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二烯丙基二硫诱导人胃癌MGC803细胞的分化
目的:研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌MGC803细胞分化作用及其机制.方法:采用ConA凝集实验、碱性磷酸酶(ALP)比活性测定、免疫荧光染色细胞化学、免疫细胞化学及划痕标记荧光染料示踪技术(SLDT)等方法,观察DADS诱导人胃癌MGC803细胞分化的作用.结果:人胃癌MGC803细胞对ConA的凝集率从79.1%下降为27.0%(χ2=29.78,P＜0.05);ALP比活性由2.00 nkat/g降至0.67 nkat/g(F=207.6,P＜0.05),下降率为66.1%;细胞骨架蛋白呈细丝状,由胞核向胞质规则、放射状伸展,表明其合成增加与重组;SLDT表明人胃癌MGC803细胞不显示荧光染料的传播,失去细胞间通讯功能,DADS处理后黄色荧光分布在伤沿细胞列和相邻的数列细胞内,表示细胞间通讯功能恢复.免疫细胞化学结果显示,p21WAF1表达增加,突变型p53、Ras-p21、C-myc表达降低,而pRb表达无改变.结论:DADS可以诱导MGC803细胞分化,癌基因与抑癌基因在此过程中起着重要作用.
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天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖机制研究
目的:探讨天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖的作用,并对其增殖抑制作用机制进行初步探讨.方法:采用不同质量浓度的天马颗粒剂(10 -1g·mL-1、10 -2g·mL-1、10 -3g·mL-1及10 -4g·mL-1) 处理人结肠癌细胞株SW480,同时设立空白对照组(RPMI 1640培养液处理)及阳性对照组 (以5-氟尿嘧啶处理).观察SW480细胞的形态学动态变化,以MTT法检测各组SW480细胞的增殖情况,另以速率法检测各组SW480细胞中碱性磷酸酶(alkaline phos-phatase,AKP)比活性的变化情况.建立人结肠癌细胞株SW480免疫抑制小鼠肾包膜下移植瘤模型,同时设立天马颗粒剂组(天马颗粒剂灌胃),空白对照组(生理盐水灌胃)及阳性对照组(5-氟尿嘧啶腹腔注射),8 d后采集肿瘤组织,以免疫组织化学法及图像分析技术定量检测各组移植瘤SW480细胞中Ki-67及PCNA基因的表达情况.结果:随着天马颗粒剂质量浓度的增加,SW480细胞逐渐稀疏,散在生长,细胞变大,透明度差,颗粒增多;当天马颗粒剂质量浓度为10 -4 g·mL- 1时,SW480细胞颜色加深,且部分细胞从瓶壁脱落,甚至部分细胞可见坏死崩解的碎片;实验组10 -1g·mL-1、10 -2g·mL-1、10 -3g·mL-1及10 - 4g·mL-1的天马颗粒剂均可显著抑制SW480细胞增殖,且随天马颗粒剂作用时间延长及质量浓度增大,SW480活细胞计数逐渐降低(P＜0.05);随着质量浓度的增加OD值逐渐降低,增殖抑制率逐渐升高(P＜0.05); 10 -1g·mL-1、10 -2g·mL-1、10 -3g·mL-1及10 -4g·mL-1的天马颗粒剂均会使SW480细胞的 AKP比活性升高,且以10 -2g·mL-1时的AKP比活性高,且显著高于其他各组(P＜0.05或P＜0.01).阳性对照组AKP比活性与空白对照组比较,差异无统计 学意义(P＞0.05); Ki-67及PCNA基因主要表达于SW480细胞的细胞核,天马颗粒剂组及阳性对照组Ki-67及PCNA基因阳性着色较空白对照组明显减少,其表达的 面积均值及积分光密度均显著降低(P＜0.01).结论:天马颗粒剂可显著抑制人结肠癌细胞株 SW480 增殖,原因可能与其诱导 SW480 细胞成熟分化或抑制 SW480细胞Ki-67及PCNA基因表达相关.
