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小儿恶性肿瘤β-catenin基因突变的研究进展
β-catenin是一种重要的信号转导分子和细胞间黏附分子,在小儿恶性肿瘤中突变率较高,可能与肿瘤的发生和转移都有关系.肝母细胞瘤中突变率约48%,肾母细胞瘤中突变发生在有WT1突变的病例中,神经母细胞瘤中已发现有a-catenin突变.
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靶向CTNNB1的shRNA抑制结肠癌SW480细胞增殖的研究
目的探讨靶向CTNNB1的shRNA对人结肠癌SW480细胞的基因下调效应和细胞增殖的抑制作用.方法构建靶向CTNNB1的shRNA载体质粒,然后转染入结肠癌SW480细胞.用RT-PCR和Western blotting方法检测CTNNB1的mRNA和蛋白的表达情况.MTT实验评价转染后各组细胞的增殖情况,并用流式细胞仪检测各组细胞的周期分布和凋亡情况.结果靶向CTNNB1的shRNA能够明显下调CTNNB1 mRNA和蛋白质表达(P<0.05),其抑制率分别是43.87%和45.16%.MTT实验提示CTN组细胞在转染后呈现随着时间延长而进行性增殖抑制的现象.在转染后72 h,CTN组的细胞存活率为46.4%,与空白对照组相比有显著性降低(P<0.05).而流式细胞仪显示CTN组细胞有明显G0/G1周期阻滞和凋亡率增高(P<0.05).结论靶向CTNNB1的特异性shRNA对结肠癌SW480细胞具有下调CTNNB1基因表达,促进细胞凋亡并且显著抑制细胞增殖的效应.