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不同处理条件下人脱细胞脐动脉组织结构和生物力学性质的对比研究
目的:研究不同处理方法对人脱细胞脐动脉的组织结构影响,并比较其生物力学性质,为小口径组织工程人工血管支架的选择提供依据.方法:搏动条件下采用酶消化法脱去人脐动脉中的细胞成分(n=10),将每根脱细胞脐动脉平分为3段,随机均分为3组,A组经0.9％氯化钠液、B组经75％乙醇、C组经0.5％戊二醛处理.对处理后的脱细胞脐动脉进行HE染色、弹力纤维染色、生物力学检测(抗张力测试和抗爆破压测试),并进行比较.结果:脱细胞脐动脉经3种处理后B组及C组的塑形性较A组好；力学测试结果显示抗张力强度C组大(4.63±1.06)N,B组次之(2.20±0.43)N,A组小(0.93±0.33)N(P ＜0.05)；抗爆破压强度B组(257±23)mmHg(1 mmHg =0.133 kPa),C组(261±23) mmHg无差异,均大于A组(143±19)mmHg(P ＜0.05)；从位移-负荷曲线分析,C组的斜率大,B组次之,A组小；HE染色结果显示B组、C组脱细胞脐动脉的弹力纤维板形态能够很好地保存下来,而A组的弹力纤维板不明显；3组血管经抗张力测试,纵向拉伸或抗爆破压测试后,再采用弹力纤维染色进行形态学观察,A组的弹力纤维断裂比较明显,B组弹力纤维断裂较A组少,但较C组的断裂多.结论:使用75％乙醇或0.5％戊二醛处理后的脱细胞脐动脉塑性好,组织结构的形态佳、生物力学性质均明显较0.9％氯化钠液处理组好,而75％乙醇处理后的脱细胞脐动脉,在其柔韧性方面较0.5％戊二醛处理后更接近于生理状态,因此75％乙醇处理后的脱细胞脐动脉可能是较理想的血管支架材料.
关键词： 人脐动脉 生物力学性质 组织结构 小口径组织工程人工血管 -
人脱细胞脐动脉支架与兔骨髓内皮祖细胞构建组织工程血管的实验研究
目的:构建小口径组织工程生物血管并观察移植于兔颈动脉后的通畅情况.方法:制备人脐动脉脱细胞支架,随机分为三组:Ⅰ.实验组:将兔皮肤成纤维细胞、下肢动脉平滑肌细胞和骨髓内皮祖细胞依次接种于纤维连接蛋白包被的血管支架上;Ⅱ.对照组:血管支架未经纤维连接蛋白包被,种植细胞种类同实验组;Ⅲ.裸支架组:未经处理的脱细胞裸支架.行HE染色观察种植细胞情况;免疫组化染色鉴定种植细胞的表型;电镜下观察人工血管内皮细胞间的连接状态.将人工血管分别移植于兔颈动脉,术后0h、2h、1d、2d、3d、7d、14d及30d后行血管超声检查,对三组移植血管通畅程度进行比较.结果:植入细胞后的人工血管动态培养2w后,Ⅰ组血管在倒置显微镜可见管腔内大量细胞附着、细胞呈密集环绕生长,HE染色结果显示:血管管腔内层均匀覆盖细胞;免疫组化染色其结果显示:管腔内层细胞高表达成熟内皮细胞表面标志CD34;扫描电镜观察血管腔内较为均匀的覆盖细胞,血管壁较为光滑呈膜性结构.Ⅱ组血管在倒置显微镜下和HE染色均未见附着的细胞;免疫组化染色显示管腔内层细胞不完整;扫描电镜观察血管腔内少量细胞覆盖,血管壁为不规则的纤维状结构.兔颈动脉移植术后立即行血管超声检测,结果显示实验组血管的内径为(3.97±0.2)mm,血流通畅,与裸支架组的(3.88±0.2)mm及对照组的血管内径(4.14 ±0.6)mm相比,差异无统计学意义(P ＞0.05);2h血管超声检测结果显示,实验组(3.81±0.7)mm与对照组(1.89 ±0.2)mm的血管内径有显著性差别(P＜0.05),后者明显狭窄,出现血栓.30d后实验组血管内径(2.50±0.2)mm与移植0h比较显著狭窄(P＜0.05).结论:人脐动脉脱细胞支架与兔骨髓内皮祖细胞构建的组织工程生物血管移植于兔颈动脉可长期通畅.
关键词： 小口径组织工程人工血管 细胞种植 血管移植
