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骨胶原肽与柠檬酸钙对去卵巢大鼠骨丢失的预防及治疗效果
目的 将牛骨胶原肽(collagen peptides,CP)与柠檬酸钙(calcium citrate,CC)联用给去卵巢(ovariectomy,OVX)大鼠进行灌胃以评价对OVX大鼠骨丢失预防及治疗是否比单独给药更有效.方法 将80只12周龄Sprague-Dawley大鼠分为预防(术后2周开始灌胃,1次/d,连续3个月)及治疗(术后3个月开始灌胃,1次/d,连续3个月)2种给药方案,每种给药方案分为以下5组(n=8):假手术组(Sham),去卵巢组(OVX),OVX大鼠服用CP组(750 mg/kg CP),OVX大鼠服用CP(750 mg/kg)和CC (75 mg/kg),去卵巢大鼠服用CC(75 mg/kg).采用全自动生化分析仪检测血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量,放射免疫法检测血清骨钙素(osteocalcin,OC)含量,双能X射线骨密度仪(dual energy X-ray absorptiometry,DXA)检测大鼠股骨骨密度(bone mineral density,BMD),骨生物力学测定股骨生物力学指标.结果 CP-CC处理预防及治疗组OVX大鼠后呈现出骨保护效果:显著抑制OVX大鼠增加的血清ALP含量,显著抑制OVX大鼠股骨BMD的降低,显著抑制治疗组OVX大鼠股骨断裂强度的降低(P＜0.05).CP处理OVX大鼠CP后,显著抑制OVX大鼠增加的血清ALP含量,显著抑制治疗组OVX大鼠股骨BMD的降低;CC处理OVX大鼠后,显著抑制预防组OVX大鼠股骨BMD的降低,股骨断裂强度显著增加(P＜0.05).结论 柠檬酸钙对去卵巢大鼠骨丢失预防具有抑制效果,而骨胶原肽联合柠檬酸钙对去卵巢大鼠骨丢失预防及治疗具有更好的效果,该结果为绝经后骨质疏松妇女骨丢失的防治提供了理论依据.
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牛骨胶原肽对成骨细胞分化的影响
目的：研究3 mg／ml牛骨胶原肽（ Bovine collagen peptides， BCP）对人成骨细胞（ Human osteoblast， HOB），小鼠前成骨细胞系MC3T3分化的影响。方法 Western blot检测MC3T3细胞中BCP对Runx2表达的影响；分离培养HOB，利用对硝基苯磷酸比色法检测3 mg／ml BCP对碱性磷酸酶（ Alkaline phosphatase，ALP）含量的影响；骨钙素（ osteocalcin，OC） ELISA法测定BCP对OC含量的影响；茜素红矿化染色检测BCP对HOB矿化，然后用5％高氯酸进行脱色，用吸光度法检测BCP对人成骨细胞矿化程度。结果 Western blot检测表明，14 d后BCP处理的MC3T3细胞中Runx2蛋白表达水平（0．178±0．201）与CN组（0．146±0．582，P＞0．05）比较，有增高趋势。 ALP染色结果表明，BCP混合物处理组的ALP的染色面积（33859±8221）在第10d与CN组（19900±2796）相比，显著增加（ P＜0．05），表明BCP混合物能促进人成骨细胞早期的ALP表达量。BCP混合物处理组的OC吸光度值（0．137±0．014）在第14d高于CN组（0．086±0．023， P＜0．05），表明BCP混合物能促进人成骨细胞晚期阶段的OC含量。茜素红矿化染色结果表明，3mg／ml BCP能显著促进HOB的矿化骨基质的形成。当使用5％的高氯酸脱色后，BCP处理组在490 nm处测吸光度值（0．579±0．093）显著高于CN组（0．193±0．021，P＜0．01），表明BCP混合物能促进人成骨细胞的矿化。结论 BCP在成骨细胞分化和矿化骨基质的形成中发挥了积极作用。综合上述结果，本文为BCP混合物在骨关节炎和骨质疏松症潜在的预防和治疗提供了分子机理。
