制剂二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxalglycine,DMOG)对无血清培养引起的小鼠骨髓间充质干细胞的凋亡影响及其对凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax表达的影响.方法 分离小鼠股骨及胫骨骨髓腔中的单个核细胞,传代后应用流式细胞仪进行细胞表型检测和三系分化以鉴定骨髓间充质干细胞.流式细胞仪TUNEL法观察DMOG作用于细胞后对细胞无血清培养凋亡的对抗作用,Westerm blot检测DMOG对凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax蛋白表达的影响.结果 实验所获的单个核细胞通过流式细胞仪细胞表型鉴定和三系分化鉴定证实为骨髓间充质干细胞.与无血清造模组相比,二甲基乙二酰基甘氨酸能明显降低骨髓间充质干细胞因缺血清导致的凋亡率(P＜0.05),并上调凋亡抑制蛋白Bcl-2蛋白表达(P＜0.05),抑制凋亡促进蛋白Bax蛋白表达(P＜0.05).结论 脯氨酸羟化酶抑制剂DMOG能抑制骨髓间充质干细胞因缺血清培养引起的凋亡.对凋亡调控蛋白Bcl-2/Bax表达的调控可能是DMOG对抗骨髓间充质干细胞凋亡的重要机制.
关键词： 脯氨酸羟化酶抑制剂 二甲基乙二酰基甘氨酸 骨髓间充质干细胞 凋亡 -
脯氨酸羟化酶抑制剂的研究进展
低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)是细胞适应低氧环境的关键性转录因子,在组织贫(缺)血和炎症性疾病中稳定表达,对缓解病情具有重要作用.脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase domain,PHD)能实现HIF的羟基化,是体内降解HIF的主要蛋白酶.PHD抑制剂可以有效增加体内HIF蛋白含量,对于贫血及炎症性疾病治疗具有积极意义.本研究对小分子PHD抑制剂的新进展进行综述.
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脯氨酸羟化酶抑制剂DMOG动员的大鼠外周血间充质干细胞的多向分化潜能研究
目的:探讨脯氨酸羟化酶抑制剂一二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)动员后大鼠外周血间充质干细胞(PB-MSCs)的多向分化潜能.方法:SD大鼠腹腔注射DMOG 40 mg· kg-1,分离扩增PB-MSCs,流式细胞术检测其表面抗原;诱导分化培养法研究PB-MSCs成骨、成软骨、成脂、成神经分化潜能.结果:PB-MSCs表面阴性表达造血系标记CD34(2.16±1.60)％、CD45(0.82±0.55)％,阳性表达CD90(98.66±0.77)％;成骨分化检测有钙结节出现,硝酸银染色发现细胞成黑色颗粒状;成软骨分化检测发现细胞核偏移,甲苯胺蓝染色细胞外基质成紫色,核成蓝色;成脂分化检测发现细胞中出现大量“脂滴”,油红O染色成红色;成神经检测中,细胞出现轴突,免疫荧光蛋白检测巢蛋白(Nestin)表达阳性,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达阴性.结论:DMOG动员后培养的外周血细胞为MSCs,且具有成骨、成软骨、成脂、成神经分化的潜能.
