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高瘦素影响小鼠细胞因子分泌及脾淋巴细胞增殖的实验研究
目的:探讨高瘦素(Leptin)水平在不同免疫状态下对小鼠细胞因子分泌及脾淋巴细胞增殖状况的影响.方法:选用8周龄的清洁级BALB/c雄性小鼠共50只,分成5组,分别腹腔注射外源性鼠Leptin和Leptin抗体,形成小鼠的不同Leptin水平状态;应用普乐可复(FK506)将小鼠分为正常免疫和免疫抑制状态两类,两种状态各设对照组,测定脾淋巴细胞增殖情况,ELISA方法检测外周血中IL-2、IL-4、IFN-γ和Leptin的浓度.结果:正常免疫状态下,Leptin组的脾细胞增殖与对照组无差异,细胞因子除IFN-γ升高外, IL-2、IL-4均无差异;Leptin抗体组显示脾细胞增殖能力下降,各细胞因子测定显示差异;免疫抑制状态下,Leptin组的IL-2、IFN-γ水平上升、IL-4分泌降低,这种结果也在几乎所有体外加入Leptin的各组中出现.结论:Leptin可以起免疫调节作用,增加IFN-γ、IL-2的合成,降低IL-4的产生,使免疫应答向Th1细胞方向偏离.在正常免疫状态下,Leptin的免疫调节作用不明显,而在免疫抑制情况下,这种调节作用得到体现.
关键词： 瘦素/药理学 细胞因子类/药物作用/代谢 细胞增殖/药物作用 脾/细胞学 人类 -
瘦素促血管新生作用机制的探讨
目的:研究瘦素(leptin)对脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和管状结构形成能力的影响.方法:半定量RT-PCR检测HIF-1α、VEGF Mrna的表达,蛋白质印迹法检测HIF-1α和VEGF蛋白的表达.结果:10 ng/Ml leptin呈现促增殖效应.OD值为0.572±0.027,明显高于对照组的0.284±0.031(P<0.05);10 ng/Ml瘦素迁移率为(21.1±0.32)%,明显高于对照组的(9.99±0.43)%,P<0.05;管状结构的总长度为(5.8±0.5)mm,对照组无管状结构形成,P<0.05.瘦素呈剂量依赖性的上调HU-VECs HIF-1α和VEGF蛋白表达,大诱导效应发生在1 μg/Ml,对照组不表达;HIF-1α和VEGF Mrna上调直接导致HIF-1α和VEGF蛋白合成增加,对照组的缺氧模拟剂CoCl2对HIF-1α Mrna表达无影响.结论:瘦素通过促进HUVECs增殖、迁移和体外血管形成等作用促进血管新生.瘦素的促血管新生作用能够在转录和翻译水平上调HIF-1α表达,进而转录激活VEGF表达有关.
关键词： 瘦素/药理学 细胞 培养的 血管内皮生长因子类/生物合成 细胞增殖 -
Leptin对人单核细胞CD86和HLA-DR表达的影响
目的 探讨Leptin对人单核细胞协同刺激分子和HLA-DR表达的影响,为阐明瘦素在抗感染免疫中的作用提供依据.方法 采用流式细胞术检测THP-1细胞和人外周血单核细胞表面CD86和HLA-DR的表达变化.结果 经高浓度瘦素处理后,THP-1细胞CD86和HLA-DR的表达明显增强(CD86未处理组:8.78±1.66,CD86leptin10:50.76±4.29,CD86leptin100:95.20±4.90；HLA未处理组:20.75±2.12,HLAleptin10:102.14±5.75,HLAleptin100:104.32±4.75).人外周血单核细胞表面的CD86和HLA-DR的表达也出现了类似增加的现象(CD86未处理组:17.91±1.78,CD86leptin100:48.80±3.60;HLA未处理组:34.10±2.76,HLAleptin100:88.86 ±3.53).结论 瘦素可以上调人单核细胞表面协同刺激分子和MHC-Ⅱ类分子的表达,从而增强单核细胞的抗原提呈功能.
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外源性瘦素通过抑制NF-κB活性降低大鼠重症急性胰腺炎促炎因子的表达
目的 探讨外源性瘦素(leptin)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织NF-κB活性及血清炎症因子的影响.方法 Wister大鼠36只,分为假手术组、SAP动物模型组、瘦素治疗组,各12只.采用5%牛磺胆酸钠胰胆管顺行注射胰胆管制模,治疗组行外源性瘦素腹腔注射,6h后采血、取胰腺标本,检测各组动物血淀粉酶、瘦素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β的含量,采用免疫组织化学法测定NF-κB活性,并对大鼠胰腺组织进行病理学评分.结果 制模6 h后血淀粉酶、leptin、TNF-α、IL-1β水平均升高,胰腺组织NF-κB活性增高,胰腺组织出血坏死明显,外源性瘦素干预组可显著降低血淀粉酶、TNF-α及IL-1β水平,NF-κB活性降低,胰腺组织出血坏死程度减轻,NF-κB活性与炎症因子水平呈正相关.结论 外源性瘦素可能通过通过抑制NF-κB活性,降低促炎性因子TNF-α、IL-1β的产生,从而达到对SAP大鼠的保护作用.
