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SARS冠状病毒N蛋白致大鼠肺部炎症及糖皮质激素对其的作用
目的探讨严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒N蛋白所致大鼠肺部炎症反应及糖皮质激素(以下简称激素)对其的调节作用. 方法 24只SD大鼠随机分为4组,每组6只;A组大鼠气管内滴入无菌生理盐水0.2 ml,B组(6 h)、C组(24 h)大鼠气管内滴入SARS 病毒N蛋白溶液0.2 ml,D组大鼠气管内滴入SARS 病毒N蛋白溶液0.2 ml的同时腹腔内注射10 mg/kg地塞米松.测4组大鼠外周血、支气管肺泡灌洗液(BALF)中WBC总数及分类;测4组大鼠肺组织湿/干(W/D)比值;观察4组大鼠肺组织病理学变化;ELISA测4组大鼠血清及BALF 中IL-6、IL-10、转化生长因子(TGF)β1水平.结果 (1)外周血淋巴细胞比例C组较A组低(P<0.05),D组较A、C组均低(P值均小于0.01);D组WBC总数较A、C组均低(P<0.01).BALF中WBC总数C组较A组高(P<0.05),D组较C组低(P<0.05);B、C 组BALF中肺泡巨噬细胞占98%～99%.(2)肺脏W/D 比值B、C组较A组高(P<0.05), D组较C组低(P<0.01).(3)肺组织病理学变化:B、C组大鼠肺泡间隔明显增宽,有较多的炎性细胞渗出,包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、成纤维细胞等,血管充血、淤血,有的支气管腔内有炎性细胞渗出,C组变化较B组无明显加重;D组大鼠肺组织炎性反应较B、C组减轻,肺泡间隔变薄,炎性细胞渗出减少. (4)血清及BALF 中IL-6、IL-10、TGFβ1水平B组较A组高(P<0.01),C组进一步升高(P<0.01),D组较C组低(P<0.01).结论 SARS冠状病毒N蛋白具有致病性,能够引起大鼠肺部炎症反应和(或)急性肺损伤,肺损伤与促炎性细胞因子、抗炎性细胞因子的升高及失衡有关;激素可有效地减轻SARS冠状病毒N蛋白所致的肺部炎症反应.
关键词： 严重急性呼吸综合征 SARS冠状病毒N蛋白 炎症 肺损伤 急性 -
利用噬菌体肽库技术筛选SARS病毒N蛋白表位模拟肽
目的 获得具有生物学活性的SARS病毒N蛋白表位模拟肽.方法 以抗SARS病毒N蛋白的单克隆抗体作为固相筛选分子,免疫筛选噬菌体随机十二肽库,并采用夹心ELISA、竞争抑制试验鉴定阳性克隆.后用合成肽技术进行表位鉴定.结果 经噬菌体富集后,从随机筛选的各46个克隆中得到N蛋白的2个不同表位,mAb C008对应表位氨基酸序列为GXLXTPXXXXGT;mAb C039对应表位氨基酸序列为,TTLPXXXXAXXX.结论 用噬菌体随机12肽库成功筛选得到SARS N蛋白2个不同表位,为下一步开展用SARS表位研究病毒的制病机制、诊断、疫苗及治疗等奠定了基础.
关键词： SARS冠状病毒N蛋白 表位 噬菌体肽库
