首页 > 文献资料
-
转基因小鼠脑组织中突触素和发动蛋白Ⅰ及衔接蛋白180表达的变化
目的 探讨瑞典型淀粉样前体蛋白突变基因转基因小鼠脑组织中突触素(synaptophysin)、发动蛋白Ⅰ(dynamin Ⅰ)及衔接蛋白180(AP180)表达变化.方法 选择6只瑞典型淀粉样前体蛋白突变基因转基因小鼠为转基因组,另选5只小鼠为对照组.采用免疫组织化学染色法检测小鼠海马及颞叶皮质synaptophysin、dynamin Ⅰ及AP180的表达,图像分析半定量;免疫组织化学双染法观察转基因小鼠脑组织中synaptophysin与β淀粉样蛋白(Aβ)1-42在老年斑表达部位的关系.结果 与对照组比较,转基因组小鼠脑组织齿状回分子层、海马CA1、CA3及内嗅区皮质各层synaptophysin平均灰度值明显增高(P＜0.05,P＜0.01);齿状回颗粒细胞、海马CA1锥体细胞及内嗅区皮质各层dynamin Ⅰ平均灰度值明显增高(P＜0.05,P＜0.01);齿状回分子层、海马CA4、CA1、内嗅区皮质各层及颞叶皮质Ⅱ～Ⅴ层AP180平均灰度值明显增高(P＜0.05,P＜0.01).免疫组织化学双染显示转基因组小鼠老年斑内有syuaptophysin争Aβ1-42共同存在.结论 转基因小鼠脑组织中synaptophysin、dynamin Ⅰ及AP180表达降低,提示出现不同程度突触丧失及突触囊泡回收功能缺陷,可能是该小鼠认知功能障碍的原因之一.
-
动力相关蛋白1介导的自噬对胃癌MKN-45细胞奥沙利铂敏感性的影响
目的 探讨动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,DRP1)基因沉默对人胃癌细胞株MKN-45奥沙利铂敏感性的影响及其可能的机制.方法 构建靶向DRP1基因的短发夹状RNA(shRNA)慢病毒载体,转染至293T细胞,再感染MKN-45细胞,用qRT-PCR鉴定沉默效率.用终浓度为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0及32.0 μg/ml的奥沙利铂分别处理实验组、阴性对照组(NC组)和空白对照组(CON组),48 h后采用MTT实验检测细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC50),流式细胞术检测细胞凋亡,Westem blot检测LC3-Ⅱ和p62表达.结果 实验组的DRP1 mRNA(0.087±0.025)显著低于NC组(1.040±0.020)和CON组(1.027±0.021)(均P＜0.001).随奥沙利铂浓度增加,实验组的细胞存活率明显降低(均P ＜0.001).实验组的IC5.值(14.1±0.4) μg/ml较NC组(20.0±1.1) μg/ml和CON组(20.0±1.8) μg/ml降低(均P＜0.01);实验组的细胞凋亡率(9.4％±1.1％)较NC组(6.4％±0.8％)和CON组(6.5％±1.0％)升高(均P＜0.05);实验组的LC3-Ⅱ(0.36±0.03)较NC组(0.62±0.04)和CON组(0.59±0.07)降低(均P＜0.01);实验组的P62(0.58±0.04)较NC组(0.39±0.04)和CON组(0.36±0.04)升高(均P＜0.01). 结论 DRP1介导的线粒体自噬提高了MKN-45细胞对奥沙利铂的敏感性.
-
Dynamin-1基因新生突变导致婴儿痉挛症一例并文献复习
目的 探讨Dynamin-1(DNM1)基因突变导致婴儿痉挛症(IS)的临床特征和基因突变特点.方法 对中南大学湘雅医院儿科2012年4月首诊,2015年9月明确诊断的1例DNM1基因突变导致的IS患儿资料进行分析,并以“Dynamin-1”“DNM1”为检索词查阅中国知网数据库、万方数据库、在线人类孟德尔遗传数据库和PubMed数据库建库至2016年4月相关文献并进行总结.结果 患儿男,首次就诊年龄1岁5月龄,患儿7月龄时出现抽搐,表现为典型的痉挛发作,精神、运动发育重度迟滞.就诊时体格检查示竖头不稳,不能翻身和独坐,肌张力减低,脑电图检查示高度失律,后头部显著,染色体核型未见异常.1岁5月龄时给予肾上腺促皮质激素治疗28 d,并逐步加用丙戊酸钠及左乙拉西坦抗癫痫治疗,3岁5月龄至5岁5月龄使用丙戊酸钠单药治疗无发作.4岁10月龄时基因全外显子组测序分析(患儿及父母)发现DNM1 c.443A ＞G(p.Glu148Arg)新生杂合错义突变.文献检索未见中文文献,国外报道9例,表型为IS或Lennox-Gastaut综合征,且均为DNM1新生突变所致.结论 DNM1基因突变导致的癫痫性脑病的主要临床特点包括难治性癫痫、肌张力减退和抽搐发作前即存在精神、运动发育落后.
-
糖尿病小鼠心肌组织中动力相关蛋白1的表达变化
目的：观察 db ／db 糖尿病小鼠与正常小鼠心肌组织中动力相关蛋白1（Drp1）表达水平的变化。方法9只雄性 db ／db 糖尿病小鼠，随机分为6周组（db ／db 6week），12周组（db ／db 12week），18周组（db ／db 18week）；另设健康组雄性小鼠9只，随机分为6周组（wt 6week），12周组（wt 12week），18周组（wt 18week），每小组3只。分别利用实时定量 PCR，Western Blot，免疫组织化学的方法检测心肌组织中 Drp1的表达和定位。结果db ／db 糖尿病小鼠分组中 Drp1的表达低于健康组，且随年龄的增长表达逐渐降低。结论糖尿病小鼠中Drp1表达进行性的降低，引起线粒体分裂异常从而导致线粒体的生物功能障碍，可能是糖尿病心肌病发生及发展的重要机制之一。
