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17-DMAG 体外对结肠癌 HT-29细胞的影响及细胞内活性氧的研究
目的观察17-二甲胺乙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-DMAG）对人结肠癌HT-29细胞增殖、细胞凋亡的影响及其细胞内活性氧（ ROS）的变化。方法用CCK-8检测17-DMAG对结肠癌HT-29细胞增殖影响；AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞检测细胞凋亡率；酶标仪检测细胞内ROS的变化。结果17-DMAG呈时间-剂量依赖性抑制HT-29细胞增殖。0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L、2.5μmol/L作用于HT-29细胞24 h后，细胞增殖抑制率分别为（22.17±1.15）％、（28.45±1.16）％、（35.04±1.58）％和（46.85±2.44）％，作用48 h后，细胞增殖抑制率分别为（27.55±0.65）％、（33.33±1.23）％、（46.20±4.76）％和（55.45±4.47）％，作用72 h，细胞增殖抑制率分别为（39.19±1.74）％、（44.29±2.00）％、（50.66±2.17）％和（58.84±3.18）％。正常对照组 HT-29细胞24 h 的自然总凋亡率（早期＋晚期）为（2.72±0.57）％，0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L和2.5μmol/L 17-DMAG干预24 h后细胞总凋亡率分别为（5.38±0.46）％、（6.88±0.52）％、（10.44±0.32）％与（17.87±4.66）％，17-DMAG作用HT-29细胞24 h的凋亡率与对照组细胞凋亡率相比差异有统计学意义（ P ＜0.05）。0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L 和2.5μmol/L 17-DMAG作用HT-29细胞12 h与24 h，其活性氧水平均较对照组有不同程度的上升，差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论17-DMAG体外呈时间-剂量依赖性抑制HT-29细胞增殖，诱导其凋亡，可能部分与细胞内的ROS升高有关。
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17-DMAG体外对结肠癌HT-29细胞增生和凋亡的影响
目的 观察17-二甲胺乙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-dimethylaminoethylamino-17-demethoxygeldanamyein,17-DMAG)对人结肠癌HT-29细胞增生抑制及诱导其凋亡的作用.方法 用CCK-8检测17-DMAG对结肠癌HT-29细胞增生的影响；DAPI染色在倒置荧光显微镜下观察17-DMAG作用于HT-29细胞24 h后细胞核的形态；AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞检测细胞凋亡率；免疫印迹实验分析Caspase-3蛋白表达水平变化.结果 17-DMAG呈时间-剂量-依赖性抑制HT-29细胞增生.0.1μmol/L、0.25μmol/L 、0.5μmol/L、1.0μmol/L、2.5μmol/L和0.5μmol/L作用于HT-29细胞24 h后,细胞增生抑制率分别为(14.36±0.95)％、(22.17±1.15)％、(28.45±1.16)％、(35.04±1.58)％、(46.85±2.44)％和(57.19±2.06)％；作用48h后,细胞增生抑制率分别为(20.80±1.17)％、(27.55±0.65)％、(33.33±1.23)％、(46.20±4.76)％、(55.45±4.47)％和(61.75±2.72)％；作用72h,细胞增生抑制率分别为(29.62±2.27)％、(39.19±1.74)％、(44.29±2.00)％、(50.66±2.17)％、(58.84±3.18)％和(70.74±2.65)％.DAPI染色倒置荧光显微镜观察0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L与2.5μmol/L的17-DMAG作用HT-29细胞24h,均可见到细胞凋亡的改变.AnnexinV-FITC双染法检测结果显示,正常对照组HT-29细胞24h的自然总凋亡率(早期+晚期)为(2.72±0.57)％,0.25μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L和2.5μmol/L 17-DMAG干预24 h后细胞总凋亡率分别为(5.38±0.46)％、(6.88±0.52)％、(10.44±0.32)％与(17.87±4.66)％,不同浓度组的细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P＜0.05).17-DMAG药物作用HT-29细胞24h,随着药物剂量的增加,cleaved Caspase-3的表达有增加趋势.结论 17-DMAG体外呈时间-剂量依赖性抑制HT-29细胞增生,诱导其通过Caspase-3途径凋亡.
