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  • Ucn3及其受体CRFR2在肠易激综合征大鼠模型肠神经系统中的表达

    作者:刘兆霞;季万胜;刘晓丽;王琳;韩慧蓉;房春燕;赵廷坤;徐继马;张广学;曲梅花

    目的:探讨尿皮质素3(Urocotin3,Ucn3)及其受体促肾上腺皮质释放因子受体2(cortieotrophin releasing factor receptor 2,CRFR2)在肠易激综合征中的表达.方法:将36只180-220 g的Wistar大鼠随机分为对照组(N)、急性应激组(A,急性束缚1 h)、慢性应激组(C,28 d不可预知轻度应激)、急慢性联合应激组(AC,在慢性应激基础上给予急性束缚)4组建模,采用排便粒数、敞箱行为评分和蔗糖水偏嗜度评价动物模型.建成后留取大鼠结肠组织,采用Real-time PCR方法检测各组大鼠结肠中Ucn3及其受体CRFR2表达水平的变化.结果:Ucn3在各组大鼠结肠中的表达:N组1.108±0.293,A组3.594±1.839,C组1.852±0.674,AC组3.989±1.591,各应激组Ucn3的表达均高于对照组(P<0.05),各应激组间A组vsC组(P<0.017),C组vs AC组(P<0.002),表达有统计学差异.CRFR2在各组大鼠结肠中的表达:N组1.042±0.217,A组2.119±0.468,C组1.568±0.507,AC组2.392±0.840,各应激组CRFR2的表达均高于对照组(P<0.05).各应激组之间没有统计学差异.结论:慢性应激、慢急性联合应激建立肠易激综合征大鼠模型重复性好.Ucn3及其受体CRFR2在肠易激综合征中表达升高,且Ucn3在急性应激后升高比慢性应激后更明显.

  • 促肾上腺皮质激素释放因子受体2在溃疡性结肠炎中的表达

    作者:马俊方;孔超美;张予蜀;张振玉;黄文斌;王劲松

    目的 观察促肾上腺皮质激素释放因子受体2 (CRFR2)在溃疡性结肠炎(UC)中的表达情况,及其与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、核因子-κB(NF-κB)p65和白细胞介素-6(IL-6)的关系,探讨其在UC中的作用.方法 免疫组织化学法检测UC活动组30例、缓解组30例和30例正常对照组的结肠黏膜中CRFR2、ICAM-1、NF-κB p65的表达情况,ELISA方法检测各组血清中IL-6水平.结果 CRFR2在UC活动组肠黏膜组织中的表达明显高于缓解组和对照组(P<0.05),而在UC缓解组和对照组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05).CRFR2在肠黏膜组织中的表达与NF-κB p65、ICAM-1的表达及血清中IL-6水平具有明显相关性(P<0.05).结论 活动期UC患者的CRFR2的表达明显升高,提示其在UC发病中可能起促炎作用.

  • 严重烧伤大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子受体2对烧伤高代谢的影响

    作者:陈忠勇;汪仕良;彭曦;王凤君;赵云;王裴

    目的 观察下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子受体2(CRFR2)在严重烧伤大鼠高代谢中的作用. 方法 选取24只SD大鼠采用立体定位仪定位第3脑室并置管,按照随机数字表法分为假伤对照组、烧伤对照组、CRFR2正义寡核苷酸(ODN)组、CRFR2反义寡核苷酸(ASO)组,每组6只.后3组大鼠背部脱毛后用凝固汽油燃烧18s,造成30% TBSAⅢ度烧伤,随即腹腔注射40 mL/kg乳酸林格液抗休克;假伤对照组大鼠仅于37℃温水浴中模拟致伤过程.伤后5、6d在清醒状态下,向2个对照组大鼠脑室内注入生理盐水3μL,另外2组大鼠于脑室内分别注入CRFR2ODN 10 μg、CRFR2AS0 10 μg.伤后第7天处死大鼠,采用免疫组织化学染色法、免疫荧光染色法观察各组大鼠下丘脑腹内侧核(VMH)中CRFR2表达量,结果以积分吸光度值表示.对数据行单因素方差分析、LSD检验.引用笔者以往研究中对应4组大鼠的静息能量消耗(REE)值,对CRFR2表达量与REE值行相关分析. 结果 免疫组织化学染色、免疫荧光染色显示,4组大鼠VMH中CRFR2表达量比较差异有统计学意义(F值分别为3.11、4.66,P值均小于0.01).烧伤对照组、CRFR2ODN组、CRFR2ASO组大鼠VMH中CRFR2表达量明显高于假伤对照组(P值均小于0.01).与CRFR2ODN组大鼠VMH中CRFR2表达量(分别为29.2±3.2、18.5±2.6)比较,CRFR2ASO组均明显降低(分别为19.4±2.3、10.1±2.2,P值均小于0.01).相关分析显示,4组大鼠2种方法测定的VMH中CRFR2表达量与REE值均呈显著正相关(r值分别为0.9236、0.8921,P值均小于0.01). 结论 中枢应用CRFR2ASO可下调大鼠VMH中CRFR2表达,降低烧伤高代谢反应.

  • 下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子受体2反义寡核苷酸在严重烧伤大鼠高代谢反应中的作用

    作者:陈忠勇;汪仕良;彭曦;王凤君;赵云;王裴

    目的 了解下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子受体2(CRFR2)反义寡核苷酸(ASP)在严重烧伤大鼠高代谢反应中的作用. 方法 将36只SD大鼠大脑立体定位、第三脑室置管.其中30只烧伤后,根据脑室注人物的不同,分为烧伤对照组(注入等渗盐水3μL)、CRFRI正义寡核苷酸(ODN)组(注入CRFRlODN 10 μg)、CRFRIASP组(注入CRFR1ASP 10 μg)、CRFR20DN组(注入CRFR20DN 10 μg)、CRFR2 ASP组(注入CRFR2 ASO 10 μg).每组6只大鼠.另取6只大鼠作为正常对照组,不致伤,仅在脑室内注入等渗盐水3μL.分别于伤后5、6 d在大鼠清醒状态下经脑室置管注射药物.伤后7 d经该管注入20 g/L甲紫3μL,当日检测大鼠静息能量消耗(REE),并取大鼠脑组织检测CRFR2 mRNA表达及CRFR2蛋白含量. 结果 烧伤对照组、CRFR10DN组、CRFR1ASO组、CRFR20DN组、CRFR2ASO组REE值分别为(11 840±987)、(11 133±1100)、(10 733±1338)、(11 123±1321)、(7563±890)kJ·(m2)-1·d-1,均高于正常对照组[(6641±526)kJ-(m2)-1·d-1,P<0.05],而CRFR2ASO组却明显低于CRFR20DN组(P<0.01).烧伤对照组伤后脑组织CRFR2 mRNA的表达和CRFR2蛋白含量明显增加,而CRFR2ASO组CRFR2 mRNA表达及CRFR2蛋白含量却低于正常对照组(P<0.01). 结论 中枢应用CRFR2ASO可下调下丘脑CRFR2 mRNA表达和蛋白含量,降低烧伤高代谢反应,下丘脑CRFR2受体可介导大鼠烧伤后高代谢反应.

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