首页 > 文献资料
-
磷脂酰肌醇3-激酶γ对急性胰腺炎小鼠胰腺腺泡细胞自噬作用的影响
目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶γ(PI3Kγ)对小鼠实验性急性胰腺炎胰腺腺泡细胞自噬作用的影响,并探讨其意义.方法 野生型C57 BL/6小鼠和PI3Kγ基因敲除小鼠各18只,按数字表法随机分为对照组(6只)和急性胰腺炎(AP)组(12只),采用蛙皮素50μg/kg体重腹腔内注射7次、每次间隔1h的方法制备AP模型.首次注射后7h处死小鼠,光镜下观察胰腺病理学变化,免疫荧光检测自噬泡主要组成蛋白LC3颗粒,荧光分光光度计测定胰蛋白酶活性,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白beclin1、LC3-Ⅱ和p62的表达.结果 AP组野生型小鼠和PI3Kγ基因敲除小鼠的胰腺自噬空泡数量分别为(5.14±0.85)、(2.25±0.54)个/每高倍视野(HPF),LC3荧光免疫颗粒数量分别为(78.6±9.38)、(26.4±4.21)个/HPF,胰蛋白酶活性分别为(0.827±0.126)、(0.358±0.098) pmol/mg蛋白,各组间差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).野生型小鼠的p62蛋白表达较PI3Kγ基因敲除小鼠显著减弱(0.11比0.92,P＜0.05),面LC3 -Ⅱ、beclin1蛋白表达较PI3Kγ基因敲除小鼠显著增强(1.82比0.93,1.43比1.05,P值均＜0.05).结论 AP时PI3Kγ可能通过增强小鼠胰腺腺泡细胞的自噬作用,促进胰蛋白酶原的活化及诱导腺泡细胞坏死.
关键词： 胰腺炎 磷脂酰肌醇3-激酶γ 蛙皮素 自噬 -
磷脂酰肌醇3-激酶γ在实验小鼠急性胰腺炎腺泡细胞坏死中的作用
目的 研究磷脂酰肌醇3-激酶γ(P13Kγ)在实验性急性胰腺炎腺泡细胞坏死中的作用,并探讨其作用机制.方法 12只雄性野生型C57BL/6小鼠和12只雄性P13Kγ基因敲除小鼠随机分为对照组和胰腺炎组,腹腔内分别注射生理盐水和蛙皮素(50tμg/kg)诱导急性胰腺炎模型.观察两种动物模型胰腺组织病理变化,同时检测血清胰蛋白酶活性、组织蛋白酶B和L活性的变化,Western blotting检测组织蛋白酶B和L蛋白的表达.结果 组织学显示,P13Kγ基因敲除小鼠胰腺炎腺泡细胞坏死数量[(2.25±0.54)/HP比(5.14±0.85)/HP]和空泡数量[(1.24±0.21)/HP比(2.36±0.34)/HP]明显少于野生型小鼠(P＜0.05),组织蛋白酶B[(1232±21)pmolAMC/min.mg 比(1891±35) pmolAMC/min/mg]和胰蛋白酶活性[(0.358±0.098)pmol/mg比(0.827±0.126)pmol/mg]低于野生型小鼠(P＜0.05),而组织蛋白酶L活性相反[(415±11)pmolAMC/min/mg比(346 ±6) pmolAMC/min/mg] (P＜0.01).结论 P13Kγ在急性胰腺炎时可能具有促进细胞坏死的作用,其可能机制是改变了组织蛋白酶B和L之间的平衡和促进了胰蛋白酶原的活化.
关键词： 磷脂酰肌醇3-激酶γ 蛙皮素 急性胰腺炎 细胞坏死 -
磷脂酰肌醇3-激酶γ与牙周炎的研究进展
磷脂酰肌醇3-激酶γ(phosphatidylinositol 3-kinaseγ,PI3Kγ)是一种表达于巨噬细胞等免疫细胞中的脂质激酶,PI3Kγ一方面可通过激活TLR4-PI3Kγ-Erk1/2信号通路诱导M1型巨噬细胞极化,增强宿主免疫防御功能;另一方面它还可通过激活mTOR-C/EBPβ信号通路诱导M2型巨噬细胞极化,发挥免疫抑制作用.因此PI3Kγ在宿主的免疫应答反应中发挥着重要作用,而巨噬细胞在宿主对牙周炎的免疫应答中发挥关键作用,故本文就PI3Kγ对巨噬细胞极化的影响及其在牙周炎发生发展中的作用作一综述.
关键词： 磷脂酰肌醇3-激酶γ 巨噬细胞 牙周炎 -
磷脂酰肌醇3-激酶γ基因敲除对急性胰腺炎小鼠腺泡细胞的影响
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶γ(PI3Kγ)基因敲除对急性胰腺炎(AP)小鼠病变程度、腺泡细胞功能以及对HSP70表达的影响.方法:雄性野生型( WT) C57BL/6小鼠和雄性PI3Kγ基因敲除(KO)小鼠各12只,随机均分为对照组和AP组,采用腹腔内注射蛙皮素诱导在体AP模型,对照组以同样的方式和体积给予生理盐水；另取两种动物各8只,行胰腺腺泡细胞体外分离,用胆囊收缩素(CCK-8)刺激作为离体AP模型,对照组给予二甲基亚砜(DMSO).观察胰腺组织病理变化、血清淀粉酶水平、胰腺组织和腺泡细胞胰蛋白酶活性和腺泡细胞淀粉酶释放率.Western blot检测胰腺组织及腺泡细胞中HSP70蛋白的表达.结果:病理学观察,两种小鼠的对照组胰腺未见异常,而AP组均出现不同程度的水肿、出血、坏死,经定量分析,KO小鼠胰腺炎腺泡细胞坏死数量和空泡数量明显少于WT小鼠(均P＜0.05)；两对照组间胰腺组织胰蛋白酶活性和体外腺泡细胞胰蛋白酶活性无明显差异(均P＞0.05),但AP组(在体、离体)KO小鼠胰腺组织及腺泡的胰蛋白酶活性均低于WT小鼠(均P＜0.05).两种小鼠间血清淀粉酶水平及腺泡细胞淀粉酶释放曲线差异无统计学意义(P＞0.05)；与对照组比较,AP组(在体、离体)小鼠胰腺组织和腺泡细胞HSP70表达均增加,且KO小鼠表达量明显大于WT小鼠(均P＜0.05).结论:AP时,PI3Kγ可能通过下调HSP70表达水平和增强胰蛋白酶原活化促进腺泡细胞坏死,而对淀粉酶的分泌过程无明显影响.
关键词： 胰腺炎 磷脂酰肌醇3-激酶γ 小鼠 基因敲除 HSP70热休克蛋白质类
