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细胞周期点激酶l/2的研究进展
细胞周期检测点激酶(checkpoint kinase)的作用是在DNA损伤后通过阻滞细胞周期,使受损的DNA得以修复,从而维持了基因组的保真度.已知的细胞周期检查点激酶包含:Chk1 (checkpoint kinase 1)和Chk2(checkpoint kinase 2).二者具有重叠的底物谱和相似的结构,但在不同肿瘤及其他疾病的细胞和组织中表达并不相同.目前两者的应用研究主要体现在作为肿瘤细胞的重要靶点,使用选择性的抑制剂单剂或联合放射治疗和 DNA 损伤剂治疗肿瘤及相关疾病.本文就Chk1/2的新研究进展作出简要综述.
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DNA依赖的蛋白激酶和检查点激酶1对卵巢癌细胞周期阻滞的研究
目的:探讨DNA-PK和CHK1对卵巢癌Skov3的细胞周期阻滞的机制.方法:通过对DNA-PK shRNA和CHK1 shRNA的构建及有效干扰载体的筛选,流式细胞仪检测G2期.结果:转染DNA-PK shRNA的Skov3细胞和Hela细胞经2Gy X射线照射后进入G2期的细胞比率无差异;转染CHK1 shRNA的Skov3细胞经2Gy X射线照射后4h进入G2期的细胞比率显著高于Hela细胞(t=2.618,P=0.026),28h时明显低于Hela细胞(t=2.705,P=0.022);转染DNA-PK shRNA和CHK1 shRNA的Skov3细胞经2Gy X射线照射后4h进入G2期的细胞比率显著高于Hela细胞(t=2.965,P=0.014),28h时明显低于Hela细胞(t=2.302,P=0.044).结论:干扰DNA-PK和CHK1的表达可增强卵巢癌细胞对辐射的敏感性.
关键词： 辐射敏感性 卵巢癌 DNA依赖的蛋白激酶 检查点激酶1 -
干扰检查点激酶1的表达对卵巢癌细胞G2期的影响
目的 探讨抑制检查点激酶1(CHK1)表达对卵巢癌Skov3细胞G2期的影响.方法 通过对CHK1 shRNA的构建,流式细胞仪检测Skov3细胞的G2期表达情况.结果 转染CHK1 shRNA的Skov3细胞经X射线照射后4h后,进入G2期的Skov3细胞比例为15.84％±2.19％,显著低于转染shNC的照射组(t=2.469,P=0.033),与CHK1 shRNA转染的假照射组比较有差异(t =3.812,P=0.003);28 h时进入G2期的Skov3细胞比例为5.72％±1.60％,也明显低于转染shNC的照射组(t=7.163,P＜0.001),与CHK1 shRNA转染的假照射组比较有差异(t=2.516,P=0.031).结论 抑制CHK1的表达可增强卵巢癌Skov3细胞G2期对辐射的敏感性.
